尖吻蝮蛇毒抑瘤組分Ⅰ誘導(dǎo)人舌鱗癌細(xì)胞凋亡中PERK/eIF2α蛋白表達(dá)意義的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-03-03 10:56
目的:探討尖吻蝮蛇毒抑瘤組分I(anti-tumor component-I from agkistrodon acutus venom,AAVC-I)誘導(dǎo)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞凋亡中,蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(protein kinase R like endoplasmic reticulum kinase,PERK)/真核生物翻譯起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)分子蛋白的檢測(cè),分析內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress,ERS)PERK/eIF2α分子蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)生的機(jī)制。方法:本實(shí)驗(yàn)選擇體外培養(yǎng)的人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞作為研究對(duì)象,以對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn),選擇ERS誘導(dǎo)劑二硫蘇糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)作為陽(yáng)性對(duì)照藥物。1、運(yùn)用MTT法檢測(cè)不同濃度的DTT(1.0、2.0、4.0、8.0mM)和AAVC-I(2.0、4.0、8.0、16.0、24.0μg/ml)處理Tca8113細(xì)胞24h后的細(xì)胞增殖抑制率,并根據(jù)細(xì)胞增殖抑制率的...
【文章來(lái)源】:皖南醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
DDT與AAVC-I處理人舌鱗癌T
皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文27正常對(duì)照組DTT4.0mMAAVC-I4.0μg/mlAAVC-I8.0μg/mlAAVC-I16.0μg/ml圖3DDT與AAVC-I處理人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞24h后細(xì)胞HE染色(×200)注:圖黑色箭頭標(biāo)識(shí)的為破裂的細(xì)胞及細(xì)胞碎片。3AnnexinV-FITC/PI雙熒光染色標(biāo)記法觀察DTT與AAVC-I對(duì)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞凋亡的影響4.0mMDTT陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)濃度組和各4.0μg/ml、8.0μg/ml、16.0μg/mlAAVC-I實(shí)驗(yàn)濃度組處理Tca8113細(xì)胞24h后,用AnnexinV-FITC/PI雙熒光試劑對(duì)細(xì)胞進(jìn)行熒光染色。熒光染色的細(xì)胞置于熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),與正常對(duì)照組相互比較,DTT陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)濃度組與各AAVC-I實(shí)驗(yàn)濃度組細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察到被熒光標(biāo)記的凋亡細(xì)胞,早期凋亡細(xì)胞的胞膜會(huì)被AnnexinV-FITC染色成明亮的蘋(píng)果綠色,而晚期凋亡細(xì)胞的胞膜除了會(huì)被染色成明亮的蘋(píng)果綠色,胞核還會(huì)被PI染色成紅-黃色,如圖4A所示。在進(jìn)一步對(duì)熒光染色的細(xì)胞用流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡細(xì)胞,結(jié)果顯示,正常對(duì)照組細(xì)胞凋亡率為(2.08±0.41)%,4.0mMDTT陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)濃度組凋亡率為(34.13±1.79)%,4.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(11.21±2.46)%,8.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(17.98±0.99)%,16.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(37.11±2.46)%,如圖4B所示。對(duì)細(xì)胞凋亡率數(shù)據(jù)進(jìn)行整理行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn),DTT陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)濃度組與各AAVC-I實(shí)驗(yàn)濃度組細(xì)胞凋亡率與正常對(duì)照組相互比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),同時(shí)各AAVC-I濃
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]MicroRNA-21在舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其對(duì)SCC9細(xì)胞凋亡的影響[J]. 劉長(zhǎng)富,佟周,譚婧玉,辛增璽,劉晶,王稚英,田璐鳴. 當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2020(06)
[2]尖吻蝮蛇毒組分Ⅰ對(duì)人口腔鱗狀細(xì)胞癌HN4細(xì)胞凋亡及自噬的影響[J]. 黃婷婷,柴琳,王振杰,俞玲. 東南國(guó)防醫(yī)藥. 2020(01)
[3]中醫(yī)藥調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激防治疾病的研究進(jìn)展[J]. 劉蓉,唐方,凌;,梁棻. 天津中醫(yī)藥. 2020(01)
[4]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路相關(guān)蛋白ATF4及CHOP在主動(dòng)脈夾層中的表達(dá)以及意義[J]. 陳若詩(shī),吳琪,王志維. 中國(guó)循證心血管醫(yī)學(xué)雜志. 2019(12)
[5]長(zhǎng)鏈非編碼RNA MEG3對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡及人結(jié)腸癌裸鼠移植瘤模型生長(zhǎng)的影響[J]. 胥光熱,林靜,賈貴清,鄒丹. 西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020(01)
[6]一氧化氮清除劑Carboxy-PTIO對(duì)短暫性局灶性腦缺血大鼠PERK/p-eIF2α通路的調(diào)節(jié)作用[J]. 黃語(yǔ)悠,房亞蘭,師文娟,劉克建,趙詠梅,丁錨,羅玉敏. 首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(05)
[7]黃芩苷增強(qiáng)阿霉素抗人舌癌細(xì)胞活性及其機(jī)制研究[J]. 褚冬青,馬春宇. 中藥新藥與臨床藥理. 2019(09)
[8]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在肝衰竭發(fā)病機(jī)制中的作用[J]. 張向穎,任鋒. 臨床肝膽病雜志. 2019(09)
[9]積雪草苷調(diào)控GRP78/PERK/CHOP通路對(duì)急性心肌梗死大鼠的心肌保護(hù)作用研究[J]. 楊勇,殷紅珍,胡云飛. 中國(guó)中醫(yī)急癥. 2019(09)
