發(fā)布時間：2020-06-17 19:44

【摘要】：目的:本研究的目的是研究香煙煙霧對腫瘤微環(huán)境內(nèi)中性粒細(xì)胞的生物學(xué)功能影響。方法:從健康人血提取出嗜中性粒細(xì)胞,制備腫瘤條件培養(yǎng)基,制備香煙煙霧濾液,CCK-8法確定安全CSE實(shí)驗(yàn)濃度,實(shí)驗(yàn)以單純的中性粒細(xì)胞為空白對照組、以腫瘤上清液誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞為陰性對照組,加入CSE與腫瘤上清液誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)組,共培養(yǎng)3h和24h后評估嗜中性粒細(xì)胞的生物學(xué)功能的變化包括細(xì)胞活力,ROS強(qiáng)度,黏附能力和蛋白表達(dá)。結(jié)果:1.3h,24h中性粒細(xì)胞的活性表現(xiàn)出相同的趨勢,即不同濃度CSE作用于中性粒細(xì)胞,伴隨著CSE濃度的上升,中性粒細(xì)胞的相對存活率呈現(xiàn)下降趨勢。2.CSE濃度較低時,對人膀胱癌T24細(xì)胞的增殖起促進(jìn)作用(p0.05);而用高濃度CSE與人膀胱癌T24細(xì)胞共培養(yǎng)24小時后,細(xì)胞存活率明顯下降(p0.01)。3.用CSE孵育中性粒細(xì)胞可以增強(qiáng)嗜中性粒細(xì)胞的存活力,并且高于單獨(dú)培養(yǎng)或與腫瘤上清液共培養(yǎng)的嗜中性粒細(xì)胞中觀察到的存活力。4.加入CSE使中性粒細(xì)胞黏附人臍靜脈內(nèi)皮HUVEC細(xì)胞的能力顯著下降。5.CSE顯著降低腫瘤條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)的嗜中性粒細(xì)胞產(chǎn)生的活性氧物質(zhì)(ROS)水平。6.CSE加入腫瘤條件培養(yǎng)基共同孵育后,嗜中性粒細(xì)胞出現(xiàn)BV8蛋白表達(dá)上調(diào),TNF-α、ICAM-1蛋白表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:香煙煙霧提取物可以影響腫瘤微環(huán)境中的中性粒細(xì)胞的生物學(xué)功能,使其活力增強(qiáng)、黏附減弱、ROS降低并表達(dá)N2相關(guān)蛋白,香煙煙霧提取物可以誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞N2極化。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.14
【圖文】：

圖 1.中性粒細(xì)胞吉姆薩染液染色圖片（放大 1000 倍）為了明確從人血中分離出的細(xì)胞種類，我們將健康人外周血中提取出的細(xì)胞使用吉姆薩試劑染色。吉姆薩染液由天青，伊紅組成，可將嗜酸性顆粒染成粉紅色，將嗜堿性顆粒染成藍(lán)紫色，將中性顆粒染成淡紫色。如圖 1 所示，我們可在油鏡下看到，提取出來的細(xì)胞呈圓形，細(xì)胞核呈桿狀或 2～5 分葉狀，葉與葉之間有細(xì)絲相連。其特征符合標(biāo)準(zhǔn)的中性粒細(xì)胞結(jié)構(gòu)：（1）細(xì)胞圓形、橢圓形或不定形，結(jié)構(gòu)完整，胞膜和核膜薄而完整;（2）細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有均勻分布的顆粒;（3）分葉正常（2～5 葉）。

圖 2.不同 CSE 濃度對中性粒細(xì)胞活力的影響* p<0.05，** p<0.01,***p<0.001如圖所示：兩個時間段中性粒細(xì)胞的活性表現(xiàn)出相同的趨勢，及不同濃度CSE 作用于中性粒細(xì)胞伴隨著 CSE 濃度的上升，中性粒細(xì)胞的相對存活率呈現(xiàn)下降趨勢。相較于無 CSE 組，CSE2.5%組、CSE5%組變化幅度不明顯，并無統(tǒng)計學(xué)差異，而 CSE 10%組、CSE 20%組及 CSE 40%組對中性粒細(xì)胞的活力影響極大，與對照組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。1.2.3 CSE 對 T24 細(xì)胞株的細(xì)胞毒性及增殖的影響

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7 何鳳慈,唐汝愚;鈣與中性粒細(xì)胞功能的關(guān)系[J];中國藥理學(xué)通報;1989年02期

8 賈綱政;用玻片分離單層細(xì)胞法檢測山羊中性粒細(xì)胞的吞噬功能[J];中國獸醫(yī)科技;1989年01期

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10 何健;陳玉林;;中性粒細(xì)胞的殺菌機(jī)理[J];國外醫(yī)學(xué).創(chuàng)傷與外科基本問題分冊;1989年01期

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本文編號：2718070