【摘要】：目的:檢測胃癌合并高脂血癥患者與不合并高脂血癥患者相比,其血清前列腺素E2表達、血清血管內(nèi)皮生長因子表達、胃癌組織血管內(nèi)皮生長因子表達的差異。分析胃癌組織血管內(nèi)皮生長因子表達與腫瘤臨床病理特征的關(guān)系。探討高脂血癥對胃癌浸潤和轉(zhuǎn)移的影響。方法:收集天津醫(yī)科大學總醫(yī)院2014年3月至2015年1月手術(shù)切除的102例胃癌患者的臨床病理資料進行分析,根據(jù)患者血脂實驗室檢測結(jié)果將其分為胃癌合并高脂血癥組和不合并高脂血癥組,分別應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測定法及免疫組織化學染色SABC法測定前列腺素E2和血管內(nèi)皮生長因子在血清和腫瘤組織中的表達,應(yīng)用t檢驗及χ2檢驗判斷其表達差異,分析胃癌組織VEGF表達與臨床病理結(jié)果的相關(guān)性。結(jié)果:1 102例胃癌患者中合并高脂血癥者占48.01%(49/102)。2高脂血癥組與不合并高脂血癥組在性別(c2=0.000,P=0.994)、年齡(χ2=0.019,P=0.890)、腫瘤位置(χ2=2.812,P=0.094)及腫瘤長徑(c2=1.282,P=0.257)的差別上不具有統(tǒng)計學意義(P0.05);在腫瘤組織分化程度(c2=28.632,P=0.000)、浸潤深度(c2=20.951,P=0.000)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)(c2=20.667,P=0.000)及TNM分期(c2=13.994,P=0.000)的差別上具有統(tǒng)計學意義(P≤0.05)3高脂血癥組患者血清前列腺素E2表達量為28.268±4.250pg/ml,不合并高脂血癥組血清前列腺素E2表達量為20.436±3.694pg/ml,高脂血癥組明顯高于不合并高脂血癥組,兩者差異具有統(tǒng)計學意義(t=9.952,P=0.000)。4高脂血癥組患者血清血管內(nèi)皮生長因子表達量為274.436±19.417pg/ml,不合并高脂血癥組血清血管內(nèi)皮生長因子表達量為206.290±22.779pg/ml,高脂血癥組明顯高于不合并高脂血癥組,兩者差異具有統(tǒng)計學意義(t=16.195,P=0.000)。5高脂血癥組患者腫瘤組織血管內(nèi)皮生長因子高表達者占75.51%,不合并高脂血癥組腫瘤組織血管內(nèi)皮生長因子高表達者占28.30%,高脂血癥組明顯高于不合并高脂血癥組,兩者差異具有統(tǒng)計學意義(χ2=22.706,P=0.000)。6血脂水平與血清PGE2水平存在正相關(guān)性,血清PGE2與血清VEGF水平存在正相關(guān)性(r=0.62,P=0.000),血清PGE2水平與胃癌組織VEGF表達存在正相關(guān)性(t=3.441,P=0.001),血清PGE2水平與胃癌組織VEGF表達存在正相關(guān)性(t=4.266,P=0.000)。7血清VEGF水平及胃癌組織VEGF的表達強度均與患者的性別、年齡、腫瘤位置及腫瘤長徑的大小無顯著相關(guān)性(P0.05),與分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)及TNM分期有顯著相關(guān)性。結(jié)論:1胃癌合并高脂血癥患者較不合并高脂血癥患者,外周血清PGE2、VEGF及腫瘤組織VEGF表達升高。2外周血清及胃癌組織VEGF高表達可加速腫瘤浸潤及轉(zhuǎn)移過程。3血清PGE2表達與血清及胃癌組織VEGF表達呈正相關(guān),間接影響腫瘤地浸潤及轉(zhuǎn)移。4胃癌合并高脂血癥患者可能通過影響PGE2、VEGF的表達增加促進腫瘤的浸潤及轉(zhuǎn)移風險。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【圖文】：

IIA 期 T1N2M0、T2N1M0、T3N0M0IIB 期 T1N3M0、T2N2M0、T3N1M0、T4aN0M0IIIA 期 T2N3M0、T3N2M0、T4aN1M0IIIB 期 T3N3M0、T4aN2M0、T4bN0M0、T4bN1M0IIIC 期 T4aN3M0、T4bN2M0、T4bN3M0IV 期 任何 T 任何 NM11.2 實驗方法及步驟1.2.1 酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測定血清 PGE2 含量1.2.1.1 實驗原理本實驗采用競爭法檢測特定抗原：預(yù)先將持異性抗體吸附于固相載體；入待測抗原和一定量的酶標已知抗原，使兩者與固相抗體競爭性結(jié)合；通過滌分離，結(jié)合于固相載體的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關(guān)。見下圖 1：

2) 從密封真空包裝袋中取出酶標板，計算需要孔數(shù)目，余者放回酶標板包裝袋中以免底物失活。3) 設(shè)一空白對照孔。不加任何液體；每個標準品濃度孔各設(shè)兩孔，每孔加入相應(yīng)標準品 50ul；其余每個檢測孔直接加待測標本 50ul。4) 除空白對照孔外每孔加入酶結(jié)合物 50ul，再按同樣的順序加入抗體 50ul，充分混勻，貼上不干膠封孔，置 37℃溫箱溫育 1 小時。5) 手工洗板，棄去孔內(nèi)液體。洗滌液注滿各孔，靜置 10 秒甩干，重復 3 次，拍干。6) 每孔加顯色劑 A 液 50ul，顯色劑 B 液 50ul，震蕩混勻后，37℃避光顯色 15分鐘，每孔加終止液 50ul。7) 用酶標儀在 450nm 波長依序測量各孔的光密度（OD 值）。在終止反應(yīng) 10分鐘內(nèi)進行檢測。8) 應(yīng)用“Curve Expert 1.3”軟件進行分析，制作標準曲線，得到回歸方程，將樣本的 OD 值代入方程，計算出樣本濃度。見下圖 2：

圖 3 ELISA 雙抗體夾心法示意圖1.2.2.2 實驗準備1.2.2.2.1 基本物品準備蒸餾水、濾紙、加樣器、EP 管、吸頭等，塑料用品高壓滅菌后 70℃烤干配制 0.01M PBS（PH7.2-7.6）作為洗滌液。1.2.2.2.2 配制人 VEGF 標準品由于試劑盒內(nèi)標準品為凍干粉，需自行應(yīng)用標準品稀釋液將標準品稀釋至同濃度。1) 配制 10,000pg/ml 標準品：取 1ml 樣品稀釋液加入標準品管內(nèi)，蓋好后靜10 分鐘以上，然后反復顛倒搓動以確保標準品凍干粉充分溶解。2) 配制 1000pg/ml 標準品：取 0.1ml 10000pg/ml 的標準品加入有 0.9ml 樣品釋液的 EP 管中，搖勻，做上標記。3) 配制 500pg/ml→15.6pg/ml 標準品：準備 6 只 EP 管，每管加 0.5ml 樣品稀液，分別標記上 500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.3pg/ml15.6pg/ml。取 0.5ml 1000pg/ml 的標準品加入標記 500pg/ml 的管中，混勻

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 張s

本文編號：2784642