【摘要】：背景:肺癌的免疫靶向治療,如檢查點(diǎn)抑制劑的應(yīng)用,已經(jīng)使肺癌治療取得了里程碑式的進(jìn)展。免疫檢查點(diǎn)抑制劑的抗瘤機(jī)理并非直接靶向消滅腫瘤細(xì)胞,而是通過去除T細(xì)胞上的抑制性通路,使得腫瘤特異性活化的T細(xì)胞重具活力,從而促使這類細(xì)胞充分發(fā)揮抗腫瘤作用。免疫檢查點(diǎn)抑制劑的治療策略在腫瘤中治療取得成功,也進(jìn)一步證明了自然發(fā)生的腫瘤活化CD8+T細(xì)胞的存在,顯示了其潛在的強(qiáng)大抗腫瘤能力,同時也使這一類細(xì)胞成為廣泛研究的焦點(diǎn)。然而,目前為止,大多數(shù)對于腫瘤特異性活化T細(xì)胞的研究主要聚焦于腫瘤組織中,對這類細(xì)胞在循環(huán)血當(dāng)中的研究非常有限。方法:采集83例肺癌患者及49例作為對照的健康人的外周血,將其外周血單個核細(xì)胞進(jìn)行了八色流式分析,檢測CD137、PD-1在外周血CD8~+T細(xì)胞中表達(dá)的比例。同時檢測了CTLA-4~+CD4~+CD25~+CD127~(low/-)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在外周血CD4~+T細(xì)胞中的比例。在肺癌組當(dāng)中分析淋巴細(xì)胞與各項(xiàng)臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系,并分析CTLA-4~+CD4~+CD25~+CD127~(low/-)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與抗原活化CD8~+T細(xì)胞之間的相關(guān)性。同時采集另兩例肺癌患者外周血進(jìn)行CD8~+PD-1~+T細(xì)胞及CD8~+PD-1~-T細(xì)胞分選,對分選細(xì)胞進(jìn)行RNA提取、反轉(zhuǎn)錄及TCR測序。結(jié)果:無論是治療前還是在治療過的肺癌患者中,外周血CD8~+T細(xì)胞當(dāng)中PD-1~+T細(xì)胞以及CD137~+T細(xì)胞的比例均較健康人顯著升高,肺癌患者外周血CD137、PD-1雙陽的CD8~+T細(xì)胞也顯著高于健康人群,在老年肺癌患者當(dāng)中尤為顯著。同時,肺癌組CTLA-4~+CD4~+CD25~+CD127~(low/-)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的比例不僅高于健康人群,而且CTLA-4~+CD4~+CD25~+CD127~(low/-)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在CD4~+CD25~+CD127~(low/-)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞所占比例與抗原活化CD8~+T細(xì)胞在CD8~+T細(xì)胞中的比例呈較顯著的正相關(guān)。兩例患者TCR測序結(jié)果中,一例(小細(xì)胞肺癌,T1N1M0)的CD8~+PD-1~+T淋巴細(xì)胞較CD8~+PD-1~-T細(xì)胞出現(xiàn)了克隆多樣性降低和TCR克隆的集中。而另一例(腺癌,T1N0M0)則未檢測到上述現(xiàn)象。結(jié)論:我們的結(jié)果有助于為臨床上選擇免疫治療的優(yōu)勢治療人群提供更多線索;同時,腫瘤特異性活化CD8~+T淋巴細(xì)胞和效應(yīng)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的比例同步升高現(xiàn)象支持靶向抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的同時聯(lián)合激活腫瘤特異性活化T淋巴細(xì)胞如免疫檢查點(diǎn)抑制劑或腫瘤疫苗等的聯(lián)合治療策略。背景:CD8+T細(xì)胞是抗腫瘤免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞之一,CD137和PD-1均在抗原誘導(dǎo)時表達(dá)增高,其中CD137分子被認(rèn)為是T細(xì)胞活化的標(biāo)志,并且可作為識別腫瘤抗原特異性活化CD8+T淋巴細(xì)胞的特異性標(biāo)識。CD137免疫激動的聯(lián)合治療模式在早期抗腫瘤臨床研究中顯示出較好的療效和前景。然而目前尚缺乏對于肺癌組織原位腫瘤微環(huán)境中CD137+腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞的了解以及與臨床特征和預(yù)后的相關(guān)研究。