[10]過(guò)表達(dá)miR-218對(duì)舌鱗癌細(xì)胞系SCC-4和SCC-9的增殖和侵襲的影響[J]. 馮小東,易文,殷衛(wèi)紅. 上?谇会t(yī)學(xué). 2019(04)
碩士論文
[1]海蛇蛇毒抗炎活性肽Hydrostatin-SN10的靶點(diǎn)專一性及其結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究[D]. 李安.中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué) 2018
[2]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和凋亡PERK-eIF2α-CHOP信號(hào)通路在甲基苯丙胺慢性肺毒性機(jī)制中的研究[D]. 顧愚漢.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2018
本文編號(hào):3061146
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【部分圖文】:
DDT與AAVC-I處理人舌鱗癌T
皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文27正常對(duì)照組DTT4.0mMAAVC-I4.0μg/mlAAVC-I8.0μg/mlAAVC-I16.0μg/ml圖3DDT與AAVC-I處理人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞24h后細(xì)胞HE染色(×200)注:圖黑色箭頭標(biāo)識(shí)的為破裂的細(xì)胞及細(xì)胞碎片。3AnnexinV-FITC/PI雙熒光染色標(biāo)記法觀察DTT與AAVC-I對(duì)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞凋亡的影響4.0mMDTT陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)濃度組和各4.0μg/ml、8.0μg/ml、16.0μg/mlAAVC-I實(shí)驗(yàn)濃度組處理Tca8113細(xì)胞24h后,用AnnexinV-FITC/PI雙熒光試劑對(duì)細(xì)胞進(jìn)行熒光染色。熒光染色的細(xì)胞置于熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),與正常對(duì)照組相互比較,DTT陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)濃度組與各AAVC-I實(shí)驗(yàn)濃度組細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察到被熒光標(biāo)記的凋亡細(xì)胞,早期凋亡細(xì)胞的胞膜會(huì)被AnnexinV-FITC染色成明亮的蘋(píng)果綠色,而晚期凋亡細(xì)胞的胞膜除了會(huì)被染色成明亮的蘋(píng)果綠色,胞核還會(huì)被PI染色成紅-黃色,如圖4A所示。在進(jìn)一步對(duì)熒光染色的細(xì)胞用流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡細(xì)胞,結(jié)果顯示,正常對(duì)照組細(xì)胞凋亡率為(2.08±0.41)%,4.0mMDTT陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)濃度組凋亡率為(34.13±1.79)%,4.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(11.21±2.46)%,8.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(17.98±0.99)%,16.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(37.11±2.46)%,如圖4B所示。對(duì)細(xì)胞凋亡率數(shù)據(jù)進(jìn)行整理行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn),DTT陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)濃度組與各AAVC-I實(shí)驗(yàn)濃度組細(xì)胞凋亡率與正常對(duì)照組相互比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),同時(shí)各AAVC-I濃
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]MicroRNA-21在舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其對(duì)SCC9細(xì)胞凋亡的影響[J]. 劉長(zhǎng)富,佟周,譚婧玉,辛增璽,劉晶,王稚英,田璐鳴. 當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2020(06)
[2]尖吻蝮蛇毒組分Ⅰ對(duì)人口腔鱗狀細(xì)胞癌HN4細(xì)胞凋亡及自噬的影響[J]. 黃婷婷,柴琳,王振杰,俞玲. 東南國(guó)防醫(yī)藥. 2020(01)
[3]中醫(yī)藥調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激防治疾病的研究進(jìn)展[J]. 劉蓉,唐方,凌;,梁棻. 天津中醫(yī)藥. 2020(01)
[4]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路相關(guān)蛋白ATF4及CHOP在主動(dòng)脈夾層中的表達(dá)以及意義[J]. 陳若詩(shī),吳琪,王志維. 中國(guó)循證心血管醫(yī)學(xué)雜志. 2019(12)
[5]長(zhǎng)鏈非編碼RNA MEG3對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡及人結(jié)腸癌裸鼠移植瘤模型生長(zhǎng)的影響[J]. 胥光熱,林靜,賈貴清,鄒丹. 西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020(01)
[6]一氧化氮清除劑Carboxy-PTIO對(duì)短暫性局灶性腦缺血大鼠PERK/p-eIF2α通路的調(diào)節(jié)作用[J]. 黃語(yǔ)悠,房亞蘭,師文娟,劉克建,趙詠梅,丁錨,羅玉敏. 首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(05)
[7]黃芩苷增強(qiáng)阿霉素抗人舌癌細(xì)胞活性及其機(jī)制研究[J]. 褚冬青,馬春宇. 中藥新藥與臨床藥理. 2019(09)
[8]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在肝衰竭發(fā)病機(jī)制中的作用[J]. 張向穎,任鋒. 臨床肝膽病雜志. 2019(09)
[9]積雪草苷調(diào)控GRP78/PERK/CHOP通路對(duì)急性心肌梗死大鼠的心肌保護(hù)作用研究[J]. 楊勇,殷紅珍,胡云飛. 中國(guó)中醫(yī)急癥. 2019(09)
[10]過(guò)表達(dá)miR-218對(duì)舌鱗癌細(xì)胞系SCC-4和SCC-9的增殖和侵襲的影響[J]. 馮小東,易文,殷衛(wèi)紅. 上?谇会t(yī)學(xué). 2019(04)
碩士論文
[1]海蛇蛇毒抗炎活性肽Hydrostatin-SN10的靶點(diǎn)專一性及其結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究[D]. 李安.中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué) 2018
[2]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和凋亡PERK-eIF2α-CHOP信號(hào)通路在甲基苯丙胺慢性肺毒性機(jī)制中的研究[D]. 顧愚漢.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2018
本文編號(hào):3061146
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