發(fā)布時(shí)間：2020-06-20 08:24

【摘要】：由于飲食結(jié)構(gòu)的特殊性,食管癌是我國(guó)發(fā)病率較高的消化系統(tǒng)惡性腫瘤,食管癌(EC)是一組異質(zhì)性惡性腫瘤,死亡率高且不易早期診斷。即使治療手段多種多樣,但是產(chǎn)生的副作用嚴(yán)重,對(duì)人體傷害大。自噬可以說是捕獲細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和細(xì)胞器并在溶酶體中降解它們的過程,降解分解產(chǎn)物從溶酶體釋放并再循環(huán)到代謝和生物合成途徑中�；鬃允赏ㄟ^消除受損的細(xì)胞成分來維持蛋白質(zhì)和細(xì)胞器的控制,饑餓誘導(dǎo)的自噬將細(xì)胞內(nèi)成分循環(huán)至代謝途徑以維持線粒體代謝功能和能量穩(wěn)態(tài)。自噬在癌癥發(fā)展過程中扮演什么樣的角色,是人類孜孜不倦研究的方向。miRNAs是一類長(zhǎng)約19-24 nt的小型ncRNAs。miRNAs通過與靶mRNAs的3'-UTRs區(qū)的完全或不完全互補(bǔ)結(jié)合,使靶向mRNA降解或翻譯抑制從而負(fù)向調(diào)節(jié)目標(biāo)基因的表達(dá)。而microRNA將自噬與癌癥聯(lián)系起來,是否能做為精準(zhǔn)治療的靶點(diǎn)利用自噬原理治療癌癥也是不無可能的。本課題找到一種microRNA可以在食管癌細(xì)胞中靶向特定基因,從而影響細(xì)胞自噬和細(xì)胞增殖、遷移和侵襲。本研究提出miR-10b可以促進(jìn)食管癌細(xì)胞KYSE450和KYSE510自噬。而且我們通過生物信息學(xué)找到了 miR-10b靶基因DAZAP1,并在分子水平和蛋白水平檢測(cè)確認(rèn),且敲掉靶基因DAZAP1后同樣促進(jìn)食管癌細(xì)胞自噬。與此同時(shí)通過一系列生物功能實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)DAZAP1會(huì)抑制食管癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲。已有文獻(xiàn)報(bào)道DAZAP1經(jīng)常參與剪切過程,通過RNA-seq,我們發(fā)現(xiàn)在沉默DAZAP1后TSC2長(zhǎng)鏈表達(dá)量的增加和短鏈的減少,而短鏈因?yàn)镾981位點(diǎn)的缺失,會(huì)通過影響TSC2的磷酸化水平降低從而抑制mTOR的活化,這也完美的解釋了 miR-10b促進(jìn)自噬的機(jī)制。所以,我們可以確定miR-10b和DAZAP1為腫瘤精準(zhǔn)治療的生物靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：北京化工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R735.1
【圖文】：

