【摘要】：第一部分:循環(huán)非編碼RNAs與乳頭狀甲狀腺癌肺轉(zhuǎn)移灶碘-131攝取功能及預(yù)后的相關(guān)性研究研究目的最新研究表明:循環(huán)長(zhǎng)鏈非編碼Lnc RNAs(Long non-coding RNAs:Lnc RNAs)作為一種簡(jiǎn)單有效、非侵襲性的生物標(biāo)志物在鑒別診斷良惡性腫瘤、預(yù)測(cè)惡性腫瘤轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)、評(píng)估腫瘤治療療效及預(yù)后等方面具有重要臨床價(jià)值。然而與乳頭狀甲狀腺癌(Papillary thyroid carcinoma:PTC)肺轉(zhuǎn)移碘-131(~(131)I)攝取及預(yù)后相關(guān)的生物標(biāo)志物研究至今仍未見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)篩選和驗(yàn)證PTC肺轉(zhuǎn)移灶~(131)I攝取陽(yáng)性組及~(131)I攝取陰性組血漿差異表達(dá)Lnc RNAs,以評(píng)價(jià)循環(huán)Lnc RNAs預(yù)測(cè)PTC肺轉(zhuǎn)移灶~(131)I攝取功能及預(yù)后的臨床價(jià)值。研究方法本研究收集在我科行~(131)I治療的204例PTC肺轉(zhuǎn)移患者血漿作為研究對(duì)象;依據(jù)PTC肺轉(zhuǎn)移灶是否具有~(131)I攝取功能分為兩組:~(131)I攝取陽(yáng)性組和~(131)I攝取陰性組;首先通過(guò)配對(duì)法選取~(131)I攝取陽(yáng)性組和~(131)I攝取陰性組患者血漿各5例;利用Aaystar Lnc RNA芯片3.0檢測(cè)兩組血漿中Lnc RNAs的表達(dá)譜差異,并對(duì)差異表達(dá)Lnc RNAs進(jìn)行聚類(lèi)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析;然后,通過(guò)實(shí)時(shí)定量熒光PCR(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,q RT-PCR)法在剩余患者血漿樣本中對(duì)差異表達(dá)Lnc RNAs進(jìn)行驗(yàn)證,以發(fā)現(xiàn)最有價(jià)值的Lnc RNAs;最后,利用Kaplan Meier法分析循環(huán)Lnc RNAs作為循環(huán)腫瘤標(biāo)志物評(píng)價(jià)PTC肺轉(zhuǎn)移患者預(yù)后的臨床價(jià)值。研究結(jié)果基因芯片分析發(fā)現(xiàn):相比于肺轉(zhuǎn)移灶~(131)I攝取陽(yáng)性組,在~(131)I攝取陰組血漿中,共有1006種Lnc RNAs表達(dá)上調(diào),705種Lnc RNAs表達(dá)下調(diào)(P0.05和差異倍數(shù)2倍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義);隨后,通過(guò)q RT-PCR對(duì)芯片結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)Lnc RNAs(ENST00000462717和ENST00000415582)在~(131)I攝取陰性組患者血漿中的表達(dá)明顯上調(diào),而Lnc RNAs(TCONS_00024700和NR_028494)在~(131)I攝取陰性組中的表達(dá)明顯下調(diào)(P0.05)。采用受試者工作特征(Receiver operating characteristic:ROC)曲線分析顯示:Lnc RNAs(ENST00000462717、ENST000004155824 TCONS_00024700和NR_028494)預(yù)測(cè)PTC肺轉(zhuǎn)移灶~(131)I攝取陰性組的敏感性和特異性的最佳切點(diǎn)分別是432、328、34和42;曲線下面積(Area under the curve:AUC)分別是0.890、0.936、0.975和0.918。生存分析顯示:高表達(dá)Lnc RNAs(ENST00000462717和ENST00000415582)的PTC肺轉(zhuǎn)移患者10年生存率較差,而高表達(dá)Lnc RNAs(TCONS_00024700和NR_028494)的PTC肺轉(zhuǎn)移患者10年生存率相對(duì)較好(P0.001)。研究結(jié)論本研究結(jié)果提示,循環(huán)Lnc RNAs ENST00000462717、ENST00000415582、TCONS_00024700和NR_028494可作為簡(jiǎn)單有效、非侵襲性血漿腫瘤標(biāo)志物預(yù)測(cè)PTC肺轉(zhuǎn)移灶~(131)I攝取功能及患者預(yù)后,對(duì)于指導(dǎo)DTC術(shù)后碘-131治療具有潛在臨床價(jià)值和應(yīng)用前景。Lnc RNAs作為穩(wěn)定的PTC血漿腫瘤標(biāo)志物的臨床價(jià)值還需前瞻性大樣本臨床試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。第二部分:CTC與分化型甲狀腺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、碘-131難治性狀態(tài)及預(yù)后的相關(guān)性研究研究目的循環(huán)腫瘤細(xì)胞(Circulating tumor cell:CTC)作為一種全新的腫瘤標(biāo)志物已在多種腫瘤的輔助診斷、術(shù)后隨訪、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)、微轉(zhuǎn)移灶的早期發(fā)現(xiàn)、療效及預(yù)后評(píng)估、個(gè)體化診療等方面已開(kāi)展廣泛的臨床研究。