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c-Myc-RPS7通路促進前列腺癌進展的機制探索

發(fā)布時間:2020-05-09 18:53
【摘要】:目的探討RPS7在前列腺癌組織中的表達及臨床意義,揭示探討c-Myc通過調(diào)節(jié)RPS7對前列腺癌細胞增殖的影響及其分子機制,明確RPS7通過EMT對前列腺癌PC3細胞侵襲效應(yīng)的影響,并揭示其分子機制。方法運用RT-q PCR實驗檢測RPS7在119例前列腺癌組織及96例前列腺增生組織中的m RNA表達情況,并通過Wetern blot實驗驗證,隨后,揭示RPS7異常表達與前列腺癌患者臨床病例資料的相關(guān)性。通過RPS7特異性的sh RNA轉(zhuǎn)染入前列腺癌PC3細胞,構(gòu)建RPS7穩(wěn)定低表達的PC3細胞,然后運用MTT檢測及細胞計數(shù)方法揭示RPS7異常表達對前列腺癌細胞增殖的影響,并將所得的體外實驗結(jié)果行體內(nèi)驗證,運用生物信息學(xué)技術(shù)分析尋找調(diào)節(jié)RPS7異常表達的可能的轉(zhuǎn)錄因子,并通過熒光素酶報告基因?qū)嶒灱癈HIP實驗進行驗證,RT-q PCR及Western blot技術(shù)用于檢測不同基因m RNA及蛋白的表達水平。運用RPS7特異性si RNA轉(zhuǎn)染入前列腺癌PC3細胞,構(gòu)建RPS7穩(wěn)定低表達的前列腺癌細胞,然后運用Transwell檢測細胞的侵襲效應(yīng),運用RT-q PCR及Western blot方法計算檢測不同基因的m RNA及蛋白表達水平。結(jié)果與前列腺增生組織相比較,RPS7在前列腺癌中顯著高表達,且RPS7高表達與前列腺癌患者高血清PSA、高臨床分期、高病理分級及周圍神經(jīng)血管浸潤密切相關(guān),此外,RPS7異常表達與患者年齡、淋巴結(jié)陽性、切緣陽性等沒有明顯的相關(guān)性,此外,RPS7高表達與前列腺癌的不良預(yù)后密切相關(guān)。PS7低表達可顯著抑制前列腺癌細胞PC3的體內(nèi)外增殖,且在RPS7轉(zhuǎn)錄起始位點前存在c-Myc蛋白可能結(jié)合的E-box盒序列,熒光素酶報告基因?qū)嶒灱癈HIP實驗表明c-Myc可直接結(jié)合轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)RPS7的表達。RPS7低表達可顯著抑制前列腺癌PC3細胞的體外侵襲,RPS7低表達可顯著促進上皮細胞標志物E-cadherin,而間充質(zhì)細胞標志物N-cadherin及Vimentin.的表達顯著降低。結(jié)論我們認為RPS7高表達與前列腺癌不良預(yù)后密切相關(guān),c-Myc可通過RPS7通路促進前列腺癌細胞增殖,RPS7可通過EMT通路促進前列腺癌細胞的侵襲,抑制c-Myc-RPS7通路可能是治療前列腺癌可行的診療新策略。
【圖文】:

前列腺增生,腺癌,蛋白


RPS7mRNA在前列腺癌及前列腺增生組織中的表達

前列腺增生,腺癌,蛋白


RPS7蛋白在前列腺癌及前列腺增生組織中的表達
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R737.25

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 李曉建;潘東亮;李寧忱;劉思金;;重金屬暴露與前列腺癌發(fā)生和進展的關(guān)系綜述[J];環(huán)境化學(xué);2014年10期

2 韓蘇軍;張思維;陳萬青;李長嶺;;中國前列腺癌發(fā)病現(xiàn)狀和流行趨勢分析[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2013年04期

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本文編號:2656579

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