【摘要】：目的:檢測(cè)胃癌合并高脂血癥患者與不合并高脂血癥患者相比,其血清前列腺素E2表達(dá)、血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)、胃癌組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的差異。分析胃癌組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)與腫瘤臨床病理特征的關(guān)系。探討高脂血癥對(duì)胃癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的影響。方法:收集天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院2014年3月至2015年1月手術(shù)切除的102例胃癌患者的臨床病理資料進(jìn)行分析,根據(jù)患者血脂實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果將其分為胃癌合并高脂血癥組和不合并高脂血癥組,分別應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法及免疫組織化學(xué)染色SABC法測(cè)定前列腺素E2和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在血清和腫瘤組織中的表達(dá),應(yīng)用t檢驗(yàn)及χ2檢驗(yàn)判斷其表達(dá)差異,分析胃癌組織VEGF表達(dá)與臨床病理結(jié)果的相關(guān)性。結(jié)果:1 102例胃癌患者中合并高脂血癥者占48.01%(49/102)。2高脂血癥組與不合并高脂血癥組在性別(c2=0.000,P=0.994)、年齡(χ2=0.019,P=0.890)、腫瘤位置(χ2=2.812,P=0.094)及腫瘤長(zhǎng)徑(c2=1.282,P=0.257)的差別上不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);在腫瘤組織分化程度(c2=28.632,P=0.000)、浸潤(rùn)深度(c2=20.951,P=0.000)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù)(c2=20.667,P=0.000)及TNM分期(c2=13.994,P=0.000)的差別上具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)3高脂血癥組患者血清前列腺素E2表達(dá)量為28.268±4.250pg/ml,不合并高脂血癥組血清前列腺素E2表達(dá)量為20.436±3.694pg/ml,高脂血癥組明顯高于不合并高脂血癥組,兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=9.952,P=0.000)。4高脂血癥組患者血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)量為274.436±19.417pg/ml,不合并高脂血癥組血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)量為206.290±22.779pg/ml,高脂血癥組明顯高于不合并高脂血癥組,兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=16.195,P=0.000)。5高脂血癥組患者腫瘤組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子高表達(dá)者占75.51%,不合并高脂血癥組腫瘤組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子高表達(dá)者占28.30%,高脂血癥組明顯高于不合并高脂血癥組,兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=22.706,P=0.000)。6血脂水平與血清PGE2水平存在正相關(guān)性,血清PGE2與血清VEGF水平存在正相關(guān)性(r=0.62,P=0.000),血清PGE2水平與胃癌組織VEGF表達(dá)存在正相關(guān)性(t=3.441,P=0.001),血清PGE2水平與胃癌組織VEGF表達(dá)存在正相關(guān)性(t=4.266,P=0.000)。7血清VEGF水平及胃癌組織VEGF的表達(dá)強(qiáng)度均與患者的性別、年齡、腫瘤位置及腫瘤長(zhǎng)徑的大小無(wú)顯著相關(guān)性(P0.05),與分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù)及TNM分期有顯著相關(guān)性。結(jié)論:1胃癌合并高脂血癥患者較不合并高脂血癥患者,外周血清PGE2、VEGF及腫瘤組織VEGF表達(dá)升高。2外周血清及胃癌組織VEGF高表達(dá)可加速腫瘤浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移過(guò)程。3血清PGE2表達(dá)與血清及胃癌組織VEGF表達(dá)呈正相關(guān),間接影響腫瘤地浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移。4胃癌合并高脂血癥患者可能通過(guò)影響PGE2、VEGF的表達(dá)增加促進(jìn)腫瘤的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2
【圖文】：

IIA 期 T1N2M0、T2N1M0、T3N0M0IIB 期 T1N3M0、T2N2M0、T3N1M0、T4aN0M0IIIA 期 T2N3M0、T3N2M0、T4aN1M0IIIB 期 T3N3M0、T4aN2M0、T4bN0M0、T4bN1M0IIIC 期 T4aN3M0、T4bN2M0、T4bN3M0IV 期 任何 T 任何 NM11.2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟1.2.1 酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測(cè)定血清 PGE2 含量1.2.1.1 實(shí)驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)采用競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)特定抗原：預(yù)先將持異性抗體吸附于固相載體；入待測(cè)抗原和一定量的酶標(biāo)已知抗原，使兩者與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合；通過(guò)滌分離，結(jié)合于固相載體的酶標(biāo)抗原與待測(cè)抗原含量呈負(fù)相關(guān)。見(jiàn)下圖 1：

2) 從密封真空包裝袋中取出酶標(biāo)板，計(jì)算需要孔數(shù)目，余者放回酶標(biāo)板包裝袋中以免底物失活。3) 設(shè)一空白對(duì)照孔。不加任何液體；每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度孔各設(shè)兩孔，每孔加入相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 50ul；其余每個(gè)檢測(cè)孔直接加待測(cè)標(biāo)本 50ul。4) 除空白對(duì)照孔外每孔加入酶結(jié)合物 50ul，再按同樣的順序加入抗體 50ul，充分混勻，貼上不干膠封孔，置 37℃溫箱溫育 1 小時(shí)。5) 手工洗板，棄去孔內(nèi)液體。洗滌液注滿各孔，靜置 10 秒甩干，重復(fù) 3 次，拍干。6) 每孔加顯色劑 A 液 50ul，顯色劑 B 液 50ul，震蕩混勻后，37℃避光顯色 15分鐘，每孔加終止液 50ul。7) 用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD 值）。在終止反應(yīng) 10分鐘內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。8) 應(yīng)用“Curve Expert 1.3”軟件進(jìn)行分析，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，將樣本的 OD 值代入方程，計(jì)算出樣本濃度。見(jiàn)下圖 2：

圖 3 ELISA 雙抗體夾心法示意圖1.2.2.2 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1.2.2.2.1 基本物品準(zhǔn)備蒸餾水、濾紙、加樣器、EP 管、吸頭等，塑料用品高壓滅菌后 70℃烤干配制 0.01M PBS（PH7.2-7.6）作為洗滌液。1.2.2.2.2 配制人 VEGF 標(biāo)準(zhǔn)品由于試劑盒內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)品為凍干粉，需自行應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至同濃度。1) 配制 10,000pg/ml 標(biāo)準(zhǔn)品：取 1ml 樣品稀釋液加入標(biāo)準(zhǔn)品管內(nèi)，蓋好后靜10 分鐘以上，然后反復(fù)顛倒搓動(dòng)以確保標(biāo)準(zhǔn)品凍干粉充分溶解。2) 配制 1000pg/ml 標(biāo)準(zhǔn)品：取 0.1ml 10000pg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品加入有 0.9ml 樣品釋液的 EP 管中，搖勻，做上標(biāo)記。3) 配制 500pg/ml→15.6pg/ml 標(biāo)準(zhǔn)品：準(zhǔn)備 6 只 EP 管，每管加 0.5ml 樣品稀液，分別標(biāo)記上 500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.3pg/ml15.6pg/ml。取 0.5ml 1000pg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)記 500pg/ml 的管中，混勻

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2784642