發(fā)布時間：2020-08-12 13:40

【摘要】：目的:上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer,EOC)是婦女生殖系統(tǒng)方面最常見的惡性腫瘤之一,其臨床特征為復發(fā)率高,預后差。初始治療時,大約70%的卵巢癌患者對以鉑類為基礎的化療敏感的。然而,有65%-75%復發(fā)的卵巢癌患者對以鉑類為基礎化療無反應或發(fā)生抵抗,這是導致卵巢癌化療失敗和預后差的重要原因之一。獲得性耐藥是卵巢癌治療中一個亟待解決的主要障礙,但其機制仍未闡明。許多學者對此進行了深入的研究,發(fā)現(xiàn)乳腺癌易感基因2(breast cancer susceptibility gene 2,BRCA2)發(fā)生回復突變可能是卵巢癌耐藥的重要原因之一。然而,在卵巢癌中BRCA2回復突變情況與獲得性鉑類耐藥是否相關,其對患者的預后是否存在影響,目前暫無相關臨床研究。本實驗旨在通過檢測上皮性卵巢癌患者BRCA2的表達情況,并通過統(tǒng)計學分析,研究BRCA2是否存在回復突變,若存在,這種回復突變是否與患者的生存預后具有相關性,為新的臨床治療方案提供實驗依據(jù)和方向。方法:1、通過EnVison二步免疫組化法檢測了72例卵巢腫瘤的組織標本,全部病理檢查均為卵巢漿液性癌,另取1例正常輸卵管,1例副中腎管囊腫做對照。BRCA2的N端及C端,是否存在因蛋白截斷出現(xiàn)N端存在,而C端缺失的狀態(tài)。2、采集72例卵巢癌患者的相關臨床病理資料,其中包括年齡(age)、FIGO分期(FIGO stage)、病理類型(Pathology)、病理分級(Histological grade)、腹水及胸水有無癌細胞(Malignant cells in ascites or hydrothorax)、肝肺陰道有無轉(zhuǎn)移(Liver、lung or Vaginal metastasis)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(Lymph node metastasis)、手術(shù)殘留(Residual tumor)及復發(fā)時間(recurrent time)。3、根據(jù)患者術(shù)前有無化療,分為初次手術(shù)組(PDS)和新輔助化療-間期手術(shù)組(NACT-IDS)4、分析BRCA2回復突變是否與患者預后相關,BRCA2回復突變與術(shù)前鉑類藥物化療有無相關性。結(jié)果:1、在72例標本中,抗BRCA2-N端抗體均有表達,并且表達強弱無明顯區(qū)別;抗BRCA2-C端則部分表達。但是在正常輸卵管組織、副中腎管囊腫以及惡性腫瘤組織中的表達較癌周組織、正常的卵巢組織好。2、通過相關性分析發(fā)現(xiàn),抗BRCA2-C端的表達與卵巢癌腹水癌細胞陽性相關;3、初次手術(shù)組與新輔助化療-間期手術(shù)組患者的BRCA2表達存在差異,且具有統(tǒng)計學意義(P=0.028),說明術(shù)前有無化療對BRCA2的表達有影響。采用Kaplan-Meire對患者進行生存分析,Cox風險比例模型進行單因素及多因素分析,差異顯著性檢驗采用Log-Rank檢驗。結(jié)論:1、BRCA2在新輔助化療-間期手術(shù)組患者中,可能發(fā)生了回復突變,發(fā)生BRCA2回復突變的卵巢癌產(chǎn)生了對鉑類化療藥物抵抗。2、BRCA2表達與否是影響新輔助化療-間期手術(shù)組卵巢癌患者DFS的獨立預后因素;且BRCA2表達屬于不良預后因素。3、BRCA2的突變和回復突變可作為化療過程中,檢測卵巢癌患者是否發(fā)生突變以及有無回復突變,可作為患者選擇化療藥物和調(diào)整化療方案的依據(jù)。
【學位授予單位】：四川醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【圖文】：

（圖 1 免疫組化原理示意圖）切片處理蠟切片置于 67℃的烘箱中，烘片 2 小時。將甲苯中洗 2 次，每次 5 分鐘；b。二甲苯與無鐘；c。無水乙醇內(nèi)按 95%-70%-50%的濃度梯修復抗原：取適量的抗原修復（檸檬酸）緩沖液高壓鍋內(nèi)，封蓋并上氣閥，打開加熱爐，高源，待自然冷卻之后，用 PBS 緩沖液（0.01m次 3 分鐘，最后將所有切片浸泡 PBS 緩沖液中

正常的BRCA2定位在細胞核，但突變后的BRCA2蛋白定位在細胞質(zhì)。免疫組化實驗結(jié)果顯示，BRCA2 蛋白 N 端均有表達，但 C 端部分表達。見圖 3-1。

A、B分別表示免疫組化檢測BRCA2蛋白陽性對照N、C端均為陽性情況(x200)

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 余智;黃建鳴;張國楠;;BRCA2回復突變與卵巢癌獲得性鉑類耐藥的研究進展[J];腫瘤預防與治療;2015年02期

