【摘要】：目的:腫瘤免疫治療是近年來腫瘤治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn),尤其是免疫檢查點(diǎn)抑制劑的成功開發(fā)與應(yīng)用,更是將腫瘤免疫治療帶入了一個(gè)新時(shí)代。在眾多免疫檢查點(diǎn)中,目前對(duì)PD-1(Programmed Death-1 Receptor,程序性死亡受體1)/PD-L1(Programmed Death-Ligand 1,程序性死亡受體配體-1)通路的研究較為深入,很多靶向PD-1/PD-L1通路的單抗已獲美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(Food and Drug Administration,FDA)批準(zhǔn)用于臨床抗腫瘤治療。目前,我國(guó)也在開展很多PD-1/PD-L1單抗的臨床研究。本研究的目的在于探討食管鱗癌組織中PD-L1的表達(dá)水平及腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TILs,Tumor-Infiltrating Lymphocytes)的浸潤(rùn)情況,分析兩者的相關(guān)性,并評(píng)估PD-L1表達(dá)水平及TILs分布密度對(duì)食管鱗癌患者的預(yù)后價(jià)值,為抗PD-1/PD-L1單抗用于食管鱗癌的治療提供數(shù)據(jù)支持。方法:選擇2007年6月至2015年12月就診我院的初治食管鱗癌患者納入分析。采用免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)方法檢測(cè)活檢標(biāo)本或手術(shù)切除標(biāo)本中腫瘤細(xì)胞PD-L1的表達(dá)情況。使用H-score法對(duì)PD-L1表達(dá)水平進(jìn)行量化評(píng)分,根據(jù)1%、5%和25%三個(gè)cut off值分別計(jì)算PD-L1陽性表達(dá)率。通過HE(Hematoxylin-Eosin staining,蘇木精-伊紅染色法)染色評(píng)估食管鱗癌腫瘤微環(huán)境中TILs的浸潤(rùn)情況,并對(duì)其定性評(píng)估。根據(jù)治療模式的不同,分別分析PD-L1表達(dá)和TILs浸潤(rùn)與患者總生存期(Overall survival,OS)、無病生存期(Disease-free survival,DFS)/無進(jìn)展生存期(Progression Free Survival,PFS)的相關(guān)性。并根據(jù)PD-L1表達(dá)水平和TILs浸潤(rùn)對(duì)食管鱗癌腫瘤微環(huán)境進(jìn)行分型,分析各型患者預(yù)后差異。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS(vs.19.0)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,Kaplan-Meier法繪制生存曲線并估計(jì)總體OS、DFS/PFS,Log-rank檢驗(yàn)比較各組生存差異。以Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行多因素分析,評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)比(Hazard Ratio,HR)和相關(guān)的95%CIs。p0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:本研究共檢測(cè)了428例食管鱗癌標(biāo)本,包括手術(shù)標(biāo)本131(30.6%)例,內(nèi)鏡標(biāo)本297(69.4%)例。本研究結(jié)果主要包括三個(gè)部分,第一部分為428例標(biāo)本的PD-L1表達(dá)情況及對(duì)患者預(yù)后的影響;第二部分為428例標(biāo)本TILs浸潤(rùn)情況及對(duì)患者預(yù)后的影響;第三部分根據(jù)PD-L1表達(dá)和TILs浸潤(rùn)對(duì)腫瘤微環(huán)境進(jìn)行分型,分析不同腫瘤微環(huán)境對(duì)患者預(yù)后的影響,探討如何根據(jù)腫瘤微環(huán)境“定制”腫瘤免疫治療。第一部分為PD-L1的表達(dá)情況。在428例腫瘤標(biāo)本中,根據(jù)1%的cut off值,食管鱗癌腫瘤細(xì)胞PD-L1表達(dá)陽性率為79.7%;5%的cut off值陽性率為32.7%;25%的cut off值陽性率為9.1%。按照標(biāo)本來源,根據(jù)1%的cut off值,131例手術(shù)標(biāo)本中,PD-L1表達(dá)陽性率為77.9%(102/131)。297例內(nèi)鏡標(biāo)本中,PD-L1陽性率為80.5%(239/297),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.602)。PD-L1表達(dá)水平與患者臨床特征的相關(guān)性分析結(jié)果顯示PD-L1陽性表達(dá)與腫瘤侵襲性特征相關(guān),包括腫瘤浸潤(rùn)更深(p=0.037),發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(p=0.013)。根據(jù)患者治療情況的不同,將患者分為根治性治療組和姑息化療組,分別分析了PD-L1表達(dá)對(duì)兩組患者的預(yù)后價(jià)值。根據(jù)1%的cut off值,根治性治療組PD-L1表達(dá)陰性患者DFS和OS均明顯優(yōu)于PD-L1表達(dá)陽性患者,兩組中位DFS分別是37.5個(gè)月(95%CI:24.7,50.2)和13.7個(gè)月(95%CI:8.5,16.5),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.001)。