【摘要】：目的:構建能夠使CD14穩(wěn)定過表達的慢病毒載體。建立穩(wěn)定過表達CD14的胃腺癌SGC-7901細胞系,探討慢病毒載體轉染SGC-7901細胞后CD14的mRNA及蛋白的表達變化,奠定研究胃癌發(fā)病機制的基礎。方法:構建CD14過表達的慢病毒載體。分組:空白對照組(SGC-7901組)、陰性對照組(NC-LV組)、CD14過表達組(LV-CD14組),NC-LV組為用不含CD14的慢病毒載體轉染SGC-7901細胞,LV-CD14組利用CD14過表達載體轉染SGC-7901細胞,空白對照組不做任何處理。隨后用Real-time PCR和Western blot檢測mRNA和蛋白的表達,探討CD14過表達對總蛋白表達的影響。結果:成功構建過表達CD14的慢病毒載體。胃腺癌SGC-7901成功被過表達CD14的慢病毒載體轉染,篩選出穩(wěn)定過表達CD14的胃腺癌SGC-7901體系。LV-CD14組細胞CD14的mRNA相對表達水平是NC-LV組的4.32倍,是空白對照組的4.82倍,LV-CD14組相對表達水平與NC-LV組、空白對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。NC-LV組、SGC-7901組差異不明顯(P0.05)。LV-CD14組的蛋白表達量為NC-LV組的1.700倍,為空白對照組的1.7419倍。穩(wěn)定過表達CD14的細胞,mRNA和蛋白表達水平上都有升高,與NC-LV組、空白對照組相比,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:胃癌SGC-7901細胞成功被CD14過表達慢病毒載體轉染。本研究中,轉染CD14過表達慢病毒載體后,CD14 mRNA和蛋白質在胃癌細胞中過度表達。
【學位授予單位】：廣西中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.2
【圖文】：

一、 CD14 過表達慢病毒載體的構建料和設備驗材料表 1 主要材料 來源293T 細胞 中山大學實驗中心細胞庫毒表達載體（圖 1） 上海吉凱基因化學技術有限公 BLUE MRF’感受態(tài)細胞 上海浩然生物技術有限公司毒陰性對照 上海吉凱基因化學技術有限公

圖 3 酶切電泳圖列：黑色加粗字體CGTCCTGCTTGTTACCACGCCAGAAGTCTGCAACTTCAGTGTGTGTCTGCCTAGAGCCGTTCAGTATGCTGACGTGGGAGCCGCCGTGTGCTAGCGTAAAGATAACCGGAPDH CD14

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 房殿春;;胃癌前病變的概念、類型、病理特征和臨床意義[J];醫(yī)學與哲學(B);2015年11期

2 方培植;陳遠能;黃會云;陳思羽;鄭東林;張濤;;RNAi沉默CD14基因對人胃癌細胞生物學行為的影響[J];胃腸病學和肝病學雜志;2015年02期

3 孟凡榮;陳琛;萬海粟;周清華;;慢病毒載體及其研究進展[J];中國肺癌雜志;2014年12期

4 支忠秋;;氣鋇雙重造影和16排螺旋CT對胃癌的診斷價值評價[J];中國醫(yī)藥指南;2014年29期

5 張濤;曹火留;羅淑娟;鄭東林;陳遠能;;穩(wěn)定沉默CD14胃腺癌SGC-7901細胞體系的構建[J];世界華人消化雜志;2014年22期

6 萬晶晶;馬興剛;;胃癌病因學的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2014年14期

7 張保靜;陳遠能;張濤;;基于CD14,IL-1β表達及SGC-7901細胞凋亡變化探討清熱化濕方防治胃癌的機制[J];中國實驗方劑學雜志;2013年20期

8 石巖巖;丁士剛;;胃癌病因及發(fā)病機制的研究進展[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年17期

9 李康;旦增;王中華;德吉;陳曉紅;劉明花;;CD14穩(wěn)定沉默胃癌細胞系的建立及其侵襲能力研究[J];中國癌癥雜志;2013年04期

10 李康;旦增;王中華;澤永革;邊巴扎西;次仁措姆;;CD14對胃癌SGC-7901細胞TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-12表達的影響[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年07期

相關碩士學位論文 前1條

1 韓曉青;E-cadherin在胃癌發(fā)病機制中的作用及去甲基化藥物對其表達的調(diào)控[D];安徽醫(yī)科大學;2014年

本文編號：2715703