胃癌肝轉(zhuǎn)移中循環(huán)腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-17 06:17
[目的]胃癌是危害人類健康的主要惡性腫瘤之一,胃癌轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致腫瘤患者死亡的最主要原因。從不同的方面深入認(rèn)識(shí)胃癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制將有助于對(duì)胃癌的轉(zhuǎn)移做出早期診斷并指導(dǎo)臨床,對(duì)提高患者的生存率、改善預(yù)后具有重要的意義。本研究旨在探討胃癌肝轉(zhuǎn)移過程中循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cells,CTCs)發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Mesenchymal-Epithelial Transition,MET)與肝轉(zhuǎn)移的關(guān)系,為胃癌轉(zhuǎn)移提供新的理論依據(jù),為胃癌轉(zhuǎn)移的靶向治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。[方法]培養(yǎng)MKN28細(xì)胞并使用終濃度1Ong/ml的TGFβ-1重組蛋白培養(yǎng)48h處理MKN28細(xì)胞。取Balb/c裸小鼠共12只,用TGFβ-1誘導(dǎo)后的MKN28細(xì)胞進(jìn)行靜脈注射接種腫瘤細(xì)胞,成功建立胃癌肝轉(zhuǎn)移小鼠模型。取癌種轉(zhuǎn)移的肝組織進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)。肝組織制作病理切片,HE染色觀察病理結(jié)構(gòu);取外周血液獲得CTCs,采用密度梯度離心法分離CTCs,免疫熒光染色確認(rèn)分離得到CTCs。另將胃癌細(xì)胞MKN28、CTCs、...
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1腫瘤轉(zhuǎn)移的過程(引自Science,?2011)??
2?CTCs鑒定??CTCs判定方法:血液中的CTCs源于實(shí)體上皮瘤,可能表達(dá)上皮標(biāo)志物??CK19;同時(shí),CTCs為非血源性細(xì)胞,不表達(dá)血源性標(biāo)志物CD45。如圖3,免??疫熒光鑒定:熒光顯微鏡下CK19呈綠色熒光,CD45呈紅色熒光,細(xì)胞核呈藍(lán)??色熒光,鑒定結(jié)果顯示細(xì)胞表達(dá)CK19,不表達(dá)CD45。由此可知密度離心法所??得細(xì)胞為CTCs。??—??圖3?CTCs免疫熒光鑒定(X200,?X400)??18??
正常小鼠G肝細(xì)胞排列成索狀,肝竇由中央靜脈向四周發(fā)射并與中??央靜脈相通;而靜脈注射接種腫瘤細(xì)胞小鼠A-F中央靜脈壁增厚,大量炎性細(xì)胞??浸潤,可見多核的腫瘤細(xì)胞;以此確認(rèn)成功建立胃癌轉(zhuǎn)移模型。??:■、:盡::猜?.??A?B??■cm?'t::,??:v’氣》f?戶,?.??C?D??隹攀:.:::‘■_:允?.氣w??,,.,、、.::入3:.?:'勢(shì)\、??E
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TGF-β1誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與CD133表達(dá)研究[J]. 鐘志鳳,杜金林,王建平,金晰函,戴劍. 浙江醫(yī)學(xué). 2016(15)
[2]miR-9的表達(dá)異常對(duì)胃癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[J]. 宋皓軍,周為東,丁小云. 現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué). 2016(07)
[3]低氧介導(dǎo)信號(hào)通路調(diào)控腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展[J]. 陳燦,張小梅,楊力,呂永鋼. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2016(03)
[4]調(diào)控對(duì)氧磷酶1基因?qū)毙詳硵澄分卸拘∈蟾窝趸瘬p傷的保護(hù)作用[J]. 郭瑞娟,陳隆望,連潔,吳斌,洪廣亮,葛赟,劉瑤,邱俏檬,盧中秋. 中華危重病急救醫(yī)學(xué). 2015 (04)
[5]胃癌外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞水平及其臨床意義[J]. 曹中正,丁連安,牛冬光,權(quán)琳. 臨床腫瘤學(xué)雜志. 2014(06)
[6]Role of epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer initiation and progression[J]. Zhao Peng,Chen-Xiao Wang,Er-Hu Fang,Guo-Bin Wang,Qiang Tong. World Journal of Gastroenterology. 2014(18)
[7]TGF-β1誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及促進(jìn)干細(xì)胞特性獲得的研究[J]. 蔡成,俞繼衛(wèi),吳巨鋼,陸瑞祺,倪曉春,王守練,姜波健. 國際外科學(xué)雜志. 2012 (12)
[8]中國2008年消化道常見惡性腫瘤發(fā)病、死亡和患病情況的估計(jì)及預(yù)測(cè)[J]. 任建松,李倩,關(guān)鵬,代敏,楊玲. 中華流行病學(xué)雜志. 2012 (10)
[9]乳腺癌細(xì)胞Twist和Trkb的表達(dá)及其意義[J]. 歐武陵,胡勝,余偉江,吳月兵. 武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(02)
本文編號(hào):2982355
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1腫瘤轉(zhuǎn)移的過程(引自Science,?2011)??
