【摘要】：目的:腫瘤免疫治療是近年來腫瘤治療領域的研究熱點,尤其是免疫檢查點抑制劑的成功開發(fā)與應用,更是將腫瘤免疫治療帶入了一個新時代。在眾多免疫檢查點中,目前對PD-1(Programmed Death-1 Receptor,程序性死亡受體1)/PD-L1(Programmed Death-Ligand 1,程序性死亡受體配體-1)通路的研究較為深入,很多靶向PD-1/PD-L1通路的單抗已獲美國食品藥品監(jiān)督管理局(Food and Drug Administration,FDA)批準用于臨床抗腫瘤治療。目前,我國也在開展很多PD-1/PD-L1單抗的臨床研究。本研究的目的在于探討食管鱗癌組織中PD-L1的表達水平及腫瘤浸潤淋巴細胞(TILs,Tumor-Infiltrating Lymphocytes)的浸潤情況,分析兩者的相關性,并評估PD-L1表達水平及TILs分布密度對食管鱗癌患者的預后價值,為抗PD-1/PD-L1單抗用于食管鱗癌的治療提供數(shù)據(jù)支持。方法:選擇2007年6月至2015年12月就診我院的初治食管鱗癌患者納入分析。采用免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)方法檢測活檢標本或手術切除標本中腫瘤細胞PD-L1的表達情況。使用H-score法對PD-L1表達水平進行量化評分,根據(jù)1%、5%和25%三個cut off值分別計算PD-L1陽性表達率。通過HE(Hematoxylin-Eosin staining,蘇木精-伊紅染色法)染色評估食管鱗癌腫瘤微環(huán)境中TILs的浸潤情況,并對其定性評估。根據(jù)治療模式的不同,分別分析PD-L1表達和TILs浸潤與患者總生存期(Overall survival,OS)、無病生存期(Disease-free survival,DFS)/無進展生存期(Progression Free Survival,PFS)的相關性。并根據(jù)PD-L1表達水平和TILs浸潤對食管鱗癌腫瘤微環(huán)境進行分型,分析各型患者預后差異。統(tǒng)計分析采用SPSS(vs.19.0)軟件進行統(tǒng)計分析,Kaplan-Meier法繪制生存曲線并估計總體OS、DFS/PFS,Log-rank檢驗比較各組生存差異。以Cox比例風險模型進行多因素分析,評估風險比(Hazard Ratio,HR)和相關的95%CIs。p0.05為差異有統(tǒng)計學意義。結果:本研究共檢測了428例食管鱗癌標本,包括手術標本131(30.6%)例,內鏡標本297(69.4%)例。本研究結果主要包括三個部分,第一部分為428例標本的PD-L1表達情況及對患者預后的影響;第二部分為428例標本TILs浸潤情況及對患者預后的影響;第三部分根據(jù)PD-L1表達和TILs浸潤對腫瘤微環(huán)境進行分型,分析不同腫瘤微環(huán)境對患者預后的影響,探討如何根據(jù)腫瘤微環(huán)境“定制”腫瘤免疫治療。第一部分為PD-L1的表達情況。在428例腫瘤標本中,根據(jù)1%的cut off值,食管鱗癌腫瘤細胞PD-L1表達陽性率為79.7%;5%的cut off值陽性率為32.7%;25%的cut off值陽性率為9.1%。按照標本來源,根據(jù)1%的cut off值,131例手術標本中,PD-L1表達陽性率為77.9%(102/131)。297例內鏡標本中,PD-L1陽性率為80.5%(239/297),差異無統(tǒng)計學意義(p=0.602)。PD-L1表達水平與患者臨床特征的相關性分析結果顯示PD-L1陽性表達與腫瘤侵襲性特征相關,包括腫瘤浸潤更深(p=0.037),發(fā)生淋巴結轉移(p=0.013)。根據(jù)患者治療情況的不同,將患者分為根治性治療組和姑息化療組,分別分析了PD-L1表達對兩組患者的預后價值。根據(jù)1%的cut off值,根治性治療組PD-L1表達陰性患者DFS和OS均明顯優(yōu)于PD-L1表達陽性患者,兩組中位DFS分別是37.5個月(95%CI:24.7,50.2)和13.7個月(95%CI:8.5,16.5),差異有統(tǒng)計學意義(p=0.001)。中位OS分別是44.5個月(95%CI:24.6,64.3)和24.2個月(95%CI:20.4,28.1),差異同樣有統(tǒng)計學意義(p=0.039)。而對于姑息化療組,無論根據(jù)哪個cut off值,均未發(fā)現(xiàn)PD-L1陽性組和PD-L1陰性組PFS和OS存在差異。第二部分為TILs的浸潤密度。在428例食管鱗癌標本中,腫瘤組織中無淋巴細胞浸潤(TILs=0)者27例(6.3%),少淋巴細胞浸潤(TILs=1)131例(30.6%),中度或局部淋巴細胞浸潤(TILs=2)198例(46.3%),高密度或彌漫性淋巴細胞浸潤(TILs=3)72例(18.8%)。在131例手術標本中,TILs=0分4例(3.1%),TILs=1分38例(29.0%),TILs=2分64例(48.9%),TILs=3分25例(19.1%);297例胃鏡標本中,TILs=0分23例(7.7%),TILs=1分93例(31.3%),TILs=2分134例(45.1%),TILs=3分47例(15.8%)。差異無統(tǒng)計學意義(p=0.243)。TILs=0分組、TILs=1分組、TILs=2分組、TILs=3分組中位DFS分別是13.1個月(95%CI:8.72,17.48),13.8個月(95%CI:4.52,23.08),15.8個月(95%CI:8.3,23.3),18.9個月(95%CI:1.2,36.5),總體差異無統(tǒng)計學意義(p=0.433)。四組中位OS分別是22.3個月(95%CI:18.5,26.1),24.2個月(95%CI:12.8,35.7),25.7個月(95%CI:18.9,32.5),38.9個月(95%CI:16.4,61.3),總體差異也無統(tǒng)計學意義(p=0.408)。但對于接受根治術治療的患者TILs=3分組OS明顯優(yōu)于TILs=0-2分組(p=0.039),在姑息化療組,無論是總體比較還是組間比較OS均未發(fā)現(xiàn)顯著性差異。第三部分根據(jù)腫瘤細胞PD-L1表達情況及TILs浸潤密度將食管鱗癌腫瘤微環(huán)境分為4種類型。I型為PD-L1(+)TILs(+),共58例(13.6%);II型為PDL1(-)TILs(-),共73例(17.1%);III型為PD-L1(+)TILs(-),共283例(66.1%);IV型為PD-L1(-)TILs(+),共14例(3.3%)。四組中位OS分別是30.8個月(95%CI:13.7,48.6)、24.1個月(95%CI:17.2,31.0)、18.3個月(95%CI:16.2,20.4)、27.0個月(95%CI:13.3,40.6)。四組總體比較差異有統(tǒng)計學意義(p=0.009)。組間分析結果顯示,I型、II型及IV型患者OS明顯優(yōu)于III型患者(p=0.040,p=0.034,p=0.005;),余組間比較未見明顯差異。COX多因素回歸分析結果顯示影響接受根治性治療的患者預后的獨立因素主要包括腫瘤浸潤深度(HR=1.782,95%CI:1.253,2.535;p=0.001)、淋巴結轉移情況(HR=1.774,95%CI:1.242,2.533;p=0.002)、腫瘤TNM分期(HR=2.195,95%CI:1.477,3.261;p=0.001)、PD-L1表達情況(HR=1.376,95%CI:1.047,1.807;p=0.022)。影響姑息性化療患者預后的獨立因素主要包括年齡(HR=0.772,95%CI:0.585,1.020;p=0.019)、腫瘤TNM分期(HR=1.066,95%CI:0.782,1.453;p=0.002)、化療方案(HR=1.764,95%CI:1.091,2.854;p=0.021)、化療周期數(shù)(HR=1.877,95%CI:1.252,2.812;p=0.002)。結論:食管鱗癌腫瘤組織可檢測到PD-L1的表達,且陽性率較高。PD-L1的表達水平與接受根治性治療的患者預后呈顯著負相關。腫瘤細胞PD-L1陽性表達與腫瘤侵襲性因素相關,比如更深的浸潤深度、更多的淋巴結轉移等。腫瘤微環(huán)境中TILs浸潤密度與PD-L1表達正相關。TILs富集是接受根治術治療的患者預后較好的因素之一。PD-L1+/TIL+及PD-L1+/TIL-的食管鱗癌患者是接受PD-1/PD-L1單抗治療的潛在優(yōu)勢人群。
【學位授予單位】：軍事科學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.1
【圖文】：

