【摘要】：目的:研究骨形成蛋白-4(BMP-4)在小鼠急性胰腺炎AP、慢性胰腺炎CP和人的胰腺癌組織及胰腺癌細(xì)胞中的分子表達(dá)情況,探討其在胰腺炎和胰腺癌中的臨床相關(guān)性及其作用機(jī)制方法:采用腹腔注射雨蛙肽的造模方法,AP組和CP組分別于造模第2天20h和6周后摘眼球取血,分離血清,并行腹腔麻醉,提取胰腺組織固定、石蠟包埋。再對(duì)胰腺組織進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分、纖維化程度評(píng)估和血清淀粉酶活性測(cè)定來評(píng)估炎癥模型的建立;應(yīng)用免疫組化的方法觀察BMP-4在急慢性炎癥下腺泡和導(dǎo)管系統(tǒng)中(包括PDGs)的表達(dá)變化;應(yīng)用外源性BMP-4刺激HPDE和Miapaca2細(xì)胞行CCK8增值實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞遷移/侵襲實(shí)驗(yàn),并設(shè)立陽性對(duì)照組TGF-β,觀察外源性BMP-4刺激下細(xì)胞學(xué)功能表現(xiàn);應(yīng)用western blot法檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞系與正常細(xì)胞系的表達(dá)差異,并利用公開數(shù)據(jù)庫收集病例進(jìn)行BMP-4相關(guān)的生存分析,探討其對(duì)預(yù)后的影響。結(jié)果:AP組淀粉酶活性較對(duì)照組明顯升高(11685.83±563.84 vs 3562.16±365.71,P0.05),而CP組淀粉酶活性較對(duì)照組顯著降低(2560.50±374.69 vs3562.16±365.71,P0.05);AP組腺泡水腫、部分腺泡壞死、組織充血、炎癥細(xì)胞浸潤;CP組腺泡萎縮、間質(zhì)纖維化,AP和CP組病理學(xué)評(píng)分分別為:3.33±0.52和8.50±0.55,與對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);CP組天狼猩紅染色陽性面積較對(duì)照組明顯增加((19.2±2.86)%vs(9.20±1.76)%,P0.05),CP組的膠原纖維含量較正常組明顯升高,主要分布于胰腺導(dǎo)管及血管周圍,并出現(xiàn)明顯的小葉間及腺泡間膠原沉積;對(duì)照組BMP-4主要在腺泡細(xì)胞的胞質(zhì)中表達(dá),細(xì)胞核中幾乎無表達(dá),胰腺導(dǎo)管幾乎無表達(dá);在炎癥刺激下,AP組的腺泡細(xì)胞中BMP-4的陽性表達(dá)面積較正常組稍降低,但胰管細(xì)胞中出現(xiàn)明顯的染色強(qiáng)陽性,HIS評(píng)分明顯高于對(duì)照組(P0.05);CP組中的萎縮腺體BMP-4表達(dá)較正常組顯著減少,而胰腺導(dǎo)管系統(tǒng)細(xì)胞中BMP-4的表達(dá)較正常組明顯升高,HIS評(píng)分明顯高于對(duì)照組(P0.05)。在胰腺導(dǎo)管系統(tǒng)中PDGs是胰腺導(dǎo)管的干細(xì)胞巢,是導(dǎo)管上皮修復(fù)的重要結(jié)構(gòu),在炎癥刺激下,PDGs結(jié)構(gòu)明顯增多,且高表達(dá)BMP-4;在BMP-4刺激下HPDE和Miapaca2細(xì)胞的增殖能力較對(duì)照組明顯增強(qiáng)(P0.05),但并沒有發(fā)現(xiàn)對(duì)BMP-4的計(jì)量依耐性,而Miapaca2的增殖對(duì)BMP-4呈現(xiàn)出明顯的計(jì)量依耐性,在BMP-4濃度為100ng/ml時(shí),Miapaca2的增值活性便明顯升高;在BMP-4刺激組中的HPDE細(xì)胞的遷移能力和Miapaca2侵襲能力與TGF-β陽性對(duì)照組相似,但較對(duì)照組明顯增高(P0.05);研究顯示BMP-4在胰腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)普遍較胰腺導(dǎo)管正常上皮細(xì)胞(HPDE和HPNE)表達(dá)增高(P0.05);并利用公共數(shù)據(jù)庫TCGA挖掘177例胰腺癌患者預(yù)后數(shù)據(jù)進(jìn)行KM生存分析發(fā)現(xiàn),胰腺癌患者中BMP-4表達(dá)上調(diào),生存分析發(fā)現(xiàn),高表達(dá)組的總體生存率較低表達(dá)組患者明顯降低,高表達(dá)組RFS為15.77個(gè)月,而低表達(dá)組RFS為23.17個(gè)月(P0.05)。結(jié)論:炎癥刺激下可引起B(yǎng)MP-4在胰腺導(dǎo)管系統(tǒng)中表達(dá)明顯增加,促進(jìn)導(dǎo)管系統(tǒng)的細(xì)胞增殖與遷移,促進(jìn)導(dǎo)管上皮的損傷修復(fù);而在胰腺癌中,BMP-4增加胰腺癌細(xì)胞的增殖及侵襲能力,有助于腫瘤的進(jìn)展。
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R576;R735.9
【圖文】：

