【摘要】：腫瘤壞死因子α(TNFαα)是多效應(yīng)的細胞因子,在機體免疫防御、組織損傷以及癌癥發(fā)生等過程中具有重要作用。通過誘導(dǎo)不同的信號復(fù)合體,TNFα可以啟動截然不同的細胞應(yīng)答:介導(dǎo)NF-κB激活從而抑制凋亡、促進炎癥發(fā)生;亦或誘導(dǎo)細胞發(fā)生程序性死亡(包括凋亡及壞死)。而RIP1作為TNFα信號網(wǎng)絡(luò)的核心效應(yīng)蛋白,在決定細胞命運中起到了“分子開關(guān)”的作用:K63泛素鏈修飾的RIP1可作為信號平臺激活NF-κB信號通路;而RIP1的激酶激活可誘導(dǎo)細胞發(fā)生凋亡及壞死。然而,RIPI是如何在兩個截然相反的細胞命運中做出選擇的分子機制還有待進一步闡明。本研究中,我們利用質(zhì)譜技術(shù)進行篩選,發(fā)現(xiàn)了一個全新的RIP1結(jié)合蛋白——HSPA13(heat shock protein family A member 13)。在HT29細胞系、Jurkat細胞系中,敲除HSPA13顯著降低TNFα介導(dǎo)的NF-κB激活,而在此基礎(chǔ)上回補HSPA13則可以重塑NF-κB的響應(yīng)。另一方面,HSPA13的缺失明顯增加了細胞對凋亡以及程序性壞死的敏感性。同時,HSPA13促進炎癥響應(yīng),維持細胞存活的功能也在斑馬魚模型中得到了證實。進一步的機制研究發(fā)現(xiàn),HSPA13是TNFR1活化后招募的調(diào)控蛋白,可以選擇性結(jié)合TNFR1和RIP1,并促進RIP1在復(fù)合體Ⅰ中的K63泛素鏈修飾,進而增強復(fù)合體Ⅰ的穩(wěn)定性;同時HSPA13可以抑制RIP1從復(fù)合體Ⅰ中脫離,阻斷RIP1的胞質(zhì)活化以及復(fù)合體Ⅱa/b的組裝。另外,HSPA13不影響RIP1非依賴的NF-κB及凋亡響應(yīng),同時也不參與調(diào)節(jié)IL-1β誘導(dǎo)的NF-κB激活。這些結(jié)果表明HSPA13能夠特異性地調(diào)節(jié)TNFR1和RIP1介導(dǎo)的TNFα信號激活。綜上所述,本研究揭示了HSPA13作為復(fù)合體Ⅰ中關(guān)鍵蛋白特異性地調(diào)控TNFα信號的具體機制。HSPA13通過上調(diào)NF-κB信號和同時抑制程序性死亡,在體內(nèi)以及體外都具有促進存活以及炎癥響應(yīng)的功能。
【圖文】：

代的重要作用。而ＴＮＦａ發(fā)揮功能多效性的分子基礎(chǔ)是其能夠在細胞內(nèi)誘導(dǎo)形成不逡逑同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合體，包括復(fù)合體Ｉ和復(fù)合體ｎａ／ｂ［７＇８］。逡逑如圖１．２所示，ＴＮＦＲ１與ＴＮＦａ結(jié)合后，寡聚形成同源三聚體，進而引起胞內(nèi)結(jié)逡逑構(gòu)域的構(gòu)象變化，暴露出其死亡結(jié)構(gòu)域（Ｄｅａｔｈ邋Ｄｏｍａｉｎ，邋ＤＤ），并迅速招募到第逡逑一個接頭蛋白邐ＴＲＡＤＤ邋（ＴＮＦＲ１－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ邋ｄｅａｔｈ邋ｄｏｍａｉｎ邋ｐｒｏｔｅｉｎ）【９］。隨后逡逑ＴＲＡＤＤ作為構(gòu)架蛋白，，招募到更多的信號分子，包括ＲＩＰ邋１邋（邋ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ逡逑ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｋｉｎａｓｅ）邋［１０］、ＴＲＡＦ２／５邋（ＴＮＦ邋ｒｅｃｅｐｔｏｒ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ邋ｆａｃｔｏｒ邋２）邋［１１］，在細胞膜內(nèi)逡逑膜月旨筏結(jié)構(gòu)上組裝形成復(fù)合體Ｉ邋（ｍｅｍｂｒａｎｅ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ邋ｃｏｍｐｌｅｘ邋Ｉ）。其中，ＴＲＡＦ２逡逑具有一個ＲＩＮＧ邋（ｒｅａｌｌｙ邋ｉｎｔｅｒｅｓｔｉｎｇ邋ｎｅｗ邋ｇｅｎｅ）結(jié)構(gòu)域，是一個Ｅ３泛素連接酶，它可逡逑以招募ｃＩＡＰｌ／２邋（ｃｅｌｌｕｌａｒ邋ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ邋ｏｆ邋ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）。ｃＩＡＰ邋１／２邋同樣也是Ｅ３泛素連接酶，逡逑靜息狀態(tài)下會發(fā)生自我泛素化，形成Ｋ４８多聚泛素鏈修飾，進而被蛋白酶體識別并逡逑降解。但在ＴＮＦａ刺激下ＴＲＡＦ２催化ｃＩＡＰ邋１／２分子內(nèi)部的ＲＩＮＧ結(jié)構(gòu)域發(fā)生泛素化修逡逑飾

