【摘要】：目的通過研究去甲斑蝥素對腎癌細胞(ACHN、786-O)的凋亡和周期的影響,探討其潛在的抗腫瘤機制。方法我們使用細胞增殖實驗(MTS)研究去甲斑蝥素處理腎癌細胞后對腎癌細胞增殖能力的調控作用;另外,我們使用流式細胞術檢測細胞周期與凋亡情況;Western Blot實驗研究細胞周期和凋亡相關蛋白的改變。結果我們用不同濃度的去甲斑蝥素(0,10,50,100,500,800μM)分別處理腎癌細胞(ACHN和786-O)0,24,48,72,96小時,結果發(fā)現(xiàn)去甲斑蝥素可以顯著性抑制腎細胞癌ACHN和786-O細胞的生長并且具有明顯的時間和濃度依賴性,在24h時,100μM的去甲斑蝥素能顯著性抑制腎癌細胞(786-O和ACHN)的增殖。另外,我們分別用0μM、10μM、100μM、200μM的去甲斑蝥素處理腎癌細胞24小時后,流式細胞術發(fā)現(xiàn)100μM的去甲斑蝥素可以顯著性阻滯腎癌細胞周期于G2/M期;為了進一步證實去甲斑蝥素對腎癌細胞周期的影響,我們通過Western Blot實驗研究對P21、cyclinB1、pCDC2、CDC2、pCDC25C、CDC25C等細胞周期相關蛋白表達的影響,發(fā)現(xiàn)去甲斑蝥素可以顯著性抑制cyclinB1的表達、促進P21、pCDC25C和pCDC2的表達、而對CDC2和CDC25C表達沒影響。更進一步,通過Annexin V/PI染色發(fā)現(xiàn)去甲斑蝥素可以顯著性促進腎癌細胞的凋亡并且抑制凋亡相關蛋白caspase-9、caspase-3和PARP的表達、促進凋亡相關蛋白cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的表達。結論本研究結果表明去甲斑蝥素可通過調節(jié)細胞周期和凋亡相關蛋白誘導腎癌細胞G2/M期阻滯并促進其凋亡,進而起到抗腫瘤的作用。
【學位授予單位】：寧波大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R737.11

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