發(fā)布時間：2020-06-18 22:41

【摘要】：目的:沉默人前列腺癌PC3細胞Mig-7基因,分析Mig-7基因?qū)C3細胞血管生成擬態(tài)形成及體外遷移、侵襲能力的影響。方法:培養(yǎng)人前列腺癌細胞株PC3,采用siRNA沉默前列腺癌PC3細胞中Mig-7基因,通過熒光實時定量PCR檢測Mig-7 mRNA的表達變化,蛋白質(zhì)印跡法檢測Mig-7蛋白的變化,選擇干擾效果最好的一組進行下一步實驗。實驗分PC3組、PC3+NC-siRNA組PC3+Mig-7siRNA組,轉(zhuǎn)染48h后將三組細胞進行體外三維培養(yǎng),倒置顯微鏡下觀察血管生成擬態(tài)數(shù)目,細胞劃痕實驗及Transwell法觀察三組細胞遷移、侵襲能力。結(jié)果:實時熒光定量PCR及Western-blot結(jié)果示:siRNA沉默人前列腺癌PC3細胞中Mig-7基因后,PC3細胞mRNA表達水平及蛋白表達水平均明顯下降,Mig-7基因沉默效率達60%以上;體外三維培養(yǎng)結(jié)果示:沉默Mig-7基因,前列腺癌PC3細胞血管生成擬態(tài)數(shù)目明顯減少;劃痕實驗及Transwell實驗結(jié)果示:沉默Mig-7基因,PC3細胞遷移及侵襲能力減弱。結(jié)論:沉默Mig-7基因的表達可抑制人前列腺癌PC3細胞的體外血管生成擬態(tài)形成及遷移、侵襲能力。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R737.25
【圖文】：

第四章 結(jié)果檢測轉(zhuǎn)染效率采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染 FAM-siRNA 后，在倒置熒光顯微鏡下可觀察 標簽的綠色熒光（如下圖所示），隨機取五個 視野并計算細胞數(shù)目，顯示成功轉(zhuǎn)染的細胞數(shù)占總細胞數(shù) 60%以上，滿足后續(xù)實驗的要求。

組樣品瓊脂糖電泳總RNA

【參考文獻】

相關期刊論文 前5條

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相關碩士學位論文 前2條

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本文編號：2719937