TNM 分期#0-Ⅱ 143(39.9) 33(46.5) 110(38.3)0.183Ⅲ 175(48.9) 34(47.9) 141(49.1)Ⅳ 40(11.2) 4(5.6) 36(12.5)*其他主要包括原位癌及高級別上皮內瘤變#根據(jù) AJCC 第七版分期，以腫瘤上緣確定腫瘤位置@統(tǒng)計學方法是卡方檢驗A.PD-L1 B. ≥1% PD-L1+

C. PD-L1+腫瘤浸潤淋巴細胞 (x 400)圖 2. PD-L1 在食管鱗癌標4.2.2 按照 5%的 cut off 值，姑息PD-L1（+）患者 21 例（26.9%）。PD-L是 6.0 個月（95%CI：1.8，10.2）和 3.9意義（p=0.613）。PD-L1（-）組 1、3 年總組 1 年總生存率分別是 56.3%，3 年生存月（95%CI：6.2，12.5）和 11.7 個月（意義（p=0.893）。見圖 8。4.2.3 按照的 25%的 cut off 值，姑PD-L1（+）患者 5 例（6.4%）。PD-L1（6.0 個月（95%CI：2. 9，9.1）和 3.40 個統(tǒng)計學意義（p=0.205）。PD-L1（-）組

C. Invasive front圖 3. 食管鱗癌中不同的 PD-L1 表達模式。A、在腫瘤浸潤免疫細胞存在的情況下 PD-L1 彌漫性表達（Diffuse）；B、在腫瘤浸潤淋巴細胞存在的情況下 PD-L1 區(qū)域性表達（Regional）；C、PD-L1 主要表達在腫瘤浸潤邊緣（Invasivefront）。A. 根治性治療組患者 DFS 生存曲線 B. 根治性治療組患者 OS 生存曲線

【參考文獻】

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本文編號：2801567