發(fā)布時(shí)間：2021-04-06 22:15

　　蛋白磷酸酶PP2A是絲/蘇氨酸特異性磷酸酶的主要成員,在真核生物中占到50%以上的絲/蘇氨酸磷酸酶活性。PP2A的核心酶由36kDa的催化亞基C和65kDa的結(jié)構(gòu)亞基A構(gòu)成,另外與各種不同的調(diào)節(jié)亞基B共同組成了全酶復(fù)合體。PP2A全酶復(fù)合體結(jié)構(gòu)的復(fù)雜為其PP2A功能的復(fù)雜奠定了基礎(chǔ)。PP2A在細(xì)胞代謝中具有非常重要的作用,其中包括:細(xì)胞周期的調(diào)控,細(xì)胞增殖與凋亡,生物個(gè)體發(fā)育,細(xì)胞遷移,細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)平衡,信號(hào)通路的調(diào)節(jié),目前的研究表明,PP2A是重要的腫瘤抑制基因。之前有關(guān)PP2A在前列腺癌發(fā)生中的作用的研究都集中在催化亞基和調(diào)節(jié)亞基上,而有關(guān)PP2A結(jié)構(gòu)亞基與前列腺癌發(fā)生的相關(guān)研究處于空白狀態(tài)。鑒于此種情況,我們實(shí)驗(yàn)室比較研究了前列腺癌細(xì)胞LNCaP和DU145中結(jié)構(gòu)亞基的表達(dá)水平,結(jié)果表明PP2A-A?在DU145中的表達(dá)顯著下降。此外,我們實(shí)驗(yàn)室的研究證明,CREB是調(diào)節(jié)PP2A-A?表達(dá)的重要轉(zhuǎn)錄因子之一。通過對CREB在前列腺癌LNCa P和DU145細(xì)胞中的表達(dá)比較分析,我們發(fā)現(xiàn)對A?表達(dá)起重要正向調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子CREB的表達(dá)在DU145細(xì)胞中也明顯下調(diào)。除了CREB能對... 

【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 蛋白磷酸酶 2A （protein phosphatase 2A，PP2A）
        1.1 PP2A的結(jié)構(gòu)
        1.2 PP2A 的功能
    2 轉(zhuǎn)錄因子Sp1
        2.1 Sp1的結(jié)構(gòu)
        2.2 Spl與細(xì)胞凋亡
        2.3 Spl在腫瘤中的作用
    3 轉(zhuǎn)錄因子Sp3
        3.1 Sp3的結(jié)構(gòu)
        3.2 Sp3功能
    4 本課題研究背景
第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 儀器設(shè)備
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 LNCaP和DU145細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 Western blot檢測LNCaP和DU145細(xì)胞中Sp1/3 與PP2A的表達(dá)水平
        2.3 過表達(dá)Sp1/Sp3的DU145和LNCaP細(xì)胞系的建立
        2.4 特異性siRNA對Sp1和Sp3進(jìn)行敲低
        2.5 凝膠遷移滯后（EMSA）分析 DU145 和 LNCa P 細(xì)胞核蛋白中 Sp1和 Sp3 轉(zhuǎn)錄因子與 PP2A-Aα基因啟動(dòng)子序列的體外相互作用
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
    1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.1 Western blot檢測DU145和LNCaP細(xì)胞中Sp1/3 與PP2A-Aα的表達(dá)水平
        1.2 凝膠遷移滯后對LNCaP和DU145細(xì)胞核蛋白中Sp1和Sp3與PP2A-Aα啟動(dòng)子序列體外相互作用的分析
        1.3 在LNCaP細(xì)胞中，Sp1/Sp3轉(zhuǎn)錄因子對PP2A-Aα蛋白表達(dá)水平的調(diào)控作用
        1.4 在DU145細(xì)胞中，Sp1/Sp3轉(zhuǎn)錄因子對PP2A-Aα蛋白表達(dá)水平的調(diào)控作用
    2 討論與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3122250