中位OS分別是44.5個(gè)月(95%CI:24.6,64.3)和24.2個(gè)月(95%CI:20.4,28.1),差異同樣有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.039)。而對(duì)于姑息化療組,無論根據(jù)哪個(gè)cut off值,均未發(fā)現(xiàn)PD-L1陽性組和PD-L1陰性組PFS和OS存在差異。第二部分為TILs的浸潤(rùn)密度。在428例食管鱗癌標(biāo)本中,腫瘤組織中無淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)(TILs=0)者27例(6.3%),少淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)(TILs=1)131例(30.6%),中度或局部淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)(TILs=2)198例(46.3%),高密度或彌漫性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)(TILs=3)72例(18.8%)。在131例手術(shù)標(biāo)本中,TILs=0分4例(3.1%),TILs=1分38例(29.0%),TILs=2分64例(48.9%),TILs=3分25例(19.1%);297例胃鏡標(biāo)本中,TILs=0分23例(7.7%),TILs=1分93例(31.3%),TILs=2分134例(45.1%),TILs=3分47例(15.8%)。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.243)。TILs=0分組、TILs=1分組、TILs=2分組、TILs=3分組中位DFS分別是13.1個(gè)月(95%CI:8.72,17.48),13.8個(gè)月(95%CI:4.52,23.08),15.8個(gè)月(95%CI:8.3,23.3),18.9個(gè)月(95%CI:1.2,36.5),總體差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.433)。四組中位OS分別是22.3個(gè)月(95%CI:18.5,26.1),24.2個(gè)月(95%CI:12.8,35.7),25.7個(gè)月(95%CI:18.9,32.5),38.9個(gè)月(95%CI:16.4,61.3),總體差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.408)。但對(duì)于接受根治術(shù)治療的患者TILs=3分組OS明顯優(yōu)于TILs=0-2分組(p=0.039),在姑息化療組,無論是總體比較還是組間比較OS均未發(fā)現(xiàn)顯著性差異。第三部分根據(jù)腫瘤細(xì)胞PD-L1表達(dá)情況及TILs浸潤(rùn)密度將食管鱗癌腫瘤微環(huán)境分為4種類型。I型為PD-L1(+)TILs(+),共58例(13.6%);II型為PDL1(-)TILs(-),共73例(17.1%);III型為PD-L1(+)TILs(-),共283例(66.1%);IV型為PD-L1(-)TILs(+),共14例(3.3%)。四組中位OS分別是30.8個(gè)月(95%CI:13.7,48.6)、24.1個(gè)月(95%CI:17.2,31.0)、18.3個(gè)月(95%CI:16.2,20.4)、27.0個(gè)月(95%CI:13.3,40.6)。四組總體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.009)。組間分析結(jié)果顯示,I型、II型及IV型患者OS明顯優(yōu)于III型患者(p=0.040,p=0.034,p=0.005;),余組間比較未見明顯差異。COX多因素回歸分析結(jié)果顯示影響接受根治性治療的患者預(yù)后的獨(dú)立因素主要包括腫瘤浸潤(rùn)深度(HR=1.782,95%CI:1.253,2.535;p=0.001)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(HR=1.774,95%CI:1.242,2.533;p=0.002)、腫瘤TNM分期(HR=2.195,95%CI:1.477,3.261;p=0.001)、PD-L1表達(dá)情況(HR=1.376,95%CI:1.047,1.807;p=0.022)。影響姑息性化療患者預(yù)后的獨(dú)立因素主要包括年齡(HR=0.772,95%CI:0.585,1.020;p=0.019)、腫瘤TNM分期(HR=1.066,95%CI:0.782,1.453;p=0.002)、化療方案(HR=1.764,95%CI:1.091,2.854;p=0.021)、化療周期數(shù)(HR=1.877,95%CI:1.252,2.812;p=0.002)。結(jié)論:食管鱗癌腫瘤組織可檢測(cè)到PD-L1的表達(dá),且陽性率較高。PD-L1的表達(dá)水平與接受根治性治療的患者預(yù)后呈顯著負(fù)相關(guān)。腫瘤細(xì)胞PD-L1陽性表達(dá)與腫瘤侵襲性因素相關(guān),比如更深的浸潤(rùn)深度、更多的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。腫瘤微環(huán)境中TILs浸潤(rùn)密度與PD-L1表達(dá)正相關(guān)。TILs富集是接受根治術(shù)治療的患者預(yù)后較好的因素之一。PD-L1+/TIL+及PD-L1+/TIL-的食管鱗癌患者是接受PD-1/PD-L1單抗治療的潛在優(yōu)勢(shì)人群。
【學(xué)位授予單位】：軍事科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R735.1
【圖文】：

