【摘要】：近年來隨著我國社會、經(jīng)濟(jì)發(fā)展,人口老齡化,生活方式以及環(huán)境的變化,癌癥的發(fā)病率和死亡率總體呈上升趨勢。其中乳腺癌是最主要的惡性腫瘤之一,發(fā)病率位居女性癌癥首位,危害生命健康。目前乳腺癌的治療手段主要有,手術(shù)治療、放療、化療、靶向治療等。但這些治療方法均未取得突破性進(jìn)展,主要原因是腫瘤細(xì)胞具有無限增殖和侵襲轉(zhuǎn)移的能力,在明確診斷為腫瘤時,已伴有淋巴結(jié)及其他組織的轉(zhuǎn)移。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中,涉及多種細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路及復(fù)雜的作用機(jī)制。其中,STAT3信號通路在惡性腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移過程中起著至關(guān)重要的作用。所以通過阻斷或干擾STAT3信號傳導(dǎo)通路來抑制細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,為乳腺癌基因靶向治療帶來新的研究方向。目的:研究PsiRNA-STAT3對乳腺癌4T1細(xì)胞凋亡作用的影響。方法:采用MTT法及Transwell小室法檢測PsiRNA-STAT3對乳腺癌細(xì)胞增殖及侵襲能力的影響;吖啶橙/溴化乙錠(AO/EB)染色、線粒體膜電位檢測PsiRNA-STAT3對乳腺癌細(xì)胞凋亡影響;流式細(xì)胞儀檢測PsiRNA-STAT3對乳腺癌細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響;Western-blot檢測PsiRNA-STAT3對STAT3、Cyclin-D1、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果:MTT及侵襲小室實(shí)驗結(jié)果顯示,PsiRNA-STAT3能夠明顯抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖及侵襲能力,分別與Mock組及Scramble比較具有顯著性差異(P0.05),Mock組與Scramble組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);吖啶橙/溴化乙錠(AO/EB)檢測細(xì)胞凋亡,PsiRNA-STAT3組乳腺癌細(xì)胞凋亡率與Mock組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);本研究采用熒光顯微鏡觀察了線粒體膜電位的變化,PsiRNA-STAT3能誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡,分別與Mock組Scramble組比較具有顯著差異(P0.05),流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期,PsiRNA-STAT3組G0/G1期細(xì)胞數(shù)明顯增多,S期細(xì)胞數(shù)明顯減少,分別與Mock組及Scramble組比較具有顯著性差異(P0.05)。表明PsiRNA-STAT3能夠阻止細(xì)胞由G0/G1期進(jìn)入S期,從而抑制細(xì)胞DNA的合成。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率,Mock組、Scramble組及PsiRNA-STAT3組凋亡率分別為:4.5%、10.64%、39.68%。Western-blot檢測蛋白表達(dá)量,PsiRNA-STAT3組Pro-Caspase-3表達(dá)量明顯降低、Cleaved-Caspase-3表達(dá)量升高,與Scramble組比較均有顯著性差異(P0.05);Cyclin-D1白表達(dá)水平明顯降低,與Mock組之間比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);PsiRNA-STAT3組Bcl-2蛋白表達(dá)水平降低、Bax表達(dá)水平增高,分別與Mock組及Scramble組比較均顯著性差異(P0.05)。表明PsiRNA-STAT3能夠顯著調(diào)節(jié)上述蛋白表達(dá)。結(jié)論:PsiRNA-STAT3能顯著誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。其機(jī)制可能是通過降低乳腺癌細(xì)胞線粒體膜電位,破壞線粒體膜的完整性,STAT3、Cyclin-D1、Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào),Bax蛋白表達(dá)量上調(diào),Bax/Bcl-2比值升高,Pro-Caspase-3被激活,Cleaved-Caspase-3誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R737.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2777935