北京化工大學(xué)碩士學(xué)位論文逡逑結(jié)合，促進(jìn)貨物隔離。自噬體和溶酶體融合后，釋放水解酶來降解小分子。降解逡逑后產(chǎn)生的氨基酸，核苷，脂肪酸和糖被再釋放到細(xì)胞質(zhì)中用于回收【１１］（圖１－１）。逡逑自噬對(duì)于防止受損蛋白質(zhì)和細(xì)胞器的毒性積累，維持新陳代謝，能量穩(wěn)態(tài)和饑餓逡逑生存至關(guān)重要。自噬對(duì)循環(huán)鐵蛋白也很重要，而自噻缺陷會(huì)引起鐵穩(wěn)態(tài)擾動(dòng)，增逡逑加對(duì)氧化應(yīng)激的敏感性ｔ１２，ｌ３］。逡逑一門邋＼邋１邋／邐Ｑ逡逑圖１－１自噬發(fā)生的過程【１１］逡逑Ｆｉｇ．１－１邋Ｔｈｅ邋ｐｒｏｃｅｓｓ邋ｏｆ邋ａｕｔｏｐｈａｇｙ邋１１１１逡逑１．１．２自噬的檢測(cè)方法逡逑（１）用ＷＢ手段對(duì)ＬＣ３和Ｐ６２蛋白的檢測(cè)逡逑用于檢測(cè)自嗤的手段最經(jīng)典最不可避免的是用Ｗｅｓｔｅｒｎ邋Ｂｌｏｔ方法檢測(cè)ＬＣ３逡逑和Ｐ６２蛋白的變化。逡逑ＬＣ３蛋白（微管相關(guān)蛋白輕鏈３）是在自噻發(fā)生過程中定位在自噬體膜上的逡逑非常重要的蛋白［１４］。自噬階段一部分細(xì)胞質(zhì)，包括細(xì)胞器，被隔離膜（也稱為逡逑吞噬細(xì)胞）封閉。在該膜的延伸時(shí)，ＬＣ３蛋白在其Ｃ－末端被切割以形成胞質(zhì)ＬＣ３－Ｉ；逡逑然后將該蛋白質(zhì)與磷脂酰乙醇胺綴合以形成ＬＣ３－１Ｉ，ＬＣ３－Ｉ丨有助于封閉膜以形成逡逑自噬體，自噬體最終與溶酶體融合。然后溶酶體水解酶降解它們?cè)谧允扇苊阁w中逡逑的底物。在Ｗｅｓｔｅｒｎ邋Ｂｌｏｔ電泳步驟中

北京化工大學(xué)碩士學(xué)位論文逡逑結(jié)合，促進(jìn)貨物隔離。自噬體和溶酶體融合后，釋放水解酶來降解小分子。降解逡逑后產(chǎn)生的氨基酸，核苷，脂肪酸和糖被再釋放到細(xì)胞質(zhì)中用于回收【１１］（圖１－１）。逡逑自噬對(duì)于防止受損蛋白質(zhì)和細(xì)胞器的毒性積累，維持新陳代謝，能量穩(wěn)態(tài)和饑餓逡逑生存至關(guān)重要。自噬對(duì)循環(huán)鐵蛋白也很重要，而自噻缺陷會(huì)引起鐵穩(wěn)態(tài)擾動(dòng)，增逡逑加對(duì)氧化應(yīng)激的敏感性ｔ１２，ｌ３］。逡逑一門邋＼邋１邋／邐Ｑ逡逑圖１－１自噬發(fā)生的過程【１１］逡逑Ｆｉｇ．１－１邋Ｔｈｅ邋ｐｒｏｃｅｓｓ邋ｏｆ邋ａｕｔｏｐｈａｇｙ邋１１１１逡逑１．１．２自噬的檢測(cè)方法逡逑（１）用ＷＢ手段對(duì)ＬＣ３和Ｐ６２蛋白的檢測(cè)逡逑用于檢測(cè)自嗤的手段最經(jīng)典最不可避免的是用Ｗｅｓｔｅｒｎ邋Ｂｌｏｔ方法檢測(cè)ＬＣ３逡逑和Ｐ６２蛋白的變化。逡逑ＬＣ３蛋白（微管相關(guān)蛋白輕鏈３）是在自噻發(fā)生過程中定位在自噬體膜上的逡逑非常重要的蛋白［１４］。自噬階段一部分細(xì)胞質(zhì)，包括細(xì)胞器，被隔離膜（也稱為逡逑吞噬細(xì)胞）封閉。在該膜的延伸時(shí)，ＬＣ３蛋白在其Ｃ－末端被切割以形成胞質(zhì)ＬＣ３－Ｉ；逡逑然后將該蛋白質(zhì)與磷脂酰乙醇胺綴合以形成ＬＣ３－１Ｉ，ＬＣ３－Ｉ丨有助于封閉膜以形成逡逑自噬體，自噬體最終與溶酶體融合。然后溶酶體水解酶降解它們?cè)谧允扇苊阁w中逡逑的底物。在Ｗｅｓｔｅｒｎ邋Ｂｌｏｔ電泳步驟中

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9 記者 錢錚;細(xì)胞自噬作用有“油門”“剎車”[N];新華每日電訊;2009年

10 首席記者 唐聞佳;日本科學(xué)家憑細(xì)胞自噬研究摘諾獎(jiǎng)[N];文匯報(bào);2016年

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本文編號(hào)：2722145