【摘要】：腫瘤細(xì)胞的發(fā)展、遷VI移和入侵的過程都伴隨著細(xì)胞質(zhì)膜特性的改變,而脂筏是細(xì)胞質(zhì)膜上富含膽固醇和鞘脂類的、動(dòng)態(tài)的、不均勻的微結(jié)構(gòu)域,在細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)和運(yùn)輸中起著重要的作用。因此,研究不同腫瘤細(xì)胞與其質(zhì)膜脂筏特性之間的關(guān)系具有重要意義,為脂筏結(jié)構(gòu)和功能的異�？赡軐�(dǎo)致的許多疾病提供研究基礎(chǔ)。本文利用光學(xué)顯微術(shù)結(jié)合環(huán)境敏感探針研究不同腫瘤細(xì)胞質(zhì)膜的特性以及膽固醇對(duì)其特性的影響。首先,通過激光掃描共焦顯微鏡(LSCM)結(jié)合Di-4-ANEPPDHQ探針研究三種乳腺癌細(xì)胞MCF-10A、MCF-7和MDA-MB-231的遷移能力和質(zhì)膜廣義極化(GP)值之間的關(guān)系,結(jié)果顯示遷移能力越強(qiáng)的細(xì)胞,其質(zhì)膜的GP值越高。接著,通過膽固醇損耗試劑甲基-β-環(huán)糊精(MβCD)損耗膽固醇,研究膽固醇對(duì)三種細(xì)胞遷移能力的影響。實(shí)驗(yàn)表明膽固醇含量較高的乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231和MCF-7對(duì)膽固醇消耗試劑更敏感,正常上皮細(xì)胞則對(duì)其具有一定的抵抗性。并且,上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果也通過檢測(cè)其細(xì)胞遷移標(biāo)志蛋白MMP-9和uPAR的基因表達(dá)水平得到了驗(yàn)證。研究結(jié)果有助于了解脂筏微區(qū)在癌細(xì)胞發(fā)展中發(fā)揮的作用,對(duì)癌癥的預(yù)防和提前診斷具有重要的意義。其次,在理論、模擬和實(shí)驗(yàn)三個(gè)方面分別介紹了結(jié)構(gòu)光照明顯微術(shù)(SIM)提高分辨率的原理及實(shí)驗(yàn)證明。之后,基于Leica倒置顯微鏡搭建雙通道SIM系統(tǒng),結(jié)合環(huán)境敏感探針Di-4-ANEPPDHQ研究活細(xì)胞質(zhì)膜的秩序,其實(shí)驗(yàn)結(jié)果和共焦結(jié)果有很好的一致性。最后,通過MβCD損耗細(xì)胞質(zhì)膜的膽固醇,利用生物型原子力顯微鏡研究膽固醇對(duì)腫瘤細(xì)胞生物物理特性的影響,結(jié)果表明作為膜脂重要組成的膽固醇對(duì)細(xì)胞生物物理特性有明顯影響。
【圖文】：

在相關(guān)的、聚集的膜成分。自從脂筏假說提出以來，研也取得了很大的發(fā)展，多種技術(shù)被用來研究細(xì)胞脂筏去污劑膜技術(shù)、模型膜、熒光標(biāo)記、超分辨成像技術(shù)開辟了全新的研究領(lǐng)域，以下將介紹近年來細(xì)胞質(zhì)膜１．１生物化學(xué)手段在質(zhì)膜研究中的應(yīng)用逡逑劑膜逡逑一次證明細(xì)胞膜是橫向異質(zhì)的是在１９７０年，是因?yàn)橛^去污劑的中溶解度存在差異｜２】。這個(gè)方法的基本原理非離子去污劑可以分成兩個(gè)不同的部分：可溶去污劑（ＤＲＭｓ），其原理如圖Ｍ所示。逡逑

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本文編號(hào)：2689261