發(fā)布時(shí)間：2020-10-30 04:58

　　 目的:探討阿司匹林誘導(dǎo)自噬對(duì)胃癌細(xì)胞生長的抑制作用,并初步分析其可能的作用機(jī)制。方法:(1)用不同濃度的阿司匹林處理人胃癌細(xì)胞株SGC-7901、BGC-823,MTT法檢測胃癌細(xì)胞活性;(2)流式細(xì)胞儀檢測胃癌細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期變化;(3)Hoechst33258染色法檢測細(xì)胞核形態(tài)學(xué)變化;(4)Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移;(5)激光共聚焦掃描顯微鏡檢測細(xì)胞內(nèi)自噬體的形成;(6)Western blot檢測LC3-Ⅱ蛋白表達(dá)。結(jié)果:(1)MTT法結(jié)果表明阿司匹林對(duì)人胃癌細(xì)胞株BGC-823、SGC-7901具有明顯的抑制作用,且隨著阿司匹林藥物濃度(1mM、2mM、4mM、6mM、8mM、10mM)的增加細(xì)胞存活率下降,呈明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系(IC_(50)約為6mM,P0.01);(2)流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明阿司匹林在48h內(nèi)不能誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡增加,但能夠誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞周期阻滯在G1期(P0.05);(3)Hoechst33258染色法檢測細(xì)胞核形態(tài)學(xué)變化結(jié)果顯示胃癌細(xì)胞細(xì)胞核內(nèi)的DNA未被酶裂解片段化,未見凋亡小體,未見碎塊狀的濃密亮藍(lán)色,與流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的結(jié)果一致;(4)Transwell遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:SGC-7901空白組201.67±6.51、5mM組96.67±6.43,BGC-823空白組96.00±4.58、5mM組45.67±7.09。阿司匹林能夠顯著抑制兩株胃癌細(xì)胞的遷移能力(P0.001);(5)激光共聚焦掃描顯微鏡和Western blot檢測發(fā)現(xiàn)阿司匹林處理后胃癌細(xì)胞內(nèi)自噬體增加,自噬蛋白LC3-Ⅱ表達(dá)增加,激活細(xì)胞自噬。結(jié)論:(1)阿司匹林能夠顯著抑制人胃癌細(xì)胞株SGC-7901、BGC-823的增殖,呈明顯劑量效應(yīng)關(guān)系;(2)阿司匹林可以使人胃癌細(xì)胞株SGC-7901、BGC-823的細(xì)胞周期停滯在G1期,其作用機(jī)制可能與激活細(xì)胞自噬有關(guān)。
【學(xué)位單位】：海南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R735.2
【部分圖文】：

Table 1.1:Aspirin on gastric cancer cell growth inhibition（x±s，n =5）SGC-7901 BGC-823度 D(λ) 570 nm 細(xì)胞存活率 D(λ) 570 nm 細(xì)胞存活率MSO 0.92±0.021 100% 1.09±0.051 100%mM 0.91±0.016 99% 0.89±0.011*** 82%mM 0.68±0.007*** 74% 0.61±0.009*** 56%mM 0.60±0.017*** 66% 0.64±0.012** 58%mM 0.48±0.011*** 52% 0.56±0.011*** 52%mM 0.30±0.008*** 32% 0.30±0.006*** 27%0mM 0.08±.0002*** 8% 0.08±0.003*** 8%注：與 CK 組比較，*P＜0. 05；**P＜0.01；***P＜0.001Note: Compared with CK group, *P<0.05; **P<0.01; ***P<0.001

海南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文示阿司匹林誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡作用不明顯（圖 1.2）。然而經(jīng)過 PI 單細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期變化結(jié)果顯示：SGC-7901 CK 組（G1 期 52.87±12.99±2.45、G2 期 22.90±0.86）；2mM 組（G1 期 57.99±0.31、S 期 27.04期14.84±1.82）；5mM組（G1期63.82±1.75、S期23.62±1.78、G2期12.00±C-823 CK 組（G1 期 50.61±1.83、S 期 11.42±1.48、G2 期 37.61±1.43）G1 期 60.05±2.09、S 期 18.86±1.73、G2 期 20.60±3.58）；5mM 組（1±3.29、S 期 16.78±1.07、G2 期 19.54±3.76）。從以上結(jié)果可以得出，經(jīng)阿司匹林處理后，在 48h 內(nèi)并不能誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡，但能夠顯著癌細(xì)胞周期阻滯在 G1 期（P＜0. 05）（圖 1.3）

圖 1.4：Hoechst33258 染色細(xì)胞核形態(tài)對(duì)比分析Figure 1.4: Hoechst33258 stained nuclei morphology contrast a胃癌細(xì)胞的遷移情況在裝有胃癌細(xì)胞懸液的 Transwell 小室中分別用阿司匹林 5mM 和 P理 24h 后，顯微鏡下拍照計(jì)數(shù)，結(jié)果顯示：SGC-7901 CK 組 201.6 組 96.67±6.43，BGC-823 CK 組 96.00±4.58、5mM 組 45.67±7.09。細(xì)胞經(jīng)阿司匹林處理后，細(xì)胞的遷移能力較對(duì)照組明顯下降（圖
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本文編號(hào)：2862021