發(fā)布時間：2020-04-20 17:14

【摘要】：肝細胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC),是一種惡性程度高、治愈率低、預后差的惡性腫瘤,其死亡率位于我國所有惡性腫瘤死亡率的第二位。如何抑制HCC的復發(fā)和轉(zhuǎn)移以提高患者生存期成為國內(nèi)外研究的熱點。近年來,隨著對腫瘤研究的不斷深入,代謝重編程成為新興的腫瘤特征性標志。甘氨酸脫羧酶(Glycine decarboxylase,GLDC)作為一種氧化還原酶,在腫瘤氨基酸代謝過程中發(fā)揮重要作用。在非小細胞肺癌中,GLDC可促進腫瘤起始及增殖;但在胃癌中,GLDC作為抑癌基因可抑制胃癌細胞增殖及轉(zhuǎn)移。在HCC中GLDC的作用尚無相關報道。本研究首先通過基因芯片對3種不同轉(zhuǎn)移潛能HCC細胞進行檢測分析發(fā)現(xiàn),隨著HCC細胞轉(zhuǎn)移能力增強GLDC表達量逐漸降低。其次,通過對HCC癌組織及癌旁組織標本進行實時定量聚合酶鏈式反應、Western blot及免疫組化檢測和臨床病理數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn),HCC腫瘤組織中GLDC表達量明顯低于相應癌旁組織;腫瘤組織中GLDC低表達與巨塊型腫瘤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、較高的BCLC分期及TNM分期級別相關;GLDC低表達患者預后較差;GLDC表達量可作為指示HCC患者預后的獨立危險因素。接著,通過構(gòu)建GLDC降表達及過表達穩(wěn)定細胞系,采用Transwell實驗、劃痕實驗及趨化實驗和裸鼠肝原位HCC成瘤肝內(nèi)轉(zhuǎn)移模型實驗發(fā)現(xiàn)GLDC可抑制HCC細胞在體內(nèi)、外的侵襲及轉(zhuǎn)移能力。隨后,通過對細胞骨架的研究發(fā)現(xiàn)GLDC可通過抑制Slingshot homolog 1(SSH1)-cofilin通路影響細胞骨架重塑,抑制細胞偽足生成,從而抑制HCC細胞轉(zhuǎn)移。另一方面,通過對細胞內(nèi)氧化還原水平的檢測,發(fā)現(xiàn)GLDC可通過降低細胞內(nèi)活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平來升高還原型與氧化型谷胱甘肽比例,促進cofilin通過泛素-蛋白酶體途徑降解,進而抑制HCC細胞發(fā)生轉(zhuǎn)移。綜上所述,本研究揭示了GLDC作為潛在的抑癌基因,在HCC細胞中通過抑制SSH1-cofilin通路且通過抑制ROS促進cofilin泛素化降解的方式影響細胞骨架重塑,阻止細胞偽足生成,最終抑制HCC細胞發(fā)生轉(zhuǎn)移的機制,為抗HCC轉(zhuǎn)移治療提供了新思路及理論依據(jù)。
【圖文】：

12圖 1.GLDC 在三種肝癌細胞系中表達情況RNA 基因芯片檢測 16 種甘氨酸代謝酶 mRNA 表達量聚類分析熱圖；B.-PCR 驗證 GLDC 在三種細胞系中表達情況與基因芯片結(jié)果對比（**P005）。.2 多種肝癌細胞系中 GLDC 表達情況為進一步研究 GLDC 在肝癌細胞系中的表達情況，我們運用 qRT-PCstern blot 技術分別檢測了 GLDC 的 mRNA 和蛋白在 Huh7、PLC、BEL-7p3B、HepG2、MHCC97L、MHCC97H 及 HCCLM3 肝癌細胞系中的表達 2）。

