【摘要】：[目的]Ki67免疫組織化學指數(shù)是乳腺癌分子分型的關鍵指標,也是是否對乳腺癌進行細胞毒藥物治療的重要依據。但由于目前傳統(tǒng)判讀方法的局限性,導致不同觀察者之間的判讀結果或同一觀察者在不同的時間判讀結果重復性差。本課題通過對現(xiàn)有判讀方法的改進,建立基于數(shù)字圖像分析的Ki67免疫組織化學指數(shù)判讀方法,并研究同一觀察者使用上述方法判讀乳腺癌Ki67免疫組化染色結果的重復性,為乳腺癌分子分型和個體化治療提供科學依據。[方法]1、建立基于數(shù)字圖像分析的乳腺癌Ki67免疫組織化學指數(shù)判讀新方法:熱點區(qū)域設定面積自動計數(shù)(Demarcating-square Automatic Counting In Hot Spot,DACHS)、多區(qū)域設定面積自動計數(shù)(Demarcating-square Automatic Counting In Multiple Spot,DACMS)、熱