目的:檢測膀胱癌細胞中SPOCK1（sparc/osteonectin,cwcv and kazal-like domains proteoglycan 1）基因的表達情況,并進一步研究下調SPOCK1基因表達對膀胱癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響。方法 :采用實時熒光定量PCR和蛋白質印跡法檢測人輸尿管上皮永生化細胞SV-HUC-1以及膀胱癌細胞株5637和T24中SPOCK1基因的表達情況。構建特異性針對SPOCK1基因的si RNA片段,并將其通過脂質體介導轉染至膀胱癌5637細胞;同時設立未轉染的空白對照組和轉染無義序列的陰性對照組。采用實時熒光定量PCR法和蛋白質印跡法檢測各組細胞中SPOCK1 m RNA和蛋白的表達差異。然后采用CCK-8法、劃痕愈合實驗和Transwell小室法分別檢測SPOCK1基因表達下調后膀胱癌細胞增殖、遷移和侵襲能力的變化情況。結果 :膀胱癌細胞中SPOCK1基因表達水平高于輸尿管上皮永生化細胞,尤以膀胱癌5637細胞中的表達水平最高（P值均<0.05）。SPOCK1 si RNA轉染后,膀胱癌5637細胞中SPOCK1基因的表達明顯下調（P&... 

【文章來源】：腫瘤. 2017,37(09)北大核心

【文章頁數】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 細胞及細胞培養(yǎng)
    1.3 實時熒光定量PCR法檢測SPOCK1 m RNA表達
    1.4 蛋白質印跡法檢測SPOCK1蛋白的表達
    1.5 構建si RNA片段并轉染膀胱癌5637細胞
    1.6 CCK-8法檢測膀胱癌細胞的增殖能力
    1.7 細胞劃痕愈合實驗檢測膀胱癌細胞的遷移能力
    1.8 Transwell小室法檢測膀胱癌細胞的侵襲能力
    1.9 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 膀胱癌細胞中SPOCK1基因高表達
    2.2 si RNA轉染后膀胱癌5637細胞中SPOCK1基因表達下調
    2.3 SPOCK1基因表達下調后膀胱癌5637細胞的增殖能力下降
    2.4 SPOCK1基因表達下調后膀胱癌5637細胞的遷移能力下降
    2.5 SPOCK1基因表達下調后膀胱癌5637細胞的侵襲能力下降
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]長鏈非編碼RNA NBAT1表達下調對膀胱癌5637細胞生物學行為的影響[J]. 邵鳳平,王志平.  腫瘤. 2017(01)
[2]SPOCK1的生物學研究進展[J]. 畢丹丹,成秉林,葛瑞勝,張淑君.  醫(yī)學研究雜志. 2016(05)
[3]SPOCK1蛋白結構和功能與腫瘤的研究進展[J]. 國昊楠,彭士云.  實用腫瘤學雜志. 2015 (04)
[4]2003—2007年中國腫瘤登記地區(qū)膀胱癌的發(fā)病與死亡分析[J]. 溫登瑰,單保恩,張思維,鄭榮壽,王寒松,張莉梅,畢學娟,陳萬青.  腫瘤. 2012(04)
[5]應重視膀胱腫瘤復發(fā)的研究[J]. 孔垂?jié)?  中華醫(yī)學雜志. 2010 (18)



本文編號：2960693