【摘要】：[目的]近年來,乳腺癌的發(fā)病率逐漸增高,現(xiàn)已成為女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤。臨床上,乳腺癌的復發(fā)和轉移很常見,并常常伴隨著乳腺癌分子標記物的改變。HER2、ER、KI67、PI3K、Akt及MDR在乳腺癌分子分型、信號通路的激活和耐藥情況中有重要地位,本研究給予乳腺癌細胞長時間低劑量多柔比星,模擬臨床上長期化療的作用,檢測乳腺癌細胞中HER2、ER、KI67、PI3K、Akt及MDR是否發(fā)生變化。此外,為了研究HER2對其他指標的影響,我們干擾長時間多柔比星作用后的乳腺癌細胞HER2的表達,然后檢測其他指標會發(fā)生何種相應的變化,以解釋它們之間的相互關系。[方法]1、選擇乳腺癌細胞株SKBR3(HER2陽性,ER、PR陰性),長時間加入化療藥物多柔比星,以模擬臨床上長期化療的情況。2、用MTT法檢測正常SKBR3細胞株和長時間多柔比星作用后的細胞增殖能力的差異。3、用siRNA干擾長時間多柔比星作用后的細胞HER2的表達。4、用western blot檢測SKBR3細胞株、長時間多柔比星作用后的細胞株及干擾細胞株的HER2的表達發(fā)生何種變化。5、用western blot檢測SKBR3細胞株、長時間多柔比星作用后的細胞株及干擾細胞株的ER、PI3K、Akt、MDR、KI67的表達發(fā)生何種變化。[結果]1、SKBR3細胞長時間加入多柔比星后HER2的表達明顯升高(P= 0.001173),siRNA干擾HER2表達后HER2明顯降低(P= 0.000838)。2、SKBR3細胞長期加入多柔比星后PI3K明顯增高(P=0.029905),在干擾HER2表達后,PI3K表達有所下降(P=0.102762)。3、SKBR3細胞長期加入多柔比星后Akt明顯增高(P= 0.000876),在干擾HER2表達后,Akt明顯下降(P= 0.000378)。4、SKBR3細胞長期加入多柔比星后ER表達明顯降低(P=0.013492),在干擾HER2表達后,ER反而上升(P=0.021968)。5、SKBR3細胞長期加入多柔比星后MDR表達稍許增高(P= 0.119728),在干擾HER2表達后,MDR繼續(xù)上升(P= 0.300654)。6、SKBR3細胞在長期多柔比星刺激后,KI67表達稍許降低(P= 0.4540675),在干擾HER2后,KI67表達稍增高(P= 0.1391941)。7、MTT結果顯示,長時間多柔比星作用后的SKBR3細胞株的生存力明顯強于正常SKBR3細胞株(P=0.000290508)。[結論]1、長時間多柔比星作用后乳腺癌細胞HER2表達增加,同時生長速度加快(短時間多柔比星作用時,我們觀察到SKBR3細胞生長速度明顯變慢)。2、在長時間多柔比星作用后,SKBR3細胞的PI3K表達明顯增高,Akt表達也明顯增高。3、在長時間多柔比星作用后,SKBR3細胞的ER表達明顯下降。4、在長時間多柔比星作用后,SKBR3細胞的MDR表達稍增高,但無統(tǒng)計學差異。5、在長時間多柔比星作用后,SKBR3細胞的KI67表達稍下降,干擾HER2表達后,KI67又稍升高。存在HER2表達增加,KI67表達降低,而HER2表達降低,KI67表達增高的趨勢。6、在干擾長時間多柔比星作用的SKBR3細胞的HER2表達后,HER2表達明顯降低;Akt表達明顯下降;ER表達明顯升高;PI3K表達稍下降;MDR表達稍增高。
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R737.9
【圖文】：

酶標儀測得均值分別為0？邋７１５９５８和０？邋６６８７５，邋Ｐ值為０．邋０００２９０５０８（Ｐ＜０．邋０５）２邋Ｗｅｓｔｅｒｎ邋ｂｌｏｔ實驗結果逡逑每次ｗｅｓｔｅｒｎ邋ｂｌｏｔ從左到右分３個組，分別是：１正常ＳＫＢＲ３細胞組、２長多柔比星作用組、３干擾ＨＥＲ２表達組，每個組３個復孔，實驗結果及統(tǒng)計分如下。逡逑２．１邋內參：Ｐ邋－ａｃｔｉｏｎ邋Ｗｅｓｔｅｒｎ邋ｂｌｏｔ邋實驗結果逡逑

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本文編號：2788914