發(fā)布時(shí)間：2021-01-06 13:56

　　目的:檢測(cè)膀胱癌細(xì)胞中SPOCK1（sparc/osteonectin,cwcv and kazal-like domains proteoglycan 1）基因的表達(dá)情況,并進(jìn)一步研究下調(diào)SPOCK1基因表達(dá)對(duì)膀胱癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響。方法 :采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)人輸尿管上皮永生化細(xì)胞SV-HUC-1以及膀胱癌細(xì)胞株5637和T24中SPOCK1基因的表達(dá)情況。構(gòu)建特異性針對(duì)SPOCK1基因的si RNA片段,并將其通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染至膀胱癌5637細(xì)胞;同時(shí)設(shè)立未轉(zhuǎn)染的空白對(duì)照組和轉(zhuǎn)染無(wú)義序列的陰性對(duì)照組。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)各組細(xì)胞中SPOCK1 m RNA和蛋白的表達(dá)差異。然后采用CCK-8法、劃痕愈合實(shí)驗(yàn)和Transwell小室法分別檢測(cè)SPOCK1基因表達(dá)下調(diào)后膀胱癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的變化情況。結(jié)果 :膀胱癌細(xì)胞中SPOCK1基因表達(dá)水平高于輸尿管上皮永生化細(xì)胞,尤以膀胱癌5637細(xì)胞中的表達(dá)水平最高（P值均<0.05）。SPOCK1 si RNA轉(zhuǎn)染后,膀胱癌5637細(xì)胞中SPOCK1基因的表達(dá)明顯下調(diào)（P&... 

【文章來(lái)源】：腫瘤. 2017,37(09)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)SPOCK1 m RNA表達(dá)
    1.4 蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)SPOCK1蛋白的表達(dá)
    1.5 構(gòu)建si RNA片段并轉(zhuǎn)染膀胱癌5637細(xì)胞
    1.6 CCK-8法檢測(cè)膀胱癌細(xì)胞的增殖能力
    1.7 細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)膀胱癌細(xì)胞的遷移能力
    1.8 Transwell小室法檢測(cè)膀胱癌細(xì)胞的侵襲能力
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 膀胱癌細(xì)胞中SPOCK1基因高表達(dá)
    2.2 si RNA轉(zhuǎn)染后膀胱癌5637細(xì)胞中SPOCK1基因表達(dá)下調(diào)
    2.3 SPOCK1基因表達(dá)下調(diào)后膀胱癌5637細(xì)胞的增殖能力下降
    2.4 SPOCK1基因表達(dá)下調(diào)后膀胱癌5637細(xì)胞的遷移能力下降
    2.5 SPOCK1基因表達(dá)下調(diào)后膀胱癌5637細(xì)胞的侵襲能力下降
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]長(zhǎng)鏈非編碼RNA NBAT1表達(dá)下調(diào)對(duì)膀胱癌5637細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[J]. 邵鳳平,王志平.  腫瘤. 2017(01)
[2]SPOCK1的生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 畢丹丹,成秉林,葛瑞勝,張淑君.  醫(yī)學(xué)研究雜志. 2016(05)
[3]SPOCK1蛋白結(jié)構(gòu)和功能與腫瘤的研究進(jìn)展[J]. 國(guó)昊楠,彭士云.  實(shí)用腫瘤學(xué)雜志. 2015 (04)
[4]2003—2007年中國(guó)腫瘤登記地區(qū)膀胱癌的發(fā)病與死亡分析[J]. 溫登瑰,單保恩,張思維,鄭榮壽,王寒松,張莉梅,畢學(xué)娟,陳萬(wàn)青.  腫瘤. 2012(04)
[5]應(yīng)重視膀胱腫瘤復(fù)發(fā)的研究[J]. 孔垂?jié)?  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2010 (18)



本文編號(hào)：2960693