ＮＦ－ｋＢ邋ｎｕｃｌｅａｒ邋ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ邐ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ逡逑圖１．２邋ＴＮＦｏｃ誘導(dǎo)復(fù)合體Ｉ組裝示意圖逡逑１．２．２復(fù)合體Ｉｌａ逡逑根據(jù)細胞所處內(nèi)外環(huán)境的不同，長時間的ＴＮＦｏｃ處理，導(dǎo)致復(fù)合體Ｉ解離，逡逑ＴＲＡＤＤ、ＲＩＰ１、ＴＲＡＦ２等從細胞膜上脫落，進入細胞質(zhì)。其中ＴＲＡＤＤ和ＲＩＰ１逡逑進一步招募邋ＦＡＤＤ邋（Ｆａｓ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ邋ｄｅａｔｈ邋ｄｏｍａｉｎ邋ｐｒｏｔｅｉｎ）、ｐｒｏｅａｓｐａｓｅ－８，起始組裝逡逑復(fù)合體Ｉｌａ，也叫死亡引發(fā)信號復(fù)合體（ｄｅａｔｈ邋ｉｎｉｔｉａｔｉｎｇ邋ｓｉｇｎａｌｉｎｇ邋ｃｏｍｐｌｅｘ，邋ＤＩＳＣ）逡逑［１９－２Ｑ］。而這過程中，無活性的ｃａｓｐａｓｅ－８前體被切割活化，從而促使細胞發(fā)生凋亡。逡逑但是細胞內(nèi)存在ｃａｓｐａｓｅ－８無催化活性的類似物——ｃ－ＦＬＩＰ邋（ｃｅｌｌｕｌａｒ邋ＦＬＩＣ邋Ｅ－ｌｉｋｅ逡逑ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ邋ｐｒｏｔｅｉｎ），該蛋白可以競爭進入復(fù)合體Ｉｌａ從而抑制ｃａｓｐａｓｅ－８的活化［２１］。逡逑值得注意的是，復(fù)合體Ｉｌａ誘導(dǎo)的細胞凋亡依賴于ＲＩＰ１的激酶活性，抑制劑處理逡逑或者激酶活性缺失突變都會影響ＲＩＰ１介導(dǎo)的凋亡［２２］
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R730.2

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 徐亮亮;瞿玉興;;NF-κB在膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎治療中的應(yīng)用研究進展[J];按摩與康復(fù)醫(yī)學(xué);2015年12期

2 顏嬋;毛建軍;王曉榮;謝梅茂;趙雁;胡映秋;;NF-κB和EGFR在前列腺癌中的表達及臨床意義[J];江西醫(yī)藥;2016年12期

3 魏會麗;王瑩;孫瑞紅;;硼替佐米對人臍動脈血管平滑肌細胞NF-κB的影響[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2017年01期

4 伍莉;謝玉桃;;NF-κB對非酒精性脂肪性肝病發(fā)病過程的影響[J];中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2017年04期

5 李楊;張靖巖;佟立權(quán);張峰;;NF-κB與肝臟缺血再灌注損傷的研究進展[J];中國現(xiàn)代普通外科進展;2017年04期

6 趙遠琴;趙丹;張湘燕;;NF-κB、HIF-1α及其在阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征中的研究進展[J];貴州醫(yī)藥;2017年06期

7 包立豪;房林;;NF-κB信號通路在乳腺癌發(fā)生及發(fā)展中作用的研究進展[J];同濟大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2017年03期

8 楊曉曉;黃虹婷;劉滿華;黃鶯;;NF-κB參與調(diào)控細胞凋亡[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2017年10期

9 王芳;任剛;潘玲玲;熊友愛;趙海平;楊明;;紫菀酮基于NF-κB信號通路的體外抗炎機制研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2016年04期

10 江閏德;宋春麗;鄧飛;;二冬膏抗NF-κB抑制介導(dǎo)的人肺癌細胞效應(yīng)探討[J];中國實驗方劑學(xué)雜志;2016年08期

相關(guān)會議論文 前10條

1 孫寶柱;陳琳;吳琦;王煥亮;魏欣冰;相妍笑;張岫美;;氟比洛芬通過NF-κB信號通路抑制大鼠局灶性腦缺血再灌注后的炎癥反應(yīng)[A];中國中西醫(yī)結(jié)合麻醉學(xué)會[CSIA]年會暨第二屆全國中西醫(yī)結(jié)合麻醉學(xué)術(shù)研討會、江蘇省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會麻醉專業(yè)委員會成立大會論文匯編[C];2015年

2 樸春麗;于淼;姜U

本文編號：2654636