【摘要】：第一章甲基納曲酮抑制肝癌Hep G2細(xì)胞生物學(xué)行為目的:觀察甲基納曲酮對(duì)肝癌Hep G2細(xì)胞增殖、遷移能力的影響方法:傳代培養(yǎng)Hep G2人肝癌細(xì)胞于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,分別將含100μmol/L甲基納曲酮(低劑量組)、1000μmol/L甲基納曲酮(高劑量組)培養(yǎng)基與肝癌Hep G2細(xì)胞共孵24h、48h、72h,以等體積生理鹽水處理組設(shè)立空白對(duì)照組。應(yīng)用CCK8法觀察甲基納曲酮對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響,transwell法觀察甲基納曲酮對(duì)Hep G2細(xì)胞遷移能力的影響。結(jié)果:CCK8實(shí)驗(yàn)不同劑量實(shí)驗(yàn)組及不同時(shí)間作用的OD值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F組間=127.136,P組間=0.000),隨時(shí)間條件的改變,相同劑量組的OD值均有變化的趨勢(shì)(F時(shí)間=230.984,P時(shí)間=0.000),相同時(shí)間的不同劑量組之間亦有顯著性差異(F劑量=18.15,P劑量=0.000),其中低濃度組和高濃度組無顯著性差異(P=0.112);Transwell遷移實(shí)驗(yàn)顯示高劑量組作用Hep G2細(xì)胞72h可顯著降低Hep G2細(xì)胞的遷移性。結(jié)論:甲基納曲酮對(duì)肝癌Hep G2細(xì)胞增殖、遷移具有顯著的抑制作用。第二章甲基納曲酮抑制肝癌Hep G2細(xì)胞生長(zhǎng)機(jī)制研究目的:初步探討甲基納曲酮對(duì)肝癌Hep G2細(xì)胞生物學(xué)功能影響的機(jī)制方法:人肝癌細(xì)胞Hep G2培養(yǎng)至生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期,將1000μmol/L甲基納曲酮(高劑量組)培養(yǎng)基與肝癌Hep G2細(xì)胞共孵72h,以等體積生理鹽水處理組設(shè)立空白對(duì)照組。應(yīng)用熒光定量PCR法觀察甲基納曲酮對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep G2的VEGF、MMP-9在m RNA水平上的影響,用Western Blot法觀察甲基納曲酮對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep G2的VEGF、MMP-9在蛋白水平上的影響。結(jié)果:高濃度的甲基納曲酮作用72h后,對(duì)照組人肝癌細(xì)胞Hep G2的VEGF的m RNA的相對(duì)表達(dá)量為1.00±0.03,高于實(shí)驗(yàn)組0.38±0.09(t=9.35,P=0.003),差異結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);對(duì)照組MMP-9的m RNA的相對(duì)表達(dá)量為0.96±0.17高于實(shí)驗(yàn)組的0.75±0.22(t=1.243,P=0.000),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與對(duì)照組相比,高濃度甲基納曲酮作用于肝癌Hep G2細(xì)胞72h后,VEGF、MMP-9的蛋白表達(dá)量較對(duì)照組有所下調(diào),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:甲基納曲酮對(duì)肝癌Hep G2細(xì)胞生物學(xué)功能影響的機(jī)制可能與甲基納曲酮可下調(diào)肝癌Hep G2細(xì)胞的VEGF、MMP-9在m RNA、蛋白水平上的表達(dá)有關(guān)。第三章甲基納曲酮對(duì)裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)抑制目的:建立裸鼠移植瘤模型并進(jìn)一步探討甲基納曲酮在體內(nèi)對(duì)Hep G2人肝癌細(xì)胞的裸鼠移植瘤的成瘤能力的影響。方法:消化收集對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的人肝癌Hep G2細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞個(gè)數(shù)為1*107個(gè),總共200ul。將以上制備好用于接種裸小鼠的Hep G2各組細(xì)胞懸液,于裸小鼠腋下注射入Hep G2細(xì)胞懸液制成動(dòng)物實(shí)體瘤模型。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、單純甲基納曲酮用藥組,單純甲基納曲酮用藥組第8天開始藥物干預(yù),對(duì)照組以同樣方法每天給予等量生理鹽水。正常喂養(yǎng)29天。觀察裸鼠成瘤情況,于第30天盡可能完整無缺地剝離裸鼠的瘤組織并記下所稱量的重量,記下各瘤組織的重量,拍照。成瘤率=(成瘤裸鼠數(shù)/試驗(yàn)組裸鼠數(shù))×100%。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,甲基納曲酮組裸鼠一般情況好于對(duì)照組,不良表型好于對(duì)照組。營(yíng)養(yǎng)狀況甲基納曲酮組好于對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組體重顯著大于對(duì)照組(t=2.49,P=0.032);用藥結(jié)束后,甲基納曲酮組凈瘤質(zhì)量明顯小于對(duì)照組(t=5.45,P=0.000)。結(jié)論:在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,甲基納曲酮具有抑制Hep G2人肝癌細(xì)胞移植瘤的成瘤,抑制率為59.23%,這和體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。
【圖文】：

CCK-8 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示不同劑量 MNTX 組及不同時(shí)間作用的 OD 值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F 組間=127.136 ，P 組間= 0.000)，相同劑量組的 OD 值均有隨時(shí)間變化的趨勢(shì)（F 時(shí)間= 230.984 ，P 時(shí)間= 0.000），相同時(shí)間的不同劑量組之間亦有顯著性差異（F 劑量= 18.15 ，P 劑量= 0.000），其中低濃度組和高濃度組無顯著性差異（P = 0.112）。見表 1-1，圖 1-1。表 1-1 甲基納曲酮對(duì)肝癌 HepG2 細(xì)胞的增殖的影響（x±s，n=5）Table 1-1 Effects of MNTX on proliferation of HepG2 cells at different time（x±s，n=5）組別 OD 值 抑制率/%24h 48h 72h 24h 48h 7白對(duì)照組 0.365±0.019 0.453±0.023 0.705±0.064 — — 濃度實(shí)驗(yàn)組 0.322±0.018 0.396±0.022 0.614±0.034 11.640±3.161*11.748±7.671*17.095±5.4濃度實(shí)驗(yàn)組 0.318±0.012 0.385±0.042 0.599±0.047 12.803±1.452*14.595±7.346*21.837±2.67注： 與空白對(duì)照組比較，*P <0.05 ,—：無數(shù)據(jù)；

甲基納曲酮對(duì)肝癌 HepG2 細(xì)胞增殖、遷移及作用機(jī)制的影響 2018 屆碩士學(xué)位論文2 甲基納曲酮對(duì) HepG2 細(xì)胞遷移情況的影響與空白對(duì)照組相比，高濃度甲基納曲酮組遷移細(xì)胞數(shù)為（42.33±4.73）個(gè)，遷移率為 67.9%；低濃度甲基納曲酮組遷移細(xì)胞數(shù)為（50.33±1.53）個(gè)，遷移率為 80.7%；對(duì)照組遷移細(xì)胞數(shù)為（62.33± 5.50）。加藥處理組與對(duì)照組相比有顯著性差異（F =16.582 ，P =0.004）；高劑量組與低劑量組相比無顯著性差異（t =3.50 ，P =0.062）。如圖 1-2，，1-3。遷移細(xì)
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 鐘崇;郭榮平;石明;韋瑋;俞武生;李錦清;;VEGF與MMP-9在肝癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J];癌癥;2006年05期

本文編號(hào)：2692144