【摘要】：目的:探討伯舒替尼(Bosutinib)對(duì)肝癌細(xì)胞Hep G2的放療增敏效果及其可能的機(jī)制,為臨床上提高肝癌的放療效果提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為單純藥物組、單純放療組(2Gy)、單純放療組(4Gy)藥物+放療組(2Gy)和藥物+放療組(4Gy);采用CCK-8法檢測(cè),選取兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)(24h、48h)檢測(cè)不同藥物濃度與不同放射劑量對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep G2的抑制作用;進(jìn)一步通過(guò)細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞存活情況。最后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組的細(xì)胞周期。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS22.0處理數(shù)據(jù),運(yùn)用多元相關(guān)方法、方差分析方法,分析各因素對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep G2的抑制作用以及各因素之間的作用。結(jié)果:1.單純藥物組的肝癌細(xì)胞Hep G2的生長(zhǎng)抑制率,作用24h、48h后分別為1000n M/ml、600n M/ml。細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)有時(shí)間-劑量效應(yīng),方差分析結(jié)果顯示,當(dāng)藥物濃度大于200 n M/ml后的藥物濃度和作用時(shí)間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。放療劑量、伯舒替尼濃度均對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep G2的生長(zhǎng)有抑制作用,而且藥物濃度和放療劑量具有協(xié)同作用。通過(guò)分析肝癌細(xì)胞的抑制率與伯舒替尼濃度、時(shí)間的相關(guān)性、放療劑量,結(jié)果發(fā)現(xiàn),生長(zhǎng)抑制率受放療劑量、伯舒替尼濃度、作用時(shí)間的影響,呈正相關(guān)關(guān)系,數(shù)據(jù)結(jié)果通過(guò)分析均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。實(shí)驗(yàn)的結(jié)果提示伯舒替尼對(duì)肝癌細(xì)胞株Hep G2的生長(zhǎng)抑制率有顯著的影響,在肝癌細(xì)胞體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中顯示出增敏效應(yīng),同時(shí)增敏效果隨著放療劑量越大更加明顯。2.細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)中,伯舒替尼藥物濃度設(shè)定為100n M/ml時(shí)候,單純伯舒替尼藥物聯(lián)合放療后對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep G2的生長(zhǎng)增殖起到較強(qiáng)的抑制作用,隨著放療劑量的增加,伯舒替尼藥物聯(lián)合放療對(duì)Hep G2細(xì)胞的增殖抑制作用更加明顯。3.不同藥物濃度處理24、48h后,檢測(cè)細(xì)胞的周期分布,發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度和作用時(shí)間的增加,細(xì)胞G1、G2、S期所占比例均發(fā)生了變化。隨著伯舒替尼藥物濃度增加在作用24h內(nèi)檢測(cè),細(xì)胞周期中的S期所占細(xì)胞周期的百分比逐漸減少,通過(guò)作用時(shí)間的增加,即48h后,S期所占細(xì)胞周期的比例降低的更加明顯。伯舒替尼聯(lián)合放療后,檢測(cè)各細(xì)胞周期所占百分比,結(jié)果經(jīng)過(guò)分析后均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。肝癌細(xì)胞周期的分布改變更加明顯。結(jié)論:伯舒替尼可以明顯的抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng),伯舒替尼藥物聯(lián)合放療對(duì)Hep G2細(xì)胞的增殖有更加明顯的抑制作用。伯舒替尼具有較強(qiáng)的放療增敏作用,其作用機(jī)制可能是通過(guò)改變細(xì)胞周期時(shí)相的分布實(shí)現(xiàn)。
【圖文】：

圖 3 不同濃度藥物作用 24h、48h 后 CCK-8 檢測(cè)的細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)表 4 單純藥物組、放療 2Gy、4Gy 后單純放療組與藥物+放療組后 CCK-8 檢的 SF 值方差分析表比較（x士s n=3）2Gy 4Gy24h P 值 48h P 值 24h P 值 48h P 值藥物組0.8066 士0.01520.000 0.7165 士0.03590.0000.8067 士0.01520.000 0.7165 士0.03590.000放療組0.9464 士0.00780.001 0.9083 士0.01540.0000.9038 士0.00840.000 0.8675 士0.01150.000物+放療0.7118 士0.03110.000 0.6937 士0.00740.000 0.6284 士0.00150.000 0.5574 士0.01460.000表 5 放療 2Gy 時(shí)不同濃度的作用 24h、48h 后 CCK-8 檢測(cè)的 SF 值方差分析表x 士 s n=3）濃度 nM/ml 作用時(shí)間 24h P 值 作用 48h P 值

環(huán)境下的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。將培養(yǎng) 10-14d 后的細(xì)胞按照步驟 2 計(jì)算細(xì)胞克隆數(shù)，整理并分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2.3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果伯舒替尼藥物在不同濃度作用 10 天后，首先選擇顯微鏡計(jì)算大于 50 個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞團(tuán)，大于 50 個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞團(tuán)算做是一個(gè)細(xì)胞克隆，然后計(jì)數(shù)每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)皿中細(xì)胞的克隆數(shù)，，我們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)皿內(nèi)，細(xì)胞的克隆數(shù)值隨伯舒替尼藥物的濃度增加而減少（見(jiàn)圖 7）。在伯舒替尼藥物濃度設(shè)定為 100nM/ml 時(shí)候,單純伯舒替尼藥物聯(lián)合放療后，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)藥物聯(lián)合放療對(duì)人肝癌細(xì)胞 HepG2的生長(zhǎng)增殖起到良好的抑制作用，另外，隨著放療劑量的增加，伯舒替尼藥物聯(lián)合放療對(duì) HepG2 細(xì)胞的增殖抑制作用更加明顯（見(jiàn)圖 8）。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊澤;李陽(yáng);萬(wàn)小亞;穆懿;馬虎;柏玉舉;;腫瘤放射治療增敏劑研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2015年30期

2 青格樂(lè)圖;金剛;;肝癌手術(shù)治療的研究進(jìn)展[J];中國(guó)民族民間醫(yī)藥;2015年04期

3 戴一;賈曉益;;伯舒替尼的藥理研究及臨床評(píng)價(jià)[J];中國(guó)新藥與臨床雜志;2014年04期

4 李焱;程朋;;中晚期肝癌臨床治療進(jìn)展[J];臨床肝膽病雜志;2014年03期

5 江曼;錢(qián)曉萍;劉寶瑞;;惡性腫瘤放射增敏劑研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2014年01期

6 鄭建洪;黃紅萍;;伯舒替尼的藥理作用和臨床評(píng)價(jià)[J];中國(guó)新藥雜志;2013年12期

7 蔣俊;權(quán)循鳳;;基因放療增敏的機(jī)制及臨床研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)學(xué);2012年08期

8 鄧潔;莊亮;陳元;;吉非替尼對(duì)肺癌細(xì)胞株H358放療敏感性的影響及其機(jī)制[J];中國(guó)肺癌雜志;2011年11期

9 石靜濱;張卓;徐曉穎;陳英海;;吉非替尼對(duì)肝癌Bel7402細(xì)胞株放射增敏作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華腫瘤防治雜志;2011年11期

10 賴(lài)海春;王德生;;表皮生長(zhǎng)因子受體與頭頸部腫瘤[J];福建醫(yī)藥雜志;2010年03期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 王浩;靶向腫瘤放療增敏劑—NIES系列化合物的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

本文編號(hào)：2667078