13圖 2.肝癌細胞系中 GLDC 表達情況A.肝癌細胞系中 GLDC mRNA 表達情況；B.肝癌細胞系中 GLDC 蛋白表達情況。1.3 討論隨著科學的發(fā)展和認識的提高，“精準醫(yī)學”的概念嶄露頭角，并在臨床實踐中得以應用。美國國立癌癥研究院描述的腫瘤精準醫(yī)學指基于高通量分子技術獲得腫瘤分子圖譜和分類并指導腫瘤治療的醫(yī)學模式，這是未來腫瘤治療的發(fā)展方向[15]。每個人的基因都是獨特，即使是同樣分型分期的腫瘤患者所攜帶的腫瘤基因譜也不完全相同，每位腫瘤患者的治療策略也不盡相同。目前，針對腫瘤特異基因型的靶向治療是“精準醫(yī)學”的一個體現(xiàn)，通過檢測腫瘤患者的基因分型，并且在綜合考慮患者各項特征的基礎上，針對患者個體性差異制定最佳
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.7

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 A.Ben—Zeév;汪X仁;;腫瘤細胞內(nèi)的細胞骨架[J];細胞生物學雜志;1987年03期

2 A.Ben-Ze'ev;汪X仁;;腫瘤細胞內(nèi)的細胞骨架(續(xù))[J];細胞生物學雜志;1987年04期

3 陳衛(wèi)三,姚開泰;Hela細胞的熱療動力學研究[J];湖南醫(yī)學院學報;1988年02期

4 黃濤生;董燕麟;;細胞的生長與癌變[J];國外醫(yī)學.臨床生物化學與檢驗學分冊;1988年05期

5 王琦,張丕方;斑葉海棠薄層培養(yǎng)中細胞無絲分裂及2,4-D的特殊效應的研究[J];西北植物學報;1989年01期

6 楊立英;;細胞骨架研究 數(shù)據(jù)聚焦分析[J];科學觀察;2007年05期

7 陳吉龍，王平;淋巴細胞骨架的研究[J];動物學雜志;1994年05期

8 周青山;丁明孝;王曉;陳利華;翟中和;門紹杰;徐偉;;應用電鏡研究病毒與細胞骨架關系的幾種簡單方法[J];電子顯微學報;1986年02期

9 劉婭利;陳曉明;;細胞骨架作用劑抗青光眼的研究進展[J];眼科研究;2007年03期

10 趙泳根;;《細胞骨架》[J];生命科學;1993年05期

相關會議論文 前10條

1 趙紅斌;張西正;吳金輝;郭勇;毛艷;;不同應變對骨髓間充質(zhì)干細胞系細胞骨架影響的研究[A];天津市生物醫(yī)學工程學會2006年學術年會論文摘要集[C];2006年

2 訾曉淵;;《細胞骨架》講課評比 授課內(nèi)容:細胞骨架-概述[A];中國細胞生物學學會第十屆全體會員代表大會暨第十二次學術大會論文集[C];2011年

3 張曉光;惠延年;韓泉洪;侯旭;黃曉峰;馬吉獻;;結(jié)合磁珠與否機械牽拉模型下培養(yǎng)人RPE細胞牽拉模型中細胞骨架的變化[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術大會論文匯編[C];2007年

4 徐進;;細胞骨架相關的微囊藻毒素毒性機理研究[A];浙江省毒理學會第二屆學術年會論文集[C];2015年

5 王伯初;楊興艷;時蘭春;;共聚焦顯微鏡下單細胞可控機械力加載方法的研究[A];第十屆全國生物力學學術會議暨第十二屆全國生物流變學學術會議論文摘要匯編[C];2012年

6 高霞;徐虹;劉海梅;饒佳;查錫良;;血管生成素樣蛋白3對足細胞骨架重排影響的可能信號通路分析[A];中華醫(yī)學會第十五次全國兒科學術大會論文匯編（上冊）[C];2010年

