【摘要】：背景和目的胃癌(gastric cancer,GC)是全世界最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率在惡性腫瘤中分別位居第五位和第三位。據(jù)統(tǒng)計(jì),2012年世界范圍內(nèi)胃癌新發(fā)病例超過(guò)95萬(wàn)例,因胃癌死亡的病例超過(guò)72萬(wàn)例。中國(guó)的發(fā)病例數(shù)和死亡例數(shù)約占世界的一半。盡管近年來(lái)化療、放療和手術(shù)技術(shù)在GC方面取得了進(jìn)展,但GC患者的生存率仍不盡人意。主要是因?yàn)镚C缺乏早期診斷方法,大多數(shù)患者被診斷時(shí)已屬晚期,并且在治療、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估等方面存在較多困難。盡管許多致癌基因或腫瘤抑制基因已被確定為GC發(fā)生的關(guān)鍵參與者,但是,幾乎沒(méi)有建立公認(rèn)的生物標(biāo)志物來(lái)促進(jìn)患者的綜合管理。因此,尋找有效的GC特異性標(biāo)志物為其提供臨床診斷及治療依據(jù)對(duì)于提高GC的整體治療水平意義重大。越來(lái)越多的研究表明,長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)在各種癌癥中起著至關(guān)重要的調(diào)節(jié)作用。lnc RNAs可能通過(guò)改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)或通過(guò)調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)編碼基因的轉(zhuǎn)錄而發(fā)揮致癌基因或腫瘤抑制劑的作用。母系表達(dá)基因3(Materally expressed gene 3,MEG3)是一種腫瘤抑制基因,編碼與腫瘤發(fā)生相關(guān)的非編碼RNA(noncoding RNA,nc RNA)。MEG3在許多正常組織中表達(dá),而在許多人類(lèi)腫瘤和腫瘤衍生的細(xì)胞系中經(jīng)常缺失、突變或水平降低。研究表明MEG3可能是胃癌的抑癌基因。E-cadherin是鈣介導(dǎo)的細(xì)胞粘附分子,其異常(低)表達(dá)與一些癌癥的晚期階段和更具侵襲性有關(guān)。E-cadherin被認(rèn)為是腫瘤轉(zhuǎn)移的抑制劑,其低表達(dá)是上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的標(biāo)志之一。EMT可能涉及表觀遺傳調(diào)節(jié),例如組蛋白修飾、DNA甲基化、micro RNA和lnc RNAs等。研究表明一些lnc RNAs以E-cadherin為靶點(diǎn)調(diào)節(jié)EMT過(guò)程。表觀遺傳學(xué)調(diào)控MEG3的表達(dá),MEG3在多種腫瘤中存在異常甲基化。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),過(guò)表達(dá)MEG3的GC細(xì)胞株獲得了EMT表型特征。那么,lnc RNA MEG3和E-cadherin在GC中的作用機(jī)制如何?兩者之間是否存在某種關(guān)系?目前基本不清楚。本研究通過(guò)測(cè)定GC患者癌組織、癌旁正常組織中l(wèi)nc RNA MEG3和E-cadherin的相對(duì)表達(dá)水平,探討lnc RNA MEG3和E-cadherin與患者臨床病理特征的關(guān)系及兩者在GC癌組織中表達(dá)的相關(guān)性。方法1.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、免疫組織化學(xué)法,檢測(cè)56例胃癌患者癌組織、癌旁正常組織中l(wèi)nc RNA MEG3和E-cadherin的表達(dá)情況,并分別分析兩者與患者臨床病理特征之間的關(guān)系及兩者在癌組織中表達(dá)的相關(guān)性。2.應(yīng)用SPSS 21.0軟件、Graphpad Prism 6.0軟件分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,采用t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)分別比較lnc RNA MEG3和E-cadherin在癌組織和癌旁正常組織中表達(dá)有無(wú)差異;采用χ2檢驗(yàn)分別驗(yàn)證兩者在癌組織中的相對(duì)表達(dá)水平與患者臨床病理特征的關(guān)系;采用Spearman相關(guān)性分析探討兩者在癌組織中表達(dá)的相關(guān)性。檢驗(yàn)顯著性水準(zhǔn)取α=0.05,P0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.與配對(duì)癌旁正常組織相比,lnc RNA MEG3、E-cadherin在胃癌癌組織中的相對(duì)表達(dá)量、陽(yáng)性表達(dá)率均明顯降低(均P0.05);2.胃癌組織中l(wèi)nc RNA MEG3在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的表達(dá)情況明顯低于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移(P=0.033),腫瘤大的表達(dá)情況明顯低于腫瘤小的(P=0.038),分期越晚,表達(dá)量越低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.017),其在胃癌組織中相對(duì)表達(dá)水平與性別、年齡、浸潤(rùn)深度、病理類(lèi)型、脈管癌栓、分化程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和Her-2無(wú)明顯相關(guān)性(P0.05);3.胃癌組織中E-cadherin在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的表達(dá)情況明顯低于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移的(P=0.037),在低分化者的表達(dá)情況明顯低于高中分化者(P=0.038),腫瘤大的表達(dá)情況明顯低于腫瘤小的(P=0.008),分期越晚,表達(dá)量越低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003),其在胃癌組織中相對(duì)表達(dá)水平與性別、年齡、浸潤(rùn)深度、病理類(lèi)型、脈管癌栓、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和Her-2無(wú)明顯相關(guān)性(P0.05);4.Lnc RNA MEG3與E-cadherin在癌組織中的相對(duì)表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(P0.001),其中r=0.651。結(jié)論1.Lnc RNA MEG3和E-cadherin在胃癌中低表達(dá),兩者均與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān),可能參與胃癌的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移,可能作為評(píng)估病情的潛在生物標(biāo)志物;2.Lnc RNA MEG3和E-cadherin在胃癌癌組織中表達(dá)存在正相關(guān)性,兩者可能存在調(diào)控關(guān)系。
【圖文】：

依次為28s、18s、5s，其中28s最亮，并且其亮度約是18s條帶亮度的2倍，，5s條帶較模糊，甚至部分不顯示。本電泳結(jié)果證明所提取胃癌組織中的總RNA完整性良好，質(zhì)量合格，如圖3.1所示。圖3.1 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)提取總RNA完整性3.2 與配對(duì)癌旁正常組織相比，胃癌患者癌組織中 MEG3 和 E-cadherin 表達(dá)水平明顯降低本研究共檢測(cè)了56對(duì)胃癌患者癌組織及其配對(duì)癌旁正常組織中MEG3的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，與配對(duì)癌旁正常組織相比，MEG3在83.93％（47/56）的癌組織中表達(dá)水平下降，且MEG3在癌組織中的表達(dá)水平明顯低于配對(duì)癌旁正常組織（P<0.001），如圖3.2所示。根據(jù)MEG3相對(duì)表達(dá)水平（癌組織/癌旁正常

癌旁正常組織＞0.61，n=20）和低表達(dá)組（癌組織/癌旁正常組織≤0.61，n=36）。E-cadherin在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為46.43％（26/56），明顯低于配對(duì)癌旁正常組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。免疫組化染色如圖3.3所示。圖3.2 與癌旁正常組織相比，MEG3在胃癌患者癌組織中表達(dá)顯著降低圖3.3 胃癌患者癌組織中E-cadherin免疫組化染色（×200）
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

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本文編號(hào)：2665510