然而,傳統(tǒng)的陽(yáng)性富集法(Cell Search系統(tǒng))檢測(cè)DTC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者外周血CTC的敏感性較低;本研究使用陰性富集法檢測(cè)DTC患者的外周血CTC數(shù)目,并探討CTC數(shù)目與DTC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性。研究方法本研究共納入了72例DTC患者;抽血前所有入組患者均未行~(131)I治療;抽取DTC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者外周血7.5ml用于CTC的檢測(cè);使用免疫磁珠陰性富集法聯(lián)合免疫熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè)CTC的數(shù)目。腫瘤細(xì)胞的判定標(biāo)準(zhǔn):檢測(cè)惡性腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核數(shù)目異�；驒z測(cè)到上皮粘附因子(Epithelial cell adhesion molecule:Ep CAM)。研究結(jié)果在72例DTC患者中,可檢測(cè)出CTC者62例(86.11%),共檢出CTC數(shù)目527個(gè)。受試者工作特征(Receiver operating characteristic:ROC)曲線顯示:診斷DTC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的CTC最佳切點(diǎn)數(shù)目為4.5,此時(shí)的敏感性為64.3%,特異性為83.8%,AUC為0.789,95%置信區(qū)間(CI)為:0.685 0.893。伴遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的DTC患者檢出CTC的平均數(shù)目明顯高于不伴遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的DTC患者和正常對(duì)照組者。不伴遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移DTC患者檢出CTC平均數(shù)明顯高于正常對(duì)照組(P=0.0016、P0.001和P0.001)。單因素及多因素分析顯示:預(yù)測(cè)DTC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的最佳切點(diǎn)值為CTC數(shù)目≥5。ROC曲線顯示:診斷~(131)I難治性分化型甲狀腺癌(Radioiodine-refractory differentiated thyroid cancer:RR-DTC)的CTC最佳切點(diǎn)數(shù)目為6.5,此時(shí)的敏感性為73.7%%,特異性為69.6%,AUC為0.781,95%CI為:0.635 0.928。單因素及多因素分析顯示:CTC預(yù)測(cè)RR-DTC的最佳切點(diǎn)值為CTC數(shù)目≥7。生存分析顯示:當(dāng)CTC數(shù)目≥7時(shí),DTC患者的無(wú)進(jìn)展生存期(Progression-free survival:PFS)明顯縮短;Cox’s風(fēng)險(xiǎn)模型分析顯示:CTC數(shù)目≥7可作為獨(dú)立預(yù)后因子預(yù)測(cè)DTC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的預(yù)后。研究結(jié)論本研究結(jié)果提示,CTC數(shù)目≥5與DTC患者的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移存在明顯相關(guān)性,CTC數(shù)目≥7與DTC患者出現(xiàn)~(131)I難治性狀態(tài)及預(yù)后存在明顯相關(guān)性。CTC檢測(cè)用于指導(dǎo)DTC術(shù)后~(131)I治療及評(píng)估相預(yù)后具有潛在臨床價(jià)值和應(yīng)用前景,后續(xù)的前瞻性大樣本多中心臨床研究有利于進(jìn)一步驗(yàn)證本研究結(jié)果。
【圖文】：

聚類(lèi)分析

散點(diǎn)圖：左側(cè)紅點(diǎn)代表不攝取131I組上調(diào)＞2倍，，右側(cè)紅點(diǎn)代表在攝取131I組上調(diào)
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R736.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 楊雷;鄭榮壽;王寧;張思維;陳萬(wàn)青;;2010年中國(guó)甲狀腺癌發(fā)病與死亡情況[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2014年08期

2 李燕;陶敏;馬德亮;李艷;陸海林;榮楓;蔡蔚;寧志強(qiáng);劉海燕;;用膜濾過(guò)聯(lián)合激光掃描細(xì)胞儀檢測(cè)惡性腫瘤患者循環(huán)腫瘤細(xì)胞[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年01期

本文編號(hào)：2662731