第一部分目的和方法:利用搭載了干擾PLCε的慢病毒及空白對照組轉(zhuǎn)染前列腺癌細(xì)胞株DU145和PC3,經(jīng)過嚴(yán)格篩選后獲得穩(wěn)定低表達(dá)PLCε的前列腺癌細(xì)胞株LV-shPLCε及其陰性對照組LV-HK,利用qRT-PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)測定其基因水平和蛋白水平的表達(dá),并利用MTT法及集落形成實(shí)驗(yàn)對其增殖能力進(jìn)行測定。結(jié)果:搭載了干擾PLCε的慢病毒及空白對照組轉(zhuǎn)染前列腺癌細(xì)胞株DU145和PC3后,通過病毒自帶熒光標(biāo)簽檢測后可以看到,病毒成功轉(zhuǎn)入細(xì)胞中,后經(jīng)過多次細(xì)胞傳代及篩選后,得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染PLCε敲減的前列腺癌細(xì)胞株DU145（LV-shPLCε組）和PC3（LV-shPLCε組）,并且,同時(shí)得到DU145及PC3的陰性空載對照組（LV-HK組）。后經(jīng)過qRT-PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)檢測,觀察到PLCε在基因水平及蛋白水平上出現(xiàn)了明顯的降低。同時(shí),采用MTT法及集落形成實(shí)驗(yàn)對前列腺癌細(xì)胞的增殖能力進(jìn)行測定,發(fā)現(xiàn)在敲減了 PLCε的表達(dá)后,前列腺癌細(xì)胞的增殖能力出現(xiàn)了降低。結(jié)論:搭載了 PLCε干擾的慢病毒很好的敲減了 PLCε在前列腺癌... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３?ＭＴＴ法檢測ＤＵ１４Ｓ和ＰＣ３前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染ＰＬＣｓ敲低慢病毒后細(xì)胞增殖能力的變化??－

細(xì)胞ＤＵ１４５及ＰＣ３的增殖能力出現(xiàn)了降低（圖３）。同樣的，細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)??也同樣證實(shí)了，在敲低ＰＬＣｓ表達(dá)的情況下，前列腺癌細(xì)胞ＤＵ１４５及ＰＣ３的增殖??能力出現(xiàn)了降低（圖４）。??Ａ?ＤＵ１４５?Ｂ?ＰＣ３??？０．８－，?？０．８－，??ｃ?＋?Ｂｌａｎｋ?〇?Ｂｌａｎｋ??１０．６－?＾ＪＬ?２０，６－?－匪??ａ?ＬＶ－ｓｈｐＬＣｓ?％?－＊■?ＬＶ－ｓｈＰＬＣｓ??ｒ?ｒ．??Ｉ?〇－２－?二?＾?｜〇－２－??＝?云??ｇ?〇．〇Ｊ?１?１?１?１?？〇．〇－！?１?１?１?１??２４?４８?７２?９６?０?２４?４８?７２?９６??■ｎｍｅｓ（ｈｏｕｒｓ）?Ｔｉｍｅｓ（ｈｏｕｒｓ）??圖３?ＭＴＴ法檢測ＤＵ１４Ｓ和ＰＣ３前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染ＰＬＣｓ敲低慢病毒后細(xì)胞增殖能力的變化??Ｆｉｇ?３?ＰＬＣｃ?ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ?ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ?ＰＣａ?ｃｅｌｌｓ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｉｎ?ＤＵ１４５?ａｎｄ?ＰＣ３?ＰＣａ?ｃｅｌｌ??ｌｉｎｅｓ．??Ａ．ＭＴＴ?ａｓｓａｙｓ?ｒｅｖｅａｌｅｄ?ｔｈａｔ?ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＰＬＣｃ?ｒｅｄｕｃｅｄ?ｃｅｌｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?ＤＵ１４５


本文編號：3053823