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穩(wěn)定過表達CD14胃腺癌SGC-7901細胞體系的構建

發(fā)布時間:2020-06-16 06:57
【摘要】:目的:構建能夠使CD14穩(wěn)定過表達的慢病毒載體。建立穩(wěn)定過表達CD14的胃腺癌SGC-7901細胞系,探討慢病毒載體轉染SGC-7901細胞后CD14的mRNA及蛋白的表達變化,奠定研究胃癌發(fā)病機制的基礎。方法:構建CD14過表達的慢病毒載體。分組:空白對照組(SGC-7901組)、陰性對照組(NC-LV組)、CD14過表達組(LV-CD14組),NC-LV組為用不含CD14的慢病毒載體轉染SGC-7901細胞,LV-CD14組利用CD14過表達載體轉染SGC-7901細胞,空白對照組不做任何處理。隨后用Real-time PCR和Western blot檢測mRNA和蛋白的表達,探討CD14過表達對總蛋白表達的影響。結果:成功構建過表達CD14的慢病毒載體。胃腺癌SGC-7901成功被過表達CD14的慢病毒載體轉染,篩選出穩(wěn)定過表達CD14的胃腺癌SGC-7901體系。LV-CD14組細胞CD14的mRNA相對表達水平是NC-LV組的4.32倍,是空白對照組的4.82倍,LV-CD14組相對表達水平與NC-LV組、空白對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。NC-LV組、SGC-7901組差異不明顯(P0.05)。LV-CD14組的蛋白表達量為NC-LV組的1.700倍,為空白對照組的1.7419倍。穩(wěn)定過表達CD14的細胞,mRNA和蛋白表達水平上都有升高,與NC-LV組、空白對照組相比,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:胃癌SGC-7901細胞成功被CD14過表達慢病毒載體轉染。本研究中,轉染CD14過表達慢病毒載體后,CD14 mRNA和蛋白質在胃癌細胞中過度表達。
【學位授予單位】:廣西中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R735.2
【圖文】:

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一、 CD14 過表達慢病毒載體的構建料和設備驗材料表 1 主要材料 來源293T 細胞 中山大學實驗中心細胞庫毒表達載體(圖 1) 上海吉凱基因化學技術有限公 BLUE MRF’感受態(tài)細胞 上海浩然生物技術有限公司毒陰性對照 上海吉凱基因化學技術有限公

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圖 3 酶切電泳圖列:黑色加粗字體CGTCCTGCTTGTTACCACGCCAGAAGTCTGCAACTTCAGTGTGTGTCTGCCTAGAGCCGTTCAGTATGCTGACGTGGGAGCCGCCGTGTGCTAGCGTAAAGATAACCGGAPDH CD14

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

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相關碩士學位論文 前1條

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本文編號:2715703

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