【摘要】：研究目的:1、研究組胺信號通路相關(guān)分子-組氨酸脫羧酶(HDC)和組胺受體分子在前列腺癌中表達(dá)情況及意義;2、研究組胺H3受體(H3R)對前列腺癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和凋亡的影響及機(jī)制。研究方法:1、應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測前列腺癌組織以及正常前列腺組織組氨酸脫羧酶表達(dá)水平;2、運(yùn)用RT-PCR及western blot檢測組氨酸脫羧酶和組胺受體在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá);3、應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測前列腺癌組織和正常前列腺組織H3R的表達(dá)情況;4、使用特異性H3R的激動(dòng)劑、拮抗劑來調(diào)節(jié)H3R的功能或者構(gòu)建干擾組胺H3受體表達(dá)的載體,通過瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法在內(nèi)源性H3R高表達(dá)的細(xì)胞株下調(diào)H3R的表達(dá);5、進(jìn)行體外侵襲實(shí)驗(yàn)和遷移實(shí)驗(yàn),檢測H3R對前列腺癌細(xì)胞侵襲力和遷移力的影響;6、利用CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測H3R對前列腺癌細(xì)胞增殖的影響;7、利用流式細(xì)胞技術(shù),采取細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測H3R對前列腺癌細(xì)胞凋亡的影響;8、利用western blot檢測抑制H3R后凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)情況和下游可能發(fā)生變化的蛋白情況;9、通過裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)觀察H3R對前列腺癌細(xì)胞成瘤能力的影響。研究結(jié)果:1、免疫組織化學(xué)染色結(jié)果表明,前列腺癌組織中的組氨酸脫羧酶染色的強(qiáng)度明顯高于正常的前列腺組織(P0.05);2、m RNA和蛋白水平檢測結(jié)果提示,前列腺癌細(xì)胞株(PC-3、LNCa P、22RV1及C4-2)組氨酸脫羧酶和4種組胺受體的表達(dá)水平同樣明顯高于對照細(xì)胞株RWPE-1,其中以H3R升高最顯著(P0.05);3、免疫組化結(jié)果顯示前列腺癌組織中H3R染色強(qiáng)度明顯高于正常前列腺組織,Gleason評分高的組織比Gleason評分低的組織升高更顯著(P0.05);4、體外遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)表明干擾H3R的功能之后,前列腺癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力均下降;5、體外細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)表明,干擾H3R的功能之后,前列腺癌細(xì)胞的增殖能力明顯下降(P0.05);6、流式檢查結(jié)果顯示,干擾H3R的功能之后,前列腺癌細(xì)胞的凋亡明顯增強(qiáng);7、Western blot檢測發(fā)現(xiàn),干擾H3R的功能之后,凋亡相關(guān)蛋白BAX明顯增加,抗凋亡蛋白BCL2明顯降低,AR表達(dá)明顯降低;8、裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)顯示,干擾H3R的功能之后,前列腺癌細(xì)胞的成瘤能力及腫瘤生長能力明顯降低(P0.05)。結(jié)論:1、前列腺癌中HDC和4種組胺受體表達(dá)明顯上調(diào)(P0.05);2、調(diào)節(jié)組胺受體H3R可影響雄激素受體AR的表達(dá);3、組胺受體H3R信號通路對前列腺癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和凋亡有重要影響。綜上,H3R在前列腺癌中可能起到促癌的作用,因此干擾前列腺癌中H3R的功能可能成為一種新的治療策略。
【圖文】：

表 1 芯片中不同前列腺組織的 HDC 蛋白陽性表達(dá)。Table 1 HDC protein expression of different prostate tissues in the chip.前列腺病理 HDC 表達(dá) 差異性- + ++ +++前列腺癌(n=39)0 11 16 12P<0.01正常前列腺組織(n=8)5 3 0 0

33圖2 組胺受體基因HRH1-4和HDC在RWPE-1、PC-3、LNCaP、22RV1細(xì)胞系RNA和蛋白（protein）水平的表達(dá)情況（＊P<0.05，＊＊P<0.01）。Fig.2 Expression of histamine receptor genes HRH1-4 and HDC in RWPE-1, PC-3, LNCaP,22RV1 cell lines in RNA and protein levels (＊P <0.05,＊＊P <0.01).討論組胺和組胺受體廣泛分布于人體組織中，，像肺、胃腸道和皮膚等，并且參與各種生理和病理過程，如皮膚過敏反應(yīng)，各種胃腸道反應(yīng)，膿毒癥和神經(jīng)傳遞。早期研究發(fā)現(xiàn)組胺在腫瘤的形成和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，許多研究認(rèn)為組胺會(huì)促進(jìn)腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移[15]。通過統(tǒng)計(jì)多個(gè)數(shù)據(jù)庫，也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)組胺受體基因和腫瘤存在相關(guān)性[16]。由于組胺受體拮抗劑可以阻斷組胺的作用，而組胺受體拮抗劑已經(jīng)長時(shí)間用于臨床治療多種疾病，像 H1 受體拮抗劑用于治療過敏
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.25

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 馮帆;龍隆;李微;王莉莉;;應(yīng)用高內(nèi)涵分析技術(shù)識別雄激素受體激動(dòng)劑[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2014年01期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 李方龍;基于前列腺特異性抗原及其相關(guān)參數(shù)建立前列腺癌篩查模型的初步研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

本文編號：2634831