癌癥已成為嚴(yán)重影響人類健康的一類疾病,更為有效的、與癌癥密切相關(guān)靶標(biāo)的尋找以及靶向抗癌藥物的研發(fā)顯得迫在眉睫。FoxM1作為一類廣泛參與到腫瘤細(xì)胞惡性增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移、化藥耐藥以及不良預(yù)后等生物進(jìn)程的轉(zhuǎn)錄激活因子,其高表達(dá)于多數(shù)癌細(xì)胞中,已成為極具潛力的癌癥治療靶標(biāo)之一。本實驗室前期已通過噬菌體隨機(jī)十二肽庫篩選技術(shù),成功獲得了對FoxM1c-DBD具有高親和力的結(jié)合肽P201。本課題以修飾后的多肽9R-P201為藥物、以肝癌細(xì)胞HepG2為主要研究對象,深入探討9R-P201對癌細(xì)胞、尤其是肝癌細(xì)胞的抑制及其作用機(jī)理。通過細(xì)胞活力測定,我們發(fā)現(xiàn)9R-P201對肝癌細(xì)胞HepG2、前列腺癌細(xì)胞DU145以及人臍帶血內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC均具有一定的抑制作用,尤其對HepG2細(xì)胞表現(xiàn)出強(qiáng)有力的殺傷作用(IC₅₀:43.6μg/mL,13.1μM),并呈劑量依賴性,而對正常人肝細(xì)胞L-02(IC₅₀:2855.9 μg/mL)、HL-7702(IC₅₀:93.5 μg/mL)以及小鼠脾臟細(xì)胞的抑制率則較低,表明9R-P201對肝癌... 

【文章來源】：西南交通大學(xué)四川省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫詞表
第1章 緒論
    1.1 肝癌研究進(jìn)展
        1.1.1 肝癌的現(xiàn)狀與發(fā)病因素
        1.1.2 肝癌的治療與藥物研發(fā)
    1.2 FoxM1與腫瘤
        1.2.1 FoxM1結(jié)構(gòu)與功能
        1.2.2 FoxM1介導(dǎo)的腫瘤相關(guān)生物進(jìn)程和信號通路
        1.2.3 FoxM1介導(dǎo)的化藥耐藥相關(guān)
        1.2.4 FoxM1與肝癌
    1.3 FoxM1與分子靶向治療
        1.3.1 分子靶向治療研究現(xiàn)狀
        1.3.2 靶向FoxM1與腫瘤
    1.4 課題研究目的、意義和內(nèi)容
        1.4.1 本課題的研究目的和意義
        1.4.2 本課題的研究內(nèi)容
        1.4.3 本課題創(chuàng)新點
第2章 9R-P201選擇性抑制HEPG2細(xì)胞的增殖、遷移與侵襲以及誘導(dǎo)凋亡作用
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 主要儀器
        2.2.2 細(xì)胞株
        2.2.3 主要試劑與耗材
        2.2.4 主要試劑配制
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 小鼠脾臟細(xì)胞提取
        2.3.3 多肽9R-P201對人不同癌細(xì)胞株、人正常肝細(xì)胞以及小鼠脾臟細(xì)胞的活力影響
        2.3.4 多肽9R-P201胞內(nèi)作用位置確定
        2.3.5 吖啶橙（AO）/溴化乙錠（EB）熒光雙染
        2.3.6 平板克隆形成實驗
        2.3.7 細(xì)胞劃痕實驗
        2.3.8 Transwell小室遷移實驗
        2.3.9 qRT-PCR檢測相應(yīng)mRNA表達(dá)
        2.3.10 Western blot檢測相應(yīng)蛋白表達(dá)
        2.3.11 統(tǒng)計學(xué)分析
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 多肽9R-P201有效抑制肝癌細(xì)胞HepG2的活力
        2.4.2 多肽9R-P201與FoxM1表達(dá)的調(diào)控關(guān)系
        2.4.3 多肽9R-P201誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2的凋亡
        2.4.4 多肽9R-P201抑制癌細(xì)胞HepG2的增殖與遷移
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第3章 9R-P201有效抑制裸鼠HEPG2移植瘤的生長以及誘導(dǎo)凋亡作用
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 主要儀器
        3.2.2 細(xì)胞株與動物
        3.2.3 主要試劑與耗材
    3.3 實驗方法
        3.3.1 多肽9R-P201溶血性評價
        3.3.2 裸鼠HepG2移植瘤實驗
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 多肽9R-P201的溶血性評價
        3.4.2 多肽9R-P201有效抑制HepG2移植瘤的生長
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]Thiostrepton介導(dǎo)FOXM1下調(diào)對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞生長及其AG1478藥物敏感性的影響[J]. 公小迪,袁�；�,王炯軼,郭躍輝,時婧,王競,姜斌.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2013(01)
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[6]6-溴異香蘭素BVAN08誘發(fā)肝癌細(xì)胞HepG2紡錘體損傷和有絲分裂災(zāi)變死亡[J]. 張博,王林,王豫,徐勤枝,張士猛,周平坤.  細(xì)胞生物學(xué)雜志. 2008(05)



本文編號：2938664