乳腺癌腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞靶向肽BRBP1結(jié)合相關(guān)蛋白分子的鑒定
發(fā)布時間:2021-01-06 18:53
乳腺癌(breast cancer)嚴(yán)重威脅女性的健康與生命。乳腺癌轉(zhuǎn)移至骨、腦、肺等器官增加了乳腺癌的治療難度,也降低了患者的生存質(zhì)量。乳腺癌腦轉(zhuǎn)移(breast cancer brain metastases,BCBM)患者的中位生存時間短,確診BCBM后一年內(nèi)死亡率約為80%,即使很小的損傷也可能會導(dǎo)致神經(jīng)功能病變,影響生活質(zhì)量。研究乳腺癌腦轉(zhuǎn)移的機(jī)制、尋找乳腺癌細(xì)胞膜表面與腦轉(zhuǎn)移有關(guān)的靶蛋白,對乳腺癌腦轉(zhuǎn)移的早期診斷及治療具有重要意義。本實驗室前期通過噬菌體展示肽庫篩選技術(shù)(Phage display technology)進(jìn)行全細(xì)胞消減篩選,獲得能與人乳腺癌專一性腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞系231-BR結(jié)合的多肽,命名為BRBP1(專利號:ZL201210538671.4),體內(nèi)體外實驗均證明該肽與231-BR細(xì)胞呈特異性結(jié)合;臨床乳腺癌病理切片結(jié)果也顯示BRBP1肽與人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織標(biāo)本特異性結(jié)合且傾向結(jié)合高轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細(xì)胞。因此,尋找與BRBP1肽結(jié)合的靶蛋白,對探索乳腺癌腦轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制,深度認(rèn)識及拓寬BRBP1肽的應(yīng)用價值有重要意義。本實驗室前期真核表達(dá)BRBP1-Fc肽體,...
【文章來源】:東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:101 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
人乳腺癌細(xì)胞中MVPmRNA的表達(dá)(a)MVP溶解曲線;(b)MVP分子mRNA在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7細(xì)胞中的表達(dá)
第二章 乳腺癌細(xì)胞靶向肽 BRBP1 與 MVP 分子相關(guān)性的鑒定我們通過 Western blot、細(xì)胞免疫熒光實驗、流式細(xì)胞術(shù)驗證 MVP 在人乳腺癌細(xì)胞 231-BR、MDA-MB-231、MCF-7 細(xì)胞中的表達(dá)。如圖(2-2、2-3、2-4)結(jié)果顯示,MVP 在 231-BR、MDA-MB-231 中均有表達(dá)且在 231-BR 細(xì)胞中表達(dá)程度高于 MDA-MB-231 細(xì)胞,在 MCF-7 中低表達(dá),流式實驗結(jié)果進(jìn)一步顯示MVP 蛋白在 231-BR、MDA-MB231 和 MCF-7 細(xì)胞表面的表達(dá)分別為 73.86%、57.29%和 32.71%,與 mRNA 檢測結(jié)果一致,符合 BRBP1 期望靶蛋白的分布情況。因此,我們后續(xù)將干擾 MVP 分子在 231-BR 細(xì)胞中的表達(dá),以期驗證 MVP是否為 BRBP1 的靶蛋白。
細(xì)胞免疫熒光驗證MVP分子在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7細(xì)胞的表達(dá)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]乳腺癌腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞系靶向肽體的表達(dá)與特異性鑒定[J]. 楊姣姣,張瑩,沈宇清,王潔,付波,張建瓊. 東南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(03)
[3]腫瘤歸巢肽的研究進(jìn)展[J]. 朱蕾蕾,任建麗,周志益. 腫瘤. 2016(05)
[4]體內(nèi)示蹤技術(shù)評價噬菌體展示肽GX1特異靶向胃癌新生血管[J]. 惠曉麗,梁樹輝,劉洋,劉驚濤,吳開春. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2015(14)
[5]受體-配體結(jié)合的質(zhì)譜分析方法研究進(jìn)展[J]. 孔愛英,喬晉萍,武仙英,鄧艾芳. 中國藥學(xué)雜志. 2013(15)
[6]Affinity peptide developed by phage display selection for targeting gastric cancer[J]. Arun Budha,Thomas D Wang. World Journal of Gastroenterology. 2012(17)
[7]蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 徐國恒. 生物學(xué)通報. 2010(03)