7 鄭楷;王一飛;;細胞骨架調(diào)控蛋白LASP-1在單純皰疹病毒感染中的作用[A];廣東省生物物理學會2013年學術研討會論文集[C];2013年

8 葉秀麟;徐是雄;王凌健;;利用GFP基因研究細胞骨架在植物活體細胞的新進展[A];中國植物學會七十周年年會論文摘要匯編（1933—2003）[C];2003年

9 張曉蕓;崔曉棟;官秀梅;李宏;成敏;;穩(wěn)定細胞骨架對EPCs功能的影響[A];中國生理學會第九屆全國青年生理學工作者學術會議論文摘要[C];2011年

10 王佐好;禹永春;崔藝峰;李林;郭慧淑;李在硫;許文燮;;細胞骨架在低滲牽張增加毒蕈堿電流中的作用[A];中國生理學會第21屆全國代表大會暨學術會議論文摘要匯編[C];2002年

相關博士學位論文 前10條

1 耿鋒;Mdig調(diào)控非小細胞肺癌轉(zhuǎn)移和增殖的分子機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2018年

2 付琛穎;EWI-2對腫瘤細胞運動性、粘附性以及間葉樣細胞向阿米巴樣細胞轉(zhuǎn)換的影響[D];南方醫(yī)科大學;2013年

3 莊昊;GLDC調(diào)控cofilin泛素化影響肝細胞癌轉(zhuǎn)移及預后[D];天津醫(yī)科大學;2018年

4 趙焱鋼;ERα在雌激素調(diào)節(jié)海馬actin細胞骨架重塑與學習記憶中作用與機制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學;2017年

5 王喜明;MicroRNA-145靶向Racl加重H9c2細胞缺氧損傷機制的研究[D];鄭州大學;2018年

6 王春楊;人前列腺癌相關基因UROC28功能的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學;2004年

7 何建英;hNaDC3對腎小管上皮細胞能量代謝和凋亡的影響以及AngⅡ的調(diào)控作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2004年

8 楊國嶸;體內(nèi)外HCMV感染對宿主細胞表型的影響及其機制[D];第四軍醫(yī)大學;2004年

9 周建平;MIN6細胞分泌過程的形態(tài)學研究[D];中國醫(yī)科大學;2004年

10 劉洪瑞;濱蒿內(nèi)酯抗腫瘤作用及機制的研究[D];中國醫(yī)科大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 于麗光;谷氨酰胺和谷氨酸對小鼠成纖維細胞和人宮頸腺癌細胞差異代謝產(chǎn)物的研究[D];江南大學;2018年

2 李娜;艾司西酞普蘭對MPTP處理的PC12細胞的保護作用及機制[D];河北醫(yī)科大學;2018年

3 蘇雷;STGC3高表達對CNE2細胞放療敏感性的影響[D];南華大學;2018年

4 陳思;糖原合成酶激酶3β（GSK3β）活性變化及細胞骨架重構(gòu)在甲基苯丙胺毒性作用的機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2018年

5 蔡先志;擬南芥中ROP信號調(diào)控花瓣錐形細胞形態(tài)建成的初步研究[D];福建農(nóng)林大學;2018年

6 莊睿娟;冷休克蛋白RBM3對魚藤酮誘導的PD細胞模型的保護作用及機制研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2018年

7 白艷林;Abl激酶抑制劑STI-571可通過PTEN-PI3K/AKT信號途徑影響A375細胞的增殖和凋亡[D];吉林大學;2018年

8 劉杰;抗壞血酸碳點跨MC3T3細胞膜轉(zhuǎn)運的途徑和胞內(nèi)分布的研究[D];吉林大學;2018年

9 湯兵;多吡啶釕(Ⅱ)、銥(Ⅲ)配合物合成及長循環(huán)制劑抗腫瘤活性研究[D];廣東藥科大學;2018年

10 王依;NHE1通過p38MAPK信號通路調(diào)節(jié)人肺癌A549細胞的侵襲轉(zhuǎn)移及其機制[D];廣東藥科大學;2018年

，

本文編號：2634757