2 劉璐;徐曉婷;秦磊;金曉紅;顧冬梅;王修珍;劉蔚;;BRCA2基因啟動子的克隆和分析[J];臨床與實驗病理學雜志;2013年02期

3 劉瓊瓊;張慧林;李琥;張萬東;王小英;李鳳山;馮振卿;朱進;;BRCA2在卵巢腫瘤組織中的表達及臨床意義[J];南京醫(yī)科大學學報(自然科學版);2012年07期

4 田云,盧向陽,易克,彭麗莎;BRCA2蛋白的研究[J];生命的化學;2003年01期

5 馬金柱;崔宏偉;劉明;李碧麗;;BRCA2蛋白在散發(fā)性乳腺癌中的表達及意義[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學雜志;2011年02期

6 陳瑩;金偉;黃雋;馬忠良;周婕;邵志敏;;中國漢族家族性及早發(fā)性乳腺癌患者BRCA2啟動子突變情況的研究[J];中國癌癥雜志;2009年09期

7 張軍紅;楊晶;王春華;袁芳;李青;李靜;趙春華;;BRCA2對乳腺癌癌癥干細胞的影響及其機制研究[J];醫(yī)學研究雜志;2015年03期

8 李永濤;于士昌;翟勇;;BRCA2對乳腺癌干細胞的影響及其機制[J];熱帶醫(yī)學雜志;2016年06期

9 汪澤興;管曉翔;;BRCA2相關男性乳腺癌的生物學特性[J];癌癥進展;2013年01期

10 陳東祥;李軍川;王茁;陳廷煊;張立軍;盛波;張呂勝;伍欣星;;BRCA2在散發(fā)性乳腺癌組織中的表達及意義[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2007年03期

相關會議論文 前10條

1 喬玉環(huán);陳萍;史惠蓉;吳丹;趙國強;;遺傳性卵巢癌組織中BRCA2基因突變的研究[A];中國抗癌協(xié)會婦科腫瘤專業(yè)委員會第六次全國學術(shù)會議論文匯編[C];2001年

2 劉潁;史惠蓉;;遺傳性乳腺卵巢癌的易感基因BRCA1、BRCA2研究進展[A];2000全國腫瘤學術(shù)大會論文集[C];2000年

3 楊寶珍;;寧夏回族散發(fā)性乳腺癌易感基因BRCA1、BRCA2突變的研究[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

4 Mengwei Wang;Mingxiu Lv;Kui Lu;Guangbin Liu;Zhijie Sun;;Design and synthesis of active peptides based on BRCA1(782-786) and interaction of they with target peptide RAD51(181-200)[A];河南省化學會2018年學術(shù)年會摘要集[C];2018年

5 史庭燕;Pan WANG;Caixia XIE;Sheng YIN;Di SHI;Congchong WEI;Wenbin TANG;Rong JIANG;Xi CHENG;Qingyi WEI;Qing WANG;Rongyu ZANG;;BRCA1 and BRCA2 mutations in ovarian cancer patients from China:ethnic-related mutations in BRCA1 associated with an increased risk of ovarian cancer[A];2017中國長三角遺傳學大會會議手冊[C];2017年

6 陸靜;韓素萍;尹鳳玲;;4-HPR誘導人類卵巢癌細胞凋亡與BRCA1(BRCA2)表達水平的關聯(lián)[A];江蘇省抗癌協(xié)會婦科腫瘤專業(yè)委員會第四次腫瘤學術(shù)研討會暨無錫市婦產(chǎn)科年會論文匯編[C];2005年

7 李文鳳;胡震;張斌;曹明智;王永勝;沈鎮(zhèn)宙;邵志敏;;BRCA1 1100delAT突變:中國家族性乳腺癌人群中重復出現(xiàn)的突變[A];第四屆中國腫瘤學術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術(shù)會議教育集[C];2006年

8 Tatyana Grushko;Olufunmilayo I Olopade;;BRCA1 Promoter Hypermethylation is Associated with Expression and Copy Number of BRCA1 in Sporadic Breast Cancer[A];中國藥理學會化療藥理專業(yè)委員會第九屆學術(shù)研討會論文摘要集[C];2008年

9 Wang Ziyi;Yading Xie;Guoshuang Shen;Fangchao Zheng;Dengfeng Ren;Jiuda Zhao;;The Relationship between BRCA1/2 Mutations and the Efficacy of DNA-Damaging Drugs in Triple-Negative Breast Cancer:A Meta-analysis[A];第十二屆全國免疫學學術(shù)大會摘要匯編[C];2017年

10 Nan Kang;Dan Li;Weimin Zhang;Qimin Zhan;;BRCA1 negatively regulates miR-146a and inhibits its tumor promoting functions in breast cancer cells[A];全國腫瘤流行病學和腫瘤病因?qū)W學術(shù)會議論文集[C];2015年

相關重要報紙文章 前10條

1 張蕊;BRCA基因測序助力卵巢癌診療[N];健康報;2018年

2 記者 靳澎;我國七成卵巢癌初診已為晚期[N];家庭醫(yī)生報;2017年

3 南方日報記者 李R

本文編號：2790607