【目的】研究神經(jīng)標(biāo)志物蛋白基因產(chǎn)物(Protein gene product,PGP)9.5和S100蛋白在人口腔鱗狀細(xì)胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)組織中的表達(dá)特點(diǎn),揭示口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中神經(jīng)新生(Neurogenesis)現(xiàn)象及臨床病理意義。分析樹(shù)突狀細(xì)胞(Dendritic cells)數(shù)目與PGP9.5表達(dá)之間的相關(guān)性,探討神經(jīng)新生與腫瘤微環(huán)境中免疫功能的潛在聯(lián)系。研究降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的直接影響及潛在的分子機(jī)制�！痉椒ā渴占丝谇击[狀細(xì)胞癌石蠟包埋組織167例,采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組織PGP9.5和S100蛋白的表達(dá),分析PGP9.5的表達(dá)特點(diǎn)及與口腔鱗狀細(xì)胞癌臨床病理特征之間的關(guān)系;分析樹(shù)突狀細(xì)胞的分布與PGP9.5表達(dá)的相關(guān)性。利用人舌鱗癌細(xì)胞系(TSCCA cell line),采用細(xì)胞劃痕、Transwell實(shí)驗(yàn),檢測(cè)CGRP對(duì)TSCCA細(xì)胞遷移和浸潤(rùn)能力的影響;利用免疫印跡方法觀察CGRP對(duì)TSCCA細(xì)胞絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信號(hào)通路分子中磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(Extracellular signal-regulated kinase,ERK)、磷酸化p38、磷酸化c-Jun N-末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)表達(dá)的影響。【結(jié)果】免疫組化結(jié)果顯示PGP9.5在88%(147/167)的口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中表達(dá),主要分布在腫瘤間質(zhì),PGP9.5在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織學(xué)2、3級(jí)腫瘤中的表達(dá)高于1級(jí)的腫瘤(P0.000)。PGP9.5中/強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤的神經(jīng)浸潤(rùn)(P=0.034)及患者短生存期(P=0.038)關(guān)系密切。PGP9.5中/強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)的組織中腫瘤內(nèi)(P=0.0014)、腫瘤間質(zhì)(P=0.0002)、正常上皮組織中(P=0.019)樹(shù)突狀細(xì)胞的數(shù)量多于PGP9.5陰性/弱陽(yáng)性表達(dá)的組織。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)顯示CGRP促進(jìn)TSCCA細(xì)胞的遷移能力(P0.05)。Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)顯示CGRP顯著促進(jìn)TSCCA細(xì)胞的侵襲能力(P0.001)。免疫印跡結(jié)果顯示CGRP作用TSCCA細(xì)胞1h、6h、24h分別促進(jìn)TSCCA細(xì)胞磷酸化ERK(P0.001)、磷酸化p38(P0.05)、磷酸化JNK(P0.05)的表達(dá)�！窘Y(jié)論】人口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中存在神經(jīng)新生,并與腫瘤組織學(xué)分級(jí)、神經(jīng)浸潤(rùn)及患者生存期有關(guān)。樹(shù)突狀細(xì)胞和神經(jīng)新生的相關(guān)性提示腫瘤微環(huán)境中神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)免疫功能的影響。CGRP可能通過(guò)誘導(dǎo)MAPKs信號(hào)通路磷酸化促進(jìn)口腔鱗癌細(xì)胞的遷移和侵襲。
【學(xué)位單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：R739.8
【部分圖文】：

12 1.人口腔鱗狀細(xì)胞癌組織及周?chē)＝M織中神經(jīng)纖維束（PGP 9.5 陽(yáng)性）及樹(shù)突狀細(xì)胞（S1陽(yáng)性）的分布。Figure 1. Photomicrograph representatives of nerves (PGP9.5 expression) and dendritic cells (S10expression) in the normal and tumoral regions of human oral squamous cell carcinoma (OSCC).：人口腔鱗狀細(xì)胞癌的 HE 染色；B：腫瘤周?chē)＝M織內(nèi)的神經(jīng)束及細(xì)小的神經(jīng)纖維；C：分神經(jīng)束片段分布在腫瘤間質(zhì)中；D：一些纖細(xì)的神經(jīng)纖維圍繞在癌巢腫瘤細(xì)胞間，高倍放的視野是細(xì)小的神經(jīng)纖維；E-F：樹(shù)突狀細(xì)胞在腫瘤周?chē)ｐつそM織中（E）及腫瘤內(nèi)、腫間質(zhì)中（F）均可見(jiàn)分布。標(biāo)尺：A：100μm；B-F：50μm

圖 2.4 種 TSCCA 細(xì)胞懸液濃度 Tranwell 遷移細(xì)胞的數(shù)目he numbers of migrating TSCCA cells among four cell concentrations by TrA：1x105個(gè)/ml B：3x105個(gè)/ml C：5x105個(gè)/ml D：1x106個(gè)/ml標(biāo)尺均為 200μm

圖 3. CGRP 劑量依賴性地促進(jìn) TSCCA 細(xì)胞遷移Figure 3. CGRP dose-dependently promoted the migration of TSCCA cells byTranswell assayA：對(duì)照組及 10nM、100nM、1μM CGRP 刺激下細(xì)胞遷移的數(shù)目(標(biāo)尺均為 200μm)；B：統(tǒng)計(jì)圖：相比對(duì)照組，10nM、100nM、1μM CGRP 均促進(jìn)了 TSCCA 細(xì)胞遷移能力（***P < 0.001）

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本文編號(hào)：2821079