【摘要】：目的初步探討腎型谷氨酰胺酶(Kidney-type glutaminase,GLS1)對(duì)肝細(xì)胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)生物學(xué)功能及血管生成擬態(tài)(Vasculogenic mimicry,VM)的影響。方法通過細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)及侵襲實(shí)驗(yàn)探討GLS1對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞系生物學(xué)功能的影響,應(yīng)用三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)觀察肝癌SMMC-7721細(xì)胞系經(jīng)過GLS1抑制劑作用后的VM結(jié)構(gòu)變化,運(yùn)用Western blot技術(shù)檢測(cè)抑制GLS1對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞系的VM相關(guān)蛋白血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(VE-cadherin)和血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果CCK-8檢測(cè)結(jié)果顯示,抑制GLS1的活性能夠抑制肝癌細(xì)胞的增值,并且呈時(shí)間和濃度依賴性;劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,劃痕后24h,實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞劃痕愈合速度低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,對(duì)照組細(xì)胞株在培養(yǎng)24h后穿膜細(xì)胞數(shù)高于實(shí)驗(yàn)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);三維細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示,對(duì)照組中可見SMMC-7721細(xì)胞系形成血管生成擬態(tài),實(shí)驗(yàn)組見血管生成擬態(tài)結(jié)構(gòu)被破壞,對(duì)照組形成的血管生成擬態(tài)的小管數(shù)量和節(jié)點(diǎn)數(shù)明顯多于實(shí)驗(yàn)組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.05);Western blot結(jié)果顯示,對(duì)照組VE-cadherin和VEGF蛋白灰度與實(shí)驗(yàn)組比較,VE-cadherin和VEGF蛋白的表達(dá)量未見明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論GLS1促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力,抑制GLS1的活性能夠破壞血管生成擬態(tài)結(jié)構(gòu),此現(xiàn)象提示GLS1可能與肝癌血管生成有關(guān),但結(jié)果仍需要進(jìn)一步探究。
【圖文】：

圖 1 CCK-8 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè) GLS1 對(duì) SMMC-7721 細(xì)胞增殖能力的影響（ABS：光度值，，*：P<0.05）1.2 GLS1 對(duì)肝癌 SMMC-7721 細(xì)胞遷移能力的影響（圖 2）采用劃痕實(shí)驗(yàn)研究 GLS1 對(duì)肝癌 SMMC-7721 細(xì)胞遷移能力的影響。在相

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè) GLS1 對(duì) SMMC-7721 細(xì)胞遷移能力的影響（LS1 對(duì)肝癌 SMMC-7721 細(xì)胞侵襲能力的影響（圖 3）ranswell 試驗(yàn)比較 DMSO 組和 BPTES 組肝癌 SMMC-7變化。結(jié)果顯示，DMSO 組和 BPTES 組細(xì)胞株在培養(yǎng)
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳保東;馬宇強(qiáng);王波;王一莎;李維平;;細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子對(duì)腦膠質(zhì)瘤血管生成擬態(tài)體外形成的影響及其機(jī)制[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2015年12期

2 李義兵,楊俊濤,劉宏鳴;反義GAcDNA重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的影響[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2005年01期

本文編號(hào)：2633975