方法:我們對118例肺腺癌患者臨床資料進(jìn)行搜集整理,對患者生存進(jìn)行了隨訪,對肺癌患者的組織樣本進(jìn)行歸集篩選、進(jìn)行組織微陣列芯片的制作、免疫多標(biāo)熒光染色,分析腫瘤組織原位的腫瘤免疫微環(huán)境中CD8、CD137、PD-1、及伽馬干擾素、顆粒酶B的表達(dá)情況及其之間的關(guān)系,并進(jìn)一步分析其與患者的臨床特征以及預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果:CD137絕大多數(shù)并不與CD8共表達(dá),CD8+CD137+淋巴細(xì)胞數(shù)量非常稀少。CD137+腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞相比CD8+PD-1+細(xì)胞顯著高表達(dá)IFN-γ及顆粒酶B。而CD8+PD-1+淋巴細(xì)胞與相對應(yīng)的CD8+PD-1-淋巴細(xì)胞表達(dá)IFN-γ及顆粒酶B的水平無顯著差異。生存分析結(jié)果顯示基質(zhì)區(qū)CD8+T細(xì)胞比例高者較比例低者無論是在全組肺腺癌還是在EGFR敏感突變?nèi)巳褐芯@示出較長的生存�；|(zhì)區(qū)中淋巴細(xì)胞表達(dá)CD137、CD8、PD-1的比例與肺腺癌的性別、年齡、EGFR基因突變狀態(tài)、以及腫瘤分化程度無顯著關(guān)系,然而吸煙者較不吸煙者基質(zhì)區(qū)CD8+TILs的比例更高(p=0.023),同時吸煙者較不吸煙者基質(zhì)區(qū)CD137+淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)比例更高的趨勢(p=0.053)。結(jié)論:對晚期肺腺癌患者腫瘤微環(huán)境中CD137+腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞的原位分析有助于深入了解晚期肺腺癌腫瘤微環(huán)境CD137+淋巴細(xì)胞的特征,同時也為免疫治療中選擇具有治療優(yōu)勢的目標(biāo)患者人群提供了更多線索。背景:小細(xì)胞肺癌惡性度高,疾病發(fā)展迅速,常在較早期階段出現(xiàn)血行轉(zhuǎn)移。而目前為止小細(xì)胞肺癌的治療尚無顯著性進(jìn)展。對該疾病的進(jìn)一步深入探究非常迫切。對于小細(xì)胞肺癌治療過程中基因亞克隆結(jié)構(gòu)以及基因組演化的了解將有助于對該疾病發(fā)生發(fā)展深入了解。然而小細(xì)胞肺癌足夠的腫瘤組織樣本常難以獲得,尤其是動態(tài)的腫瘤組織樣本。作為一種具有早期出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移特點(diǎn)的惡性腫瘤,通過循環(huán)血腫瘤DNA(ctDNA)測序來進(jìn)行小細(xì)胞肺癌基因組分析將可能成為研究其相關(guān)基因構(gòu)成及動態(tài)演變的潛在的有力手段。方法:在本研究中,我們對22例小細(xì)胞肺癌治療前的ctDNA及配對的腫瘤組織DNA進(jìn)行430個腫瘤基因的目標(biāo)基因測序。同時還對部分小細(xì)胞肺癌患者在治療的不同時期的血樣進(jìn)行了ctDNA動態(tài)檢測分析,并分析其與臨床特征及生存的相關(guān)性。結(jié)果:分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療前的小細(xì)胞肺癌ctDNA和配對的腫瘤組織DNA有相似的亞克隆結(jié)構(gòu)。治療前ctDNA克隆突變的平均等位基因突變頻率(VAF)與患者的一線無進(jìn)展生存時間以及總生存時間相關(guān)。對治療前、后的ctDNA突變分析顯示在治療后的樣本中出現(xiàn)了更多的與DNA修復(fù)和NOTCH信號通路有關(guān)的突變。結(jié)論:通過ctDNA測序這種檢測體細(xì)胞突變的可靠手段,能夠從較為獨(dú)特和深入的視角有效描繪小細(xì)胞肺癌基因組景觀、亞克隆構(gòu)成和和治療過程中的基因演變。為深層次了解小細(xì)胞肺癌提供了新的途徑,也為小細(xì)胞肺癌預(yù)后提供了新的生物標(biāo)記物選擇。
【學(xué)位授予單位】：北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R734.2
【圖文】：

圖 1 圖中所示分別為一例肺癌患者（上半圖）和健康人（下半圖）流式分選腫瘤活化 CD8+T淋巴細(xì)胞過程。分析前去除黏連細(xì)胞及死細(xì)胞；圈選 CD3+T 淋巴細(xì)胞；分別圈選 CD8+T 細(xì)胞、CD4+T 細(xì)胞的門并排除其余細(xì)胞；針對 CD8+T 淋巴細(xì)胞當(dāng)中表達(dá) CD137 陽性的、以及表達(dá) PD-1陽性的分別圈門。

圖中所示為對于效應(yīng)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞進(jìn)行圈門

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王子喬;張雪茜;孟凡榮;劉U

本文編號：2715997