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基于轉(zhuǎn)錄組學探究EPA和DHA對前列腺腫瘤作用不同效果和機制的研究

發(fā)布時間:2020-06-04 07:37
【摘要】:前列腺癌是男性中高發(fā)病率、高致死率的疾病,流行病學研究表明,以二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)為代表的Omega-3多不飽和脂肪酸可以參與并調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的多種信號轉(zhuǎn)導機制,影響癌細胞的生長、凋亡、轉(zhuǎn)移等生物學過程,從而抑制或緩解前列腺癌。研究表明EPA和DHA可以通過不同的生物學功效及機理降低心血管疾病或抑制炎癥,但是二者在癌癥方面的作用效果及機理仍存在很多爭議。因此,本文通過裸鼠移植瘤模型探究膳食補充EPA或DHA對前列腺癌的作用效果是否存在差異,并基于轉(zhuǎn)錄組高通量測序手段,進一步從轉(zhuǎn)錄水平探究二者的作用機理存在的異同。本論文主要得到以下幾點結(jié)果:(1)膳食補充EPA可以顯著抑制前列腺腫瘤的生長,且作用效果優(yōu)于DHA。具體表現(xiàn)為:通過分析人前列腺LNCaP癌細胞移植瘤的生長趨勢,發(fā)現(xiàn)膳食補充EPA的小鼠瘤體重量較膳食補充DHA的減少36.60%,體積減小32.23%,腫瘤生長速度最為緩慢;通過酶聯(lián)免疫吸附方法測定小鼠血清中人前列腺特異性抗原(PSA)的濃度發(fā)現(xiàn)膳食補充EPA或DHA較膳食補充Omega-6多不飽和脂肪酸的小鼠血清中的PSA;通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定膳食補充EPA或DHA對小鼠血清中二十碳四烯酸(AA)的影響發(fā)現(xiàn),EPA和DHA均可以顯著降低AA的含量。通過生化分析儀測定小鼠血清中總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量發(fā)現(xiàn),EPA較DHA可以顯著降低TC和TG的含量。(2)基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),EPA和DHA所引起的基因表達存在差異。具體表現(xiàn)為,EPA引起了367個基因的變化,DHA僅引起了192個基因的表達發(fā)生變化,但是二者共同變化的基因數(shù)量僅有24個。(3)通過對篩選得到的差異表達基因進行功能富集分析,發(fā)現(xiàn)EPA下調(diào)表達的247個基因,603個GO條目,33個信號通路得到顯著富集。結(jié)果顯示EPA通過多個信號轉(zhuǎn)導途徑抑制前列腺腫瘤的生長,包括激活VEGFR和EGFR等酪蛋白激酶受體引起下游Ras/Rap1和PI3K信號級聯(lián)反應,或者直接通過抑制PIK3CG、KIT等基因的表達,降低PI3K的催化能力,抑制PIP2磷酸化,通過PI3K/AKT/mTOR信號通路,減少前列腺腫瘤血管生成,減緩腫瘤生長速度。但在DHA的富集結(jié)果中未發(fā)現(xiàn)這些變化。(4)膳食補充EPA上調(diào)了120個基因的表達,通過對這些基因進行功能富集分析發(fā)現(xiàn)這些基因影響了外泌體、囊泡等具有磷脂雙分子層的膜結(jié)構(gòu),影響脂筏的功能,推斷可能通過脂筏促進外泌體釋放,激活前列腺癌細胞自噬。DHA中仍未發(fā)現(xiàn)以上變化。綜上所述,本文研究發(fā)現(xiàn)膳食補充EPA能有效抑制人源前列腺腫瘤在小鼠模型中生長,并通過轉(zhuǎn)錄組學方法研究了其可能的機制,對膳食補充EPA預防和治療前列腺癌提供了理論依據(jù)。
【圖文】:

體內(nèi)合成


圖 1-1 Omega-3 PUFAs 的體內(nèi)合成Fig.1-1 The synthesis of Omega-3 PUFAs in body具體的合成過程如下:首先 ALA 在 6-去飽和酶的作用下合成十八碳四烯酸,,經(jīng)過碳鏈延長生成 EPA 其中第一步的去飽和是 ALA 合成 EPA 過程中的關(guān)鍵限速步驟 EPA 在 ELOVL2 基因編碼的延長酶的作用下轉(zhuǎn)化為 DPA[11],再經(jīng)過碳鏈延長酶 6-去

流程圖,轉(zhuǎn)錄組,測序,流程


轉(zhuǎn)錄組測序流程
【學位授予單位】:江南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R737.25

【相似文獻】

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本文編號:2696081

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