2?CTCs鑒定??CTCs判定方法:血液中的CTCs源于實(shí)體上皮瘤,可能表達(dá)上皮標(biāo)志物??CK19;同時(shí),CTCs為非血源性細(xì)胞,不表達(dá)血源性標(biāo)志物CD45。如圖3,免??疫熒光鑒定:熒光顯微鏡下CK19呈綠色熒光,CD45呈紅色熒光,細(xì)胞核呈藍(lán)??色熒光,鑒定結(jié)果顯示細(xì)胞表達(dá)CK19,不表達(dá)CD45。由此可知密度離心法所??得細(xì)胞為CTCs。??—??圖3?CTCs免疫熒光鑒定(X200,?X400)??18??
正常小鼠G肝細(xì)胞排列成索狀,肝竇由中央靜脈向四周發(fā)射并與中??央靜脈相通;而靜脈注射接種腫瘤細(xì)胞小鼠A-F中央靜脈壁增厚,大量炎性細(xì)胞??浸潤,可見多核的腫瘤細(xì)胞;以此確認(rèn)成功建立胃癌轉(zhuǎn)移模型。??:■、:盡::猜?.??A?B??■cm?'t::,??:v’氣》f?戶,?.??C?D??隹攀:.:::‘■_:允?.氣w??,,.,、、.::入3:.?:'勢(shì)\、??E
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TGF-β1誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與CD133表達(dá)研究[J]. 鐘志鳳,杜金林,王建平,金晰函,戴劍. 浙江醫(yī)學(xué). 2016(15)
[2]miR-9的表達(dá)異常對(duì)胃癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[J]. 宋皓軍,周為東,丁小云. 現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué). 2016(07)
[3]低氧介導(dǎo)信號(hào)通路調(diào)控腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展[J]. 陳燦,張小梅,楊力,呂永鋼. 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2016(03)
[4]調(diào)控對(duì)氧磷酶1基因?qū)毙詳硵澄分卸拘∈蟾窝趸瘬p傷的保護(hù)作用[J]. 郭瑞娟,陳隆望,連潔,吳斌,洪廣亮,葛赟,劉瑤,邱俏檬,盧中秋. 中華危重病急救醫(yī)學(xué). 2015 (04)
[5]胃癌外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞水平及其臨床意義[J]. 曹中正,丁連安,牛冬光,權(quán)琳. 臨床腫瘤學(xué)雜志. 2014(06)
[6]Role of epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer initiation and progression[J]. Zhao Peng,Chen-Xiao Wang,Er-Hu Fang,Guo-Bin Wang,Qiang Tong. World Journal of Gastroenterology. 2014(18)
[7]TGF-β1誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及促進(jìn)干細(xì)胞特性獲得的研究[J]. 蔡成,俞繼衛(wèi),吳巨鋼,陸瑞祺,倪曉春,王守練,姜波健. 國際外科學(xué)雜志. 2012 (12)
[8]中國2008年消化道常見惡性腫瘤發(fā)病、死亡和患病情況的估計(jì)及預(yù)測(cè)[J]. 任建松,李倩,關(guān)鵬,代敏,楊玲. 中華流行病學(xué)雜志. 2012 (10)
[9]乳腺癌細(xì)胞Twist和Trkb的表達(dá)及其意義[J]. 歐武陵,胡勝,余偉江,吳月兵. 武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(02)
本文編號(hào):2982355
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