[8]RGD肽與整合素αvβ3受體結(jié)合的構(gòu)效關(guān)系及放射性標(biāo)記配體的設(shè)計[J]. 張春麗,楊銘,王榮福. 腫瘤學(xué)雜志. 2009(01)
[9]應(yīng)用免疫沉淀-質(zhì)譜法篩選腫瘤血管靶向肽CGNSNPKSC的結(jié)合受體[J]. 賀莉,吳開春,惠曉莉,陳瑜,梁樹輝,陳蓓,曹姍姍,閆堃,韓宇,姚芳芳,楊利萍,韓英,樊代明. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2008(08)
[10]T7噬菌體展示技術(shù)篩選丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3的相互作用蛋白[J]. 黃英,蔡雪飛,何茂銳,張君,黃愛龍. 中華肝臟病雜志. 2006(08)
本文編號:2961086
【文章來源】:東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:101 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
人乳腺癌細(xì)胞中MVPmRNA的表達(dá)(a)MVP溶解曲線;(b)MVP分子mRNA在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7細(xì)胞中的表達(dá)
第二章 乳腺癌細(xì)胞靶向肽 BRBP1 與 MVP 分子相關(guān)性的鑒定我們通過 Western blot、細(xì)胞免疫熒光實驗、流式細(xì)胞術(shù)驗證 MVP 在人乳腺癌細(xì)胞 231-BR、MDA-MB-231、MCF-7 細(xì)胞中的表達(dá)。如圖(2-2、2-3、2-4)結(jié)果顯示,MVP 在 231-BR、MDA-MB-231 中均有表達(dá)且在 231-BR 細(xì)胞中表達(dá)程度高于 MDA-MB-231 細(xì)胞,在 MCF-7 中低表達(dá),流式實驗結(jié)果進(jìn)一步顯示MVP 蛋白在 231-BR、MDA-MB231 和 MCF-7 細(xì)胞表面的表達(dá)分別為 73.86%、57.29%和 32.71%,與 mRNA 檢測結(jié)果一致,符合 BRBP1 期望靶蛋白的分布情況。因此,我們后續(xù)將干擾 MVP 分子在 231-BR 細(xì)胞中的表達(dá),以期驗證 MVP是否為 BRBP1 的靶蛋白。
細(xì)胞免疫熒光驗證MVP分子在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7細(xì)胞的表達(dá)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]乳腺癌腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞系靶向肽體的表達(dá)與特異性鑒定[J]. 楊姣姣,張瑩,沈宇清,王潔,付波,張建瓊. 東南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(03)
[3]腫瘤歸巢肽的研究進(jìn)展[J]. 朱蕾蕾,任建麗,周志益. 腫瘤. 2016(05)
[4]體內(nèi)示蹤技術(shù)評價噬菌體展示肽GX1特異靶向胃癌新生血管[J]. 惠曉麗,梁樹輝,劉洋,劉驚濤,吳開春. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2015(14)
[5]受體-配體結(jié)合的質(zhì)譜分析方法研究進(jìn)展[J]. 孔愛英,喬晉萍,武仙英,鄧艾芳. 中國藥學(xué)雜志. 2013(15)
[6]Affinity peptide developed by phage display selection for targeting gastric cancer[J]. Arun Budha,Thomas D Wang. World Journal of Gastroenterology. 2012(17)
[7]蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 徐國恒. 生物學(xué)通報. 2010(03)
[8]RGD肽與整合素αvβ3受體結(jié)合的構(gòu)效關(guān)系及放射性標(biāo)記配體的設(shè)計[J]. 張春麗,楊銘,王榮福. 腫瘤學(xué)雜志. 2009(01)
[9]應(yīng)用免疫沉淀-質(zhì)譜法篩選腫瘤血管靶向肽CGNSNPKSC的結(jié)合受體[J]. 賀莉,吳開春,惠曉莉,陳瑜,梁樹輝,陳蓓,曹姍姍,閆堃,韓宇,姚芳芳,楊利萍,韓英,樊代明. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2008(08)
[10]T7噬菌體展示技術(shù)篩選丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3的相互作用蛋白[J]. 黃英,蔡雪飛,何茂銳,張君,黃愛龍. 中華肝臟病雜志. 2006(08)
本文編號:2961086
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/zlx/2961086.html
最近更新
教材專著