【摘要】：近年來的研究表明,micro RNA可能在輻射誘導(dǎo)的旁觀者效應(yīng)中發(fā)揮著重要的作用。為了找到micro RNA與輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)之間的聯(lián)系,揭示mi RNA在輻射誘導(dǎo)的旁效應(yīng)過程中起到的具體作用,本論文以人正常胚肺成纖維細(xì)胞MRC5作為研究對象,采用電離輻射處理技術(shù)和條件培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移方法,以微核率、DNA損傷水平和細(xì)胞克隆存活率等為生物終點建立條件培養(yǎng)基介導(dǎo)的輻射旁效應(yīng)研究模型。本論文采用Solexa測序分析了輻射后MRC5細(xì)胞分泌的mi RNA表達(dá)譜,篩選出可能參與輻射旁效應(yīng)的mi RNA并進(jìn)行驗證。然后以通過篩選驗證的mi R-21作為研究對象,檢測其誘導(dǎo)輻射旁效應(yīng)的能力。通過熒光標(biāo)記和定量PCR技術(shù),我們證實外泌體能夠攜帶mi RNA在細(xì)胞之間穿梭。通過人為改變細(xì)胞內(nèi)mi R-21的表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)mi R-21能夠通過外泌體途徑誘導(dǎo)輻射旁效應(yīng)的過程。此外,我們還驗證了腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞之間通過外泌體進(jìn)行細(xì)胞通訊的機(jī)制,并對其參與誘導(dǎo)旁效應(yīng)的機(jī)制進(jìn)行初步探索。得到的實驗結(jié)果如下:1.輻射可以通過條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)未照射細(xì)胞產(chǎn)生損傷效應(yīng),這種旁效應(yīng)可以發(fā)生在不同類型的電離輻射中;2.輻射可以影響正常細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞分泌的mi RNA表達(dá)譜,通過測序篩選發(fā)現(xiàn)輻照后mi R-21可以在直接照射細(xì)胞、條件培養(yǎng)基及旁細(xì)胞中表達(dá)上調(diào);3.Mi R-21可以在未照射細(xì)胞中產(chǎn)生輻射損傷效應(yīng);4.Mi RNA可以通過外泌體途徑在同種細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞之間穿梭;5.Mi R-21可以通過外泌體途徑介導(dǎo)輻射誘導(dǎo)的旁觀者效應(yīng);本研究在我們建立的條件培養(yǎng)基介導(dǎo)的輻射誘導(dǎo)旁觀者效應(yīng)研究模型基礎(chǔ)上,檢測了輻射后差異表達(dá)的mi RNA,驗證了mi R-21在旁效應(yīng)過程中的表達(dá)模式,發(fā)現(xiàn)了mi R-21通過外泌體途徑介導(dǎo)輻射旁效應(yīng)的機(jī)制,并揭示了mi RNA及外泌體在輻射旁效應(yīng)過程中發(fā)揮的重要作用。該研究為腫瘤的治療及預(yù)后提供了新的思路及方法。
【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)院研究生院（近代物理研究所）
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R730

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2741676