目的:探討吡非尼酮在腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAFs)誘導(dǎo)的HT29結(jié)腸癌細(xì)胞系侵襲、遷移、增殖、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)中的作用及機(jī)制。方法:利用共培養(yǎng)小室將CAFs與HT29共培養(yǎng)后CCK-8測定HT29增殖效率;Real time-PCR和Western blot檢測HT29結(jié)腸癌細(xì)胞系E-cadherin和Vimentin轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)水平;Transwell實(shí)驗(yàn)檢測HT29結(jié)腸癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力。ELISA技術(shù)檢測CAFs細(xì)胞上清液中細(xì)胞因子的表達(dá)。結(jié)果:吡非尼酮抑制CAFs對HT29增殖促進(jìn)作用(P0.05);CAFs條件培養(yǎng)基培養(yǎng)HT29后,Vimentin表達(dá)水平顯著升高(P0.05),E-cadherin顯著降低(P0.05);吡非尼酮處理CAFs的條件培養(yǎng)基對HT29細(xì)胞中兩種蛋白無明顯影響;Transwell實(shí)驗(yàn)表明CAFs與HT29共培養(yǎng)后,其侵襲和遷移能力明顯增強(qiáng)(P0.05);ELISA結(jié)果提示CAFs分泌TGF-β1功能受吡非尼酮抑制且存在劑量關(guān)系。結(jié)論:吡非尼酮通過抑制CAFs分泌TGF-β1抑制CAFs誘導(dǎo)HT29結(jié)腸癌細(xì)胞系侵襲、遷移、增殖、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 材料
        1.1.2 主要試劑
    1.2 研究方法
        1.2.1 篩選藥物濃度
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.3 CCK8實(shí)驗(yàn)
        1.2.4 Transwell實(shí)驗(yàn)
            1.2.4.1 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn):
            1.2.4.2 Transwell遷移實(shí)驗(yàn):
        1.2.5 ELISA
        1.2.6 RT-PCR及Western blot檢測HT29細(xì)胞
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 藥物濃度篩選結(jié)果
    2.2 CCK8實(shí)驗(yàn)檢測增殖作用
    2.3 Transwell實(shí)驗(yàn)
        2.3.1 Transwll侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.3.2 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
    2.4 ELISA實(shí)驗(yàn)檢測PFD對CAFs分泌TGF-β1、IL-6因子的作用
    2.5 RT-PCR及Western
3 討論

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馬博昭;王小東;王金淼;戚峰;;吡非尼酮抑制腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞系HT29上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用及機(jī)制[J];天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2018年05期

2 劉淑丹;陳冬梅;馬會明;榮詩闊;劉曉明;梁雪云;;腫瘤間質(zhì)細(xì)胞分泌成纖維生長因子10促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2018年06期

3 王魯平;楊善明;徐學(xué)明;陳健;楊光之;張魯榕;;RNAi抑制結(jié)腸癌細(xì)胞系DcR3的表達(dá)及對癌細(xì)胞生長的影響[J];世界華人消化雜志;2008年20期

4 王多偉;Bikash Rai;王金淼;戚峰;劉彤;;Twist基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞系侵襲轉(zhuǎn)移能力影響的體外研究[J];天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2017年06期

5 李杰;核型異常的演化和人類結(jié)腸癌細(xì)胞系c-myc癌基因擴(kuò)增[J];國外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊;1987年01期

6 帕爾哈提·沙依木;趙為民;艾孜買提·熱合木吐拉;熱西達(dá)·加帕爾;艾克熱木·玉蘇甫;;單壁碳納米管對結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480生物學(xué)行為影響研究[J];中華腫瘤防治雜志;2017年07期

7 田筱青;孫丹鳳;房靜遠(yuǎn);;GSTM1基因多態(tài)性及啟動子甲基化在結(jié)腸癌細(xì)胞系中的研究[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年01期

8 康清杰;向征;彭旭東;王強(qiáng);湯為學(xué);;鈣釋放激活鈣通道調(diào)節(jié)分子1促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480的增殖[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2014年12期

9 劉海洋;李彥杰;吳宗輝;胡昌華;;結(jié)腸癌細(xì)胞系LHX6基因啟動子甲基化檢測與分析[J];西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年05期

10 陸春雷;吳國忠;尹天泉;同李平;豐帆;鄭t山;張洪偉;;細(xì)胞粘附在結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480多藥耐藥表型中的作用[J];東南國防醫(yī)藥;2009年06期

相關(guān)會議論文 前4條

1 王魯平;楊善明;陳健;徐學(xué)明;劉光;丁華野;Charlos B.Underhill;張魯榕;;TR6-RNA干擾技術(shù)對人SW480結(jié)腸癌細(xì)胞系惡性表型的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2005年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2005年

2 張桂英;段曉明;何春梅;;吲哚美辛誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)理[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

3 劉定志;肖衡;杜成友;羅詩樵;;腫瘤上清液激活成纖維細(xì)胞后對血管內(nèi)皮生長因子-A表達(dá)影響[A];2012中國器官移植大會論文匯編[C];2012年

4 聶倩倩;文歡;姜支農(nóng);鄧紅;;原代結(jié)直腸癌相關(guān)成纖維細(xì)胞特征分析[A];2015年浙江省醫(yī)學(xué)會病理學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2015年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 首席記者 劉志勇 通訊員 劉文琴 林偉吟;精準(zhǔn)干預(yù)成纖維細(xì)胞能抑制腫瘤[N];健康報(bào);2018年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 叢雪晶;MicroRNA-222在結(jié)腸癌細(xì)胞系中的生物學(xué)作用及機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

2 王曉艷;NGX6基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞的作用及機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2003年

3 艾克熱木·玉蘇甫;TFF1和TFF3在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的作用及與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

4 黃勇;HAb18G/CD147通過NO/cGMP敏感的容量型Ca～（2+）內(nèi)流影響成纖維細(xì)胞MMPs分泌及黏附能力[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

5 邊莉;云錫礦粉誘導(dǎo)人肺上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化、成纖維細(xì)胞活化過程中的相互作用及其機(jī)制[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2008年

6 劉嬌;腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞對肝癌細(xì)胞生物學(xué)作用及其機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 賈佳;姜黃素對結(jié)腸癌細(xì)胞系及腫瘤干細(xì)胞增值的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

2 黃鑠;miR-126穩(wěn)定過表達(dá)結(jié)腸癌細(xì)胞系的構(gòu)建及其生物學(xué)功能研究[D];中南大學(xué);2012年

3 劉璞;沉默Smurfl對結(jié)腸癌細(xì)胞系生物學(xué)行為的影響[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2014年

4 張濟(jì);結(jié)腸癌Toll樣受體4的表達(dá)和功能研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

5 Madhav Goit;Twist基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞系侵襲轉(zhuǎn)移影響的體外實(shí)驗(yàn)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

6 康清杰;ORAI1與結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480生物學(xué)特性關(guān)系的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

7 肖相明;Twist基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞系侵襲轉(zhuǎn)移影響的體外研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

8 王超超;MiR-95對結(jié)腸癌細(xì)胞系SW620侵襲和遷移的影響及機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

9 王亮;RNAi抑制結(jié)腸癌細(xì)胞系HT-29端粒酶活性的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

10 武乃金;結(jié)腸癌細(xì)胞系SW620中ALDH1~(br)細(xì)胞特性的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

本文編號：2832676