TNM 分期#0-Ⅱ 143(39.9) 33(46.5) 110(38.3)0.183Ⅲ 175(48.9) 34(47.9) 141(49.1)Ⅳ 40(11.2) 4(5.6) 36(12.5)*其他主要包括原位癌及高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變#根據(jù) AJCC 第七版分期，以腫瘤上緣確定腫瘤位置@統(tǒng)計(jì)學(xué)方法是卡方檢驗(yàn)A.PD-L1 B. ≥1% PD-L1+

C. PD-L1+腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞 (x 400)圖 2. PD-L1 在食管鱗癌標(biāo)4.2.2 按照 5%的 cut off 值，姑息PD-L1（+）患者 21 例（26.9%）。PD-L是 6.0 個(gè)月（95%CI：1.8，10.2）和 3.9意義（p=0.613）。PD-L1（-）組 1、3 年總組 1 年總生存率分別是 56.3%，3 年生存月（95%CI：6.2，12.5）和 11.7 個(gè)月（意義（p=0.893）。見圖 8。4.2.3 按照的 25%的 cut off 值，姑PD-L1（+）患者 5 例（6.4%）。PD-L1（6.0 個(gè)月（95%CI：2. 9，9.1）和 3.40 個(gè)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.205）。PD-L1（-）組

C. Invasive front圖 3. 食管鱗癌中不同的 PD-L1 表達(dá)模式。A、在腫瘤浸潤(rùn)免疫細(xì)胞存在的情況下 PD-L1 彌漫性表達(dá)（Diffuse）；B、在腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞存在的情況下 PD-L1 區(qū)域性表達(dá)（Regional）；C、PD-L1 主要表達(dá)在腫瘤浸潤(rùn)邊緣（Invasivefront）。A. 根治性治療組患者 DFS 生存曲線 B. 根治性治療組患者 OS 生存曲線

【參考文獻(xiàn)】

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1 石雪迎;鄭杰;;系統(tǒng)篩查微衛(wèi)星不穩(wěn)定性結(jié)直腸癌的意義和策略[J];中華病理學(xué)雜志;2015年01期

2 Yi-Fu He;Chu-Shu Ji;Bing Hu;Ping-Sheng Fan;Chang-Lu Hu;Feng-Shou Jiang;Jian Chen;Lei Zhu;Yi-Wei Yao;Wei Wang;;A phase Ⅱ study of paclitaxel and nedaplatin as front-line chemotherapy in Chinese patients with metastatic esophageal squamous cell carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2013年35期

本文編號(hào)：2801567