鼠胰腺組織病理學(xué)改變照組中胰腺 HE 染色顯示正常胰腺組織，而 AP 組出現(xiàn)腺泡細(xì)胞水腫、死、組織充血及局部少量炎癥細(xì)胞浸潤，呈現(xiàn)急性水腫型胰腺炎（ CP 組的胰腺組織中可見腺泡萎縮、炎癥細(xì)胞大量浸潤，小葉結(jié)構(gòu)破顯纖維化，胰腺組織出現(xiàn)大量腺泡細(xì)胞壞死，出現(xiàn)大量導(dǎo)管樣細(xì)胞等表現(xiàn)（圖 1C、D、E）。AP 和 CP 組病理學(xué)評(píng)分分別為：3.33±0.52 和，與對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。（表 1.2）腺天狼猩紅染色對(duì)照組相比，AP 組胰腺的天狼猩紅染色陽性面積比率無差異（P > 0.達(dá)分布于導(dǎo)管、血管周圍，少量分布于小葉間。CP 組天狼猩紅染色對(duì)照組明顯增加（（19.2±2.86）% vs（9.20±1.76）%，P < 0.05原纖維含量較正常組明顯升高，纖維增粗，除分布于導(dǎo)管及血管周含量增高，小葉間和小葉內(nèi)也大量纖維增生。

2 雨蛙肽誘導(dǎo)下小鼠胰腺組織中纖維含量的變化。A.正常小鼠胰纖維主要表達(dá)分布于導(dǎo)管、血管周圍，少量分布于小葉間 B.急性中的纖維主要表達(dá)分布于導(dǎo)管、血管周圍，少量分布于小葉間 C小鼠模型中纖維含量增高，纖維增粗，除分布于導(dǎo)管、血管周圍含量增高，小葉間和小葉內(nèi)也大量纖維增生。D.各組中的天狼猩面積比例。（x200，*：P<0.05；**：P<0.001）P-4 在胰腺炎中的表達(dá)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在急慢性胰腺炎模型中，BMP-4 表達(dá)變化與炎癥中損傷主主要變化發(fā)生在腺泡和導(dǎo)管系統(tǒng)中。我們發(fā)現(xiàn)對(duì)照組 BMP-4 主要在質(zhì)中表達(dá)，血管壁可見少量陽性染色，胰腺導(dǎo)管幾乎無表達(dá)；在炎 組的腺泡細(xì)胞中 BMP-4 的陽性表達(dá)面積較正常組稍降低，但胰管顯的染色陽性，HIS 評(píng)分明顯高于對(duì)照組（P < 0.05）；CP 組中的

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 貝抗勝;吳禮楊;孫慶文;熊英輝;杜志坡;劉延曉;;BMP4促進(jìn)人骨膜來源細(xì)胞體外成軟骨細(xì)胞分化[J];中華顯微外科雜志;2013年05期

本文編號(hào)：2735330