本文關(guān)鍵詞：miRNA-7對食管癌細(xì)胞TE-1順鉑耐藥的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景食管癌是我國常見的惡性腫瘤,目前以手術(shù)聯(lián)合放化療的綜合治療方案為主[1]。順鉑(DDP)是晚期食管癌的一線治療藥物,但較易產(chǎn)生耐藥性[2]。順鉑主要作用于細(xì)胞的DNA,可導(dǎo)致DNA損傷并誘發(fā)細(xì)胞凋亡[3]。表皮生長因子受體(EGFR)是一種具有酪氨酸激酶活性的糖蛋白,主要分布在細(xì)胞膜表面,與其配體結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞核內(nèi)EGFR可通過調(diào)節(jié)DNA修復(fù),影響腫瘤細(xì)胞對順鉑和放療的治療反應(yīng),這可能是食管癌順鉑耐藥的原因之一[4]。因此,抑制EGFR在理論上可恢復(fù)食管癌對DDP的敏感性。微小RNA-7(microRNA-7,miRNA-7)miRNA家族成員之一,可直接作用于EGFR 3`-UTR區(qū),抑制EGFR m RNA及其蛋白表達(dá)[5]。miRNA-7能否增強(qiáng)食管癌細(xì)胞對DDP敏感性尚少相關(guān)報(bào)道。目的本研究旨在通過轉(zhuǎn)染技術(shù)觀察miRNA-7過表達(dá)對食管癌TE-1細(xì)胞DDP敏感性的影響并探究其可能的機(jī)制,以期為解決食管癌DDP耐藥提供治療靶點(diǎn)。方法1.用Lipofectmin 2000法向食管癌細(xì)胞株TE-1轉(zhuǎn)染組瞬時(shí)轉(zhuǎn)miRNA-7 mimic,向轉(zhuǎn)染對照組瞬時(shí)轉(zhuǎn)染mimic Negative Control。2.通過Real time-PCR檢測以上2組及空白對照組的miRNA-7以及表皮生長因子受體(EGFR)m RNA表達(dá)情況。3.Western blot法分別檢測轉(zhuǎn)染組與轉(zhuǎn)染對照組總EGFR及細(xì)胞漿、細(xì)胞核內(nèi)EGFR蛋白表達(dá)。4.CCK-8檢測轉(zhuǎn)染組與轉(zhuǎn)染對照組TE-1的順鉑半數(shù)抑制濃度(IC50)。5.免疫熒光共聚焦顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染組與轉(zhuǎn)染對照組EGFR的表達(dá)。結(jié)果1.Real Time-PCR結(jié)果顯示:轉(zhuǎn)染組較轉(zhuǎn)染對照組及空白對照組的miRNA-7表達(dá)顯著增高,EGFR m RNA表達(dá)下降(均P0.001)。2.Western Blot結(jié)果顯示:轉(zhuǎn)染組較轉(zhuǎn)染對照組總EGFR降低,核內(nèi)EGFR增高(均P0.01),胞漿EGFR表達(dá)降低(P0.05)。3.CCK-8結(jié)果示,TE-1中miRNA-7過表達(dá)后順鉑(48 h)IC50較轉(zhuǎn)染對照組增高(P0.01)。4.免疫熒光示轉(zhuǎn)染組較轉(zhuǎn)染對照組核內(nèi)EGFR增高且胞膜與胞漿EGFR表達(dá)減少。結(jié)論食管癌細(xì)胞TE-1順鉑耐藥的機(jī)制之一是miRNA-7過表達(dá)調(diào)控EGFR核轉(zhuǎn)位增多。
【關(guān)鍵詞】：表皮生長因子受體 微小RNA-7 順鉑耐藥 核轉(zhuǎn)位 食管腫瘤
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 1 實(shí)驗(yàn)材料11-15
• 2 實(shí)驗(yàn)方法15-23
• 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23
• 4 結(jié)果23-24
• 5 討論24-25
• 6 小結(jié)25-27
• 附圖27-30
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 綜述 miRNA-7與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展33-46
• 參考文獻(xiàn)39-46
• 附錄46-47
• 外文縮略語表46
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況46-47
• 致謝47-48
• 個(gè)人簡歷48

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本文編號：311001