第一部分mTORC2/mTORCl抑制劑誘導(dǎo)MDS/AML細(xì)胞發(fā)生自噬性死亡目的：探索mTORC1/mTORC2抑制劑對骨髓增生異常綜合征轉(zhuǎn)化急性髓系白血�。∕DS/AML）細(xì)胞增殖的影響,并從凋亡和自噬兩方面進(jìn)一步探討抑制細(xì)胞增殖的作用機(jī)制。方法：本研究以人骨髓增生異常綜合征（MDS）轉(zhuǎn)化的急性髓系白血病細(xì)胞株SKM-1細(xì)胞株為研究對象,采用CCK-8法檢測不同濃度的雷帕霉素和mTORC2/mTORC1抑制劑OSI-027分別作用于SKM-1細(xì)胞后檢測其細(xì)胞活性,流式細(xì)胞術(shù)檢測對細(xì)胞周期的影響；采用Annexin V-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡細(xì)胞比例,進(jìn)一步利用Western-blot法檢測PARP蛋白的活性分析來驗(yàn)證細(xì)胞是否發(fā)生凋亡；利用透射電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)自噬泡及自噬小體;吖啶橙染色法流式檢測酸性自噬泡數(shù)量；利用自噬抑制劑氯喹聯(lián)合OSI-027處理細(xì)胞后用Annexin V-FITC/PI流式檢測細(xì)胞凋亡比例和CCK-8法檢測增殖活性；RT-PCR法檢測自噬相關(guān)基因Beclin-1和LC3B的mRNA表達(dá)量；Western-blot法檢測Beclin-1和LC3的蛋白... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞簡表
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 mTORC2/mTORC1抑制劑誘導(dǎo)MDS/AML細(xì)胞發(fā)生自噬性死亡
    實(shí)驗(yàn)材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 mTORC2/mTORC1抑制劑誘導(dǎo)MDS/AML細(xì)胞發(fā)生自噬性死亡的機(jī)制研究
    實(shí)驗(yàn)材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]自噬相關(guān)基因Beclin1在骨髓增生異常綜合征中的表達(dá)及其意義[J]. 萬紹媛,張日,王元元,岑建農(nóng),周潔,楊翼,江鳳,陳子興.  中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2013(04)



本文編號：2943843