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尖吻蝮蛇毒抑瘤組分Ⅰ誘導(dǎo)人舌鱗癌細胞凋亡中PERK/eIF2α蛋白表達意義的研究

發(fā)布時間:2021-03-03 10:56
  目的:探討尖吻蝮蛇毒抑瘤組分I(anti-tumor component-I from agkistrodon acutus venom,AAVC-I)誘導(dǎo)人舌鱗癌Tca8113細胞凋亡中,蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(protein kinase R like endoplasmic reticulum kinase,PERK)/真核生物翻譯起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)分子蛋白的檢測,分析內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress,ERS)PERK/eIF2α分子蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)生的機制。方法:本實驗選擇體外培養(yǎng)的人舌鱗癌Tca8113細胞作為研究對象,以對數(shù)生長期細胞進行實驗,選擇ERS誘導(dǎo)劑二硫蘇糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)作為陽性對照藥物。1、運用MTT法檢測不同濃度的DTT(1.0、2.0、4.0、8.0mM)和AAVC-I(2.0、4.0、8.0、16.0、24.0μg/ml)處理Tca8113細胞24h后的細胞增殖抑制率,并根據(jù)細胞增殖抑制率的... 

【文章來源】:皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

尖吻蝮蛇毒抑瘤組分Ⅰ誘導(dǎo)人舌鱗癌細胞凋亡中PERK/eIF2α蛋白表達意義的研究


DDT與AAVC-I處理人舌鱗癌T

細胞,鱗癌,熒光,濃度


皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文27正常對照組DTT4.0mMAAVC-I4.0μg/mlAAVC-I8.0μg/mlAAVC-I16.0μg/ml圖3DDT與AAVC-I處理人舌鱗癌Tca8113細胞24h后細胞HE染色(×200)注:圖黑色箭頭標(biāo)識的為破裂的細胞及細胞碎片。3AnnexinV-FITC/PI雙熒光染色標(biāo)記法觀察DTT與AAVC-I對人舌鱗癌Tca8113細胞凋亡的影響4.0mMDTT陽性對照實驗濃度組和各4.0μg/ml、8.0μg/ml、16.0μg/mlAAVC-I實驗濃度組處理Tca8113細胞24h后,用AnnexinV-FITC/PI雙熒光試劑對細胞進行熒光染色。熒光染色的細胞置于熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),與正常對照組相互比較,DTT陽性對照實驗濃度組與各AAVC-I實驗濃度組細胞在熒光顯微鏡下觀察到被熒光標(biāo)記的凋亡細胞,早期凋亡細胞的胞膜會被AnnexinV-FITC染色成明亮的蘋果綠色,而晚期凋亡細胞的胞膜除了會被染色成明亮的蘋果綠色,胞核還會被PI染色成紅-黃色,如圖4A所示。在進一步對熒光染色的細胞用流式細胞儀檢測凋亡細胞,結(jié)果顯示,正常對照組細胞凋亡率為(2.08±0.41)%,4.0mMDTT陽性對照實驗濃度組凋亡率為(34.13±1.79)%,4.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(11.21±2.46)%,8.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(17.98±0.99)%,16.0μg/mlAAVC-I濃度組凋亡率為(37.11±2.46)%,如圖4B所示。對細胞凋亡率數(shù)據(jù)進行整理行統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn),DTT陽性對照實驗濃度組與各AAVC-I實驗濃度組細胞凋亡率與正常對照組相互比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),同時各AAVC-I濃

【參考文獻】:
期刊論文
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[3]中醫(yī)藥調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激防治疾病的研究進展[J]. 劉蓉,唐方,凌;,梁棻.  天津中醫(yī)藥. 2020(01)
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碩士論文
[1]海蛇蛇毒抗炎活性肽Hydrostatin-SN10的靶點專一性及其結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究[D]. 李安.中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué) 2018
[2]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和凋亡PERK-eIF2α-CHOP信號通路在甲基苯丙胺慢性肺毒性機制中的研究[D]. 顧愚漢.中國醫(yī)科大學(xué) 2018



本文編號:3061146

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