【摘要】：目的通過研究去甲斑蝥素對腎癌細(xì)胞(ACHN、786-O)的凋亡和周期的影響,探討其潛在的抗腫瘤機(jī)制。方法我們使用細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTS)研究去甲斑蝥素處理腎癌細(xì)胞后對腎癌細(xì)胞增殖能力的調(diào)控作用;另外,我們使用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期與凋亡情況;Western Blot實(shí)驗(yàn)研究細(xì)胞周期和凋亡相關(guān)蛋白的改變。結(jié)果我們用不同濃度的去甲斑蝥素(0,10,50,100,500,800μM)分別處理腎癌細(xì)胞(ACHN和786-O)0,24,48,72,96小時(shí),結(jié)果發(fā)現(xiàn)去甲斑蝥素可以顯著性抑制腎細(xì)胞癌ACHN和786-O細(xì)胞的生長并且具有明顯的時(shí)間和濃度依賴性,在24h時(shí),100μM的去甲斑蝥素能顯著性抑制腎癌細(xì)胞(786-O和ACHN)的增殖。另外,我們分別用0μM、10μM、100μM、200μM的去甲斑蝥素處理腎癌細(xì)胞24小時(shí)后,流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)100μM的去甲斑蝥素可以顯著性阻滯腎癌細(xì)胞周期于G2/M期;為了進(jìn)一步證實(shí)去甲斑蝥素對腎癌細(xì)胞周期的影響,我們通過Western Blot實(shí)驗(yàn)研究對P21、cyclinB1、pCDC2、CDC2、pCDC25C、CDC25C等細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,發(fā)現(xiàn)去甲斑蝥素可以顯著性抑制cyclinB1的表達(dá)、促進(jìn)P21、pCDC25C和pCDC2的表達(dá)、而對CDC2和CDC25C表達(dá)沒影響。更進(jìn)一步,通過Annexin V/PI染色發(fā)現(xiàn)去甲斑蝥素可以顯著性促進(jìn)腎癌細(xì)胞的凋亡并且抑制凋亡相關(guān)蛋白caspase-9、caspase-3和PARP的表達(dá)、促進(jìn)凋亡相關(guān)蛋白cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的表達(dá)。結(jié)論本研究結(jié)果表明去甲斑蝥素可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和凋亡相關(guān)蛋白誘導(dǎo)腎癌細(xì)胞G2/M期阻滯并促進(jìn)其凋亡,進(jìn)而起到抗腫瘤的作用。
【學(xué)位授予單位】：寧波大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.11

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本文編號：2695455