【摘要】：【目的】采用免疫組織化學的方法研究含免疫球蛋白V區(qū)的T細胞活化抑制子(VISTA)在肝細胞肝癌(HCC)組織標本中的表達及其臨床意義。【方法】1.第一部分:收集2006年1月至2012年12月解放軍福州總醫(yī)院經(jīng)外科手術(shù)切除且病肝經(jīng)病理確診為HCC病例,具有完整病理臨床資料及隨訪信息,同時排除因其他腫瘤、外界因素或術(shù)后重癥感染等并發(fā)癥致死的病例,共計338例。以338例HCC為實驗材料,制備肝癌及癌旁組織的組織芯片,并應(yīng)用EliVision~TMM plus IHC染色方法觀察VISTA的表達,分析其與患者臨床病理因素之間的關(guān)系以及對HCC患者預后的影響。2.第二部分:探討HCC腫瘤微環(huán)境中CD8、Foxp3的表達情況及其與HCC臨床病理特征的關(guān)系和預后,并分析VISTA蛋白與CD8、Foxp3的相關(guān)性。3.第三部分:觀察ZEB1蛋白在HCC組織中的表達情況,探討其與臨床病理因素及患者預后之間的關(guān)系,并分析與VISTA蛋白的相關(guān)性�！窘Y(jié)果】1.VISTA在HCC腫瘤細胞、間質(zhì)淋巴細胞以及血管內(nèi)皮細胞陽性表達率分別為16.27%(55/338)、100%(338/338)、89.05%(301/338);VITSA在HCC腫瘤細胞中表達水平高于正常肝組織;2.肝癌間質(zhì)淋巴細胞中VISTA的表達與腫瘤大小、脈管侵犯、腫瘤分化程度、T分期、血清AFP水平相關(guān)(P0.05);與年齡、性別、腫瘤包膜完整、乙肝病毒感染、門靜脈侵犯、腫瘤數(shù)量、遠處轉(zhuǎn)移、術(shù)后復發(fā)轉(zhuǎn)移和肝硬化無相關(guān)性(P0.05)。HCC腫瘤細胞中VISTA蛋白表達與臨床病理參數(shù)均無相關(guān)性(P0.05)。3.338個病例5年回顧分析發(fā)現(xiàn),VISTA低表達組的總生存率明顯高于高表達組(P0.05);VISTA低表達組的無復發(fā)生存率與VISTA高表達組無統(tǒng)計學差異(P0.05)。4.CD8、Foxp3在腫瘤間質(zhì)淋巴細胞的陽性表達率分別為97.63%(330/338)、88.16%(298/338)。HCC間質(zhì)淋巴細胞中CD8蛋白的表達與腫瘤包膜完整、腫瘤大小、脈管侵犯、腫瘤分化程度、T分期相關(guān)(P0.05)。HCC間質(zhì)淋巴細胞中Foxp3蛋白的表達與脈管侵犯、門靜脈侵犯、術(shù)后復發(fā)轉(zhuǎn)移、乙型肝炎病毒感染相關(guān)(P0.05)。5.338例HCC患者中,Foxp3高表達患者的5年總生存率明顯低于Foxp3低表達組(P=0.0005);CD8低表達患者的5年總生存率明顯低于CD8高表達組(P=0.0037)。VISTA低表達而CD8高表達的患者顯示預后較好,而VISTA高表達而CD8低表達的患者預后差。VISTA蛋白和Foxp3蛋白共同低表達時患者顯示預后好。VISTA蛋白和Foxp3蛋白低表達而CD8高表達時患者顯示預后好。VISTA蛋白高表達和CD8低表達,Foxp3蛋白無論高表達還是低表達時,患者預后均較差。6.對338例HCC的多因素分析顯示,腫瘤分化程度、脈管侵犯、門靜脈侵犯、VISTA高表達、Foxp3高表達是患者死亡的獨立危險因素。7.338例HCC組織中ZEB1的陽性表達率為24.85%(84/338),對應(yīng)的正常肝組織的陽性表達率為0.59%(2/338)。HCC組織中ZEB1的表達與年齡、脈管侵犯、乙型肝炎病毒感染、T分期、血清AFP水平相關(guān)(P0.05)。8.ZEB1陰性患者的5年生存率明顯高于ZEB1陽性組(P0.05);兩組間的無復發(fā)生存率無統(tǒng)計學差異(P0.05)。9.VISTA表達與ZEB1表達呈正相關(guān)關(guān)系(P0.05)。【結(jié)論】HCC組織中VISTA主要表達于肝癌間質(zhì)淋巴細胞中,腫瘤細胞表達率較低,且與臨床病理參數(shù)無相關(guān)性。HCC間質(zhì)淋巴細胞中VISTA、CD8、Foxp3的表達和癌細胞ZEB1表達與多個臨床病理參數(shù)相關(guān);HCC間質(zhì)淋巴細胞中VISTA高表達,CD8低表達、Foxp3高表達、ZEB1高表達與腫瘤的侵襲進展有關(guān),并且與患者預后不良有關(guān)。當VISTA蛋白高表達伴CD8低表達時,患者預后明顯較差。而VISTA蛋白低表達、CD8高表達同時伴Foxp3蛋白低表達時,患者的總體生存率明顯高于其他組別,顯示患者預后較好;三者的表達對患者預后有一定的提示作用。VISTA表達與ZEB1表達具有正相關(guān)性。
【圖文】：

1.4 HCC 組織中 VISTA 蛋白的表達與肝癌患者預后的關(guān)系338 例 HCC 患者術(shù)后隨訪至少五年，截止至 2017 年 12 月 31 日，隨訪時間為1~129 個月，中位隨訪時間為 63 個月；無復發(fā)生存期隨訪中位時間 31 個月(1~129個月)，復發(fā)時間為術(shù)后 1～50 個月。分別按照上文所述每 mm2淋巴細胞和每 100個淋巴細胞中 VISTA 陽性表達閾值確定兩種方法下的 High組、Low組，采用Kaplan-Meier 法計算 5 年總生存率、無復發(fā)生存率，Log-rank 檢驗進行單因素分析。結(jié)果顯示：VISTA低表達組（Low組）的 5年總生存率均明顯高于高表達組（High組）（P＜0.05）（圖 2A-B）；而兩組間的無復發(fā)生存率無統(tǒng)計學差異（P>0.05，圖 2C-D）。

1.4 HCC 組織中 VISTA 蛋白的表達與肝癌患者預后的關(guān)系338 例 HCC 患者術(shù)后隨訪至少五年，截止至 2017 年 12 月 31 日，，隨訪時間為1~129 個月，中位隨訪時間為 63 個月；無復發(fā)生存期隨訪中位時間 31 個月(1~129個月)，復發(fā)時間為術(shù)后 1～50 個月。分別按照上文所述每 mm2淋巴細胞和每 100個淋巴細胞中 VISTA 陽性表達閾值確定兩種方法下的 High組、Low組，采用Kaplan-Meier 法計算 5 年總生存率、無復發(fā)生存率，Log-rank 檢驗進行單因素分析。結(jié)果顯示：VISTA低表達組（Low組）的 5年總生存率均明顯高于高表達組（High組）（P＜0.05）（圖 2A-B）；而兩組間的無復發(fā)生存率無統(tǒng)計學差異（P>0.05，圖 2C-D）。
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 陳萬青;鄒小農(nóng);張思維;;中國肝癌死亡率地理分布分析[J];實用腫瘤學雜志;2008年03期

本文編號：2664892