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SP-1/3在前列腺癌細胞DU145和LNCaP中的表達水平及對PP2A-Aα的調(diào)控作用

發(fā)布時間:2021-04-06 22:15
  蛋白磷酸酶PP2A是絲/蘇氨酸特異性磷酸酶的主要成員,在真核生物中占到50%以上的絲/蘇氨酸磷酸酶活性。PP2A的核心酶由36kDa的催化亞基C和65kDa的結(jié)構(gòu)亞基A構(gòu)成,另外與各種不同的調(diào)節(jié)亞基B共同組成了全酶復(fù)合體。PP2A全酶復(fù)合體結(jié)構(gòu)的復(fù)雜為其PP2A功能的復(fù)雜奠定了基礎(chǔ)。PP2A在細胞代謝中具有非常重要的作用,其中包括:細胞周期的調(diào)控,細胞增殖與凋亡,生物個體發(fā)育,細胞遷移,細胞骨架的動態(tài)平衡,信號通路的調(diào)節(jié),目前的研究表明,PP2A是重要的腫瘤抑制基因。之前有關(guān)PP2A在前列腺癌發(fā)生中的作用的研究都集中在催化亞基和調(diào)節(jié)亞基上,而有關(guān)PP2A結(jié)構(gòu)亞基與前列腺癌發(fā)生的相關(guān)研究處于空白狀態(tài)。鑒于此種情況,我們實驗室比較研究了前列腺癌細胞LNCaP和DU145中結(jié)構(gòu)亞基的表達水平,結(jié)果表明PP2A-A?在DU145中的表達顯著下降。此外,我們實驗室的研究證明,CREB是調(diào)節(jié)PP2A-A?表達的重要轉(zhuǎn)錄因子之一。通過對CREB在前列腺癌LNCa P和DU145細胞中的表達比較分析,我們發(fā)現(xiàn)對A?表達起重要正向調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子CREB的表達在DU145細胞中也明顯下調(diào)。除了CREB能對... 

【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:46 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 蛋白磷酸酶 2A (protein phosphatase 2A,PP2A)
        1.1 PP2A的結(jié)構(gòu)
        1.2 PP2A 的功能
    2 轉(zhuǎn)錄因子Sp1
        2.1 Sp1的結(jié)構(gòu)
        2.2 Spl與細胞凋亡
        2.3 Spl在腫瘤中的作用
    3 轉(zhuǎn)錄因子Sp3
        3.1 Sp3的結(jié)構(gòu)
        3.2 Sp3功能
    4 本課題研究背景
第二章 實驗材料和方法
    1 實驗材料與試劑
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 儀器設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 LNCaP和DU145細胞的培養(yǎng)
        2.2 Western blot檢測LNCaP和DU145細胞中Sp1/3 與PP2A的表達水平
        2.3 過表達Sp1/Sp3的DU145和LNCaP細胞系的建立
        2.4 特異性siRNA對Sp1和Sp3進行敲低
        2.5 凝膠遷移滯后(EMSA)分析 DU145 和 LNCa P 細胞核蛋白中 Sp1和 Sp3 轉(zhuǎn)錄因子與 PP2A-Aα基因啟動子序列的體外相互作用
第三章 實驗結(jié)果和討論
    1 實驗結(jié)果
        1.1 Western blot檢測DU145和LNCaP細胞中Sp1/3 與PP2A-Aα的表達水平
        1.2 凝膠遷移滯后對LNCaP和DU145細胞核蛋白中Sp1和Sp3與PP2A-Aα啟動子序列體外相互作用的分析
        1.3 在LNCaP細胞中,Sp1/Sp3轉(zhuǎn)錄因子對PP2A-Aα蛋白表達水平的調(diào)控作用
        1.4 在DU145細胞中,Sp1/Sp3轉(zhuǎn)錄因子對PP2A-Aα蛋白表達水平的調(diào)控作用
    2 討論與展望
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子Sp1與腫瘤關(guān)系研究的新進展[J]. 白雪,鄧紅.  浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2010(02)
[2]蛋白磷酸酶PP2A的結(jié)構(gòu)及其腫瘤抑制因子功能[J]. 李天祝,向本瓊.  生物化學(xué)與生物物理進展. 2009(02)
[3]Ser/Thr蛋白磷酸酶PPP家族結(jié)構(gòu)研究新進展[J]. 王柏婧,魏群.  中國科學(xué)(C輯:生命科學(xué)). 2008(07)
[4]Sp1和Sp3介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控[J]. 薛麗香,翁默,吳軍峰,張宗玉,童坦君.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2006(02)
[5]蛋白磷酸酶2A的結(jié)構(gòu)、功能和活性調(diào)節(jié)[J]. 劉衛(wèi)軍,沈瑛,丁健.  生物化學(xué)與生物物理學(xué)報. 2003(02)



本文編號:3122250

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