【摘要】：第一部分:乙二醛酶Ⅰ在食管鱗癌中的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)相關(guān)性目的食管癌是死亡率居世界第6的惡性腫瘤,也是最為常見的侵襲性腫瘤之一。我們前期研究表明長(zhǎng)鏈非編碼RNA MALAT1可以促進(jìn)食管鱗癌的惡性進(jìn)展,通過基因芯片分析干擾ECA109細(xì)胞的MALAT1表達(dá)后篩選出乙二醛酶Ⅰ GLO1可能是其下游靶基因。而GLO1已經(jīng)證實(shí)與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),但GLO1在食管癌中的作用尚不明確,本研究旨在探討GLO1在食管鱗癌中的表達(dá)情況,并分析其表達(dá)水平與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性。方法我們選取南京軍區(qū)總醫(yī)院心胸外科40例食管鱗癌腫瘤組織以及癌旁正常組織,使用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)和免疫組化方法檢測(cè)GLO1的表達(dá)情況并分析其表達(dá)與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性。結(jié)果我們檢測(cè)到GLO1 mRNA在40對(duì)腫瘤組織中平均表達(dá)水平是正常組織2倍(p=0.0040),GLO1在29例腫瘤組織中GLO1的mRNA表達(dá)水平(p0.01)和蛋白表達(dá)水平均高于正常組織,且GLO1的高表達(dá)主要發(fā)生在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(p=0.013)的晚期(p=0.024)食管癌患者。結(jié)論GLO1在食管鱗癌中高表達(dá),且GLO1高表達(dá)主要發(fā)生在淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移的晚期食管癌患者。第二部分:GLO1促進(jìn)食管鱗癌惡性表型的機(jī)制研究目的GLO1可能是一個(gè)潛在的與食管鱗癌的惡性表型密切相關(guān)的促癌基因。本研究旨在探討GLO1在食管鱗癌的表達(dá)水平與食管鱗癌惡性進(jìn)展的關(guān)系,研究GLO1可能參與的調(diào)控食管鱗癌惡性表型的機(jī)制,為食管癌的臨床治療提供新的思路。方法1.設(shè)計(jì)合適的siRNA干擾GLO1的表達(dá),體外功能實(shí)驗(yàn)觀察GLO1對(duì)腫瘤增殖、遷移能力及細(xì)胞周期、凋亡的影響。2.體內(nèi)裸鼠移植瘤模型實(shí)驗(yàn)觀察GLO1的干擾對(duì)ESCC腫瘤在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)的影響。3.使用qRT-PCR方法檢測(cè)29對(duì)高表達(dá)GLO1的食管腫瘤組織中MALAT1表達(dá)水平分析二者相關(guān)性,sirna干擾ESCC細(xì)胞系MALAT1表達(dá)后,qRT-PCR和western blot法測(cè)定GLO1表達(dá)水平變化情況。結(jié)果1沉默GLO1后的ECA109和TE13相較于正常表達(dá)GLO1的ESCC細(xì)胞對(duì)照組,腫瘤細(xì)胞的遷移、侵襲、增殖能力明顯降低,ESCC細(xì)胞的凋亡比例明顯增加,而ESCC細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期。2裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)提示,沉默GLO1后腫瘤的生長(zhǎng)速度和體積均小于對(duì)照組。同時(shí),對(duì)腫瘤組織進(jìn)行免疫組化染色,GLO1沉默組的KI67表達(dá)均低于對(duì)照組(P0.05)。3高表達(dá)GLO1組腫瘤組織mRNA與食管癌MALAT1表達(dá)水平顯著相關(guān),R=0.7217 P0.01,沉默MALAT1后GLO1的表達(dá)水平也明顯下降.結(jié)論我們的實(shí)驗(yàn)表明GLO1在食管鱗癌中高表達(dá),GLO1可促進(jìn)ESCC細(xì)胞的增殖,遷移侵襲等能力,同時(shí)也證明GLO1是長(zhǎng)鏈非編碼RNA MALAT1 一個(gè)潛在的下游調(diào)控基因,可能與MALAT1共同參與促進(jìn)食管癌的進(jìn)展,可以作為今后治療食管鱗癌的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。
【圖文】：

前十的差異基因見表１－１，對(duì)表達(dá)下調(diào)差異基因ＧＯ分析結(jié)果顯涉及小分子代謝逡逑過程富集最為明顯圖１－１－Ａ，，對(duì)差異表達(dá)的基因進(jìn)行ＫＥＧＧ通路分析，沉默組逡逑ＥＣＡ１０９細(xì)胞系與正常組在腫瘤代謝通路上差異最大，見圖１－卜Ｂ，我們推測(cè)ＧＬ０１逡逑可能在腫瘤代謝通路途徑與ＭＡＬＡＴ１聯(lián)系，從而促進(jìn)食管癌進(jìn)展。逡逑表１－１邋ＥＣＡ１０９差異表達(dá)基因下調(diào)前十位逡逑Ｔａｂｌｅ邋１：邋Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ邋ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ邋ｇｅｎｅｓ邋ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ邋ｂｙ邋Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ邋ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ邋ｉｎ邋ＥＣＡ１０９逡逑＾Ｇｅｎｅ邋Ｓｙｍｂｏｌ邋ＥＣ１０９－ＮＣＪＨＴＡ－２＿０邋ＥＣ１０９－ＳＩ１邋ＪＨＴＡ－２＾０）．邋Ｆｏｌｄ邋ｃｈａｎｇｅ逡逑）．ｒｍａ－ｇｅｎｅ－ｆｕｉｌ－Ｓｉｇａｌ邋ｒｍａ－ｇｅｎｅ－ｆｕｌｌ－Ｓｉｇｎａｌ邋（ＳＩ１／ＮＣ）逡逑ＧＬ０１邐９．３２６８３９邐７．７５８５５４邐０．３３７２０９０１２逡逑ＣＴＨ邐７．１１６７２６邐５．９６３５７８邐０．４４９６４３０２７逡逑ＳＰＩＮＫ１３邐９．５６０６３４邐８．４８４０８８邐０．４７４１６２６７３逡逑ＣＥＡＣＡＭ７邐５．０７２６３８邐４．０９１５３１邐０．５０６５９０８７６逡逑ＴＡＦ１３邐６．４０８６９８邐５．４３６９９４邐０．５０９９０３４４８逡逑ＨＧＤ邐５．５６３０１４邐４．６１６４１５邐０．５１８８５４１６５逡逑ＵＳＨ１Ｃ邐７．１４２２２邐６．２４７８３５邐０．５３７９７６４７８逡逑ＳＬＣ１６Ａ６邐９．９５８

圖２－ｌ邋Ａ邋ｃｊＲＴ－ＰＣＲ法和ｗｅｓｔｅｒｎ邋ｂｌｏｔ結(jié)果均顯示對(duì)ＥＣＡ１０９細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染后ｓｉ－ＧＬＯｌ組相逡逑對(duì)ｐｓｉ－ｃｏｎｔｒｏ丨和個(gè)：丨＇丨對(duì)照ＮＣ饑（；丨川的灰達(dá)水Ｔ？受到明eA抑制。ＢｑＫＩ’逡逑
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R735.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Yuwei Zhang;;Epidemiology of esophageal cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2013年34期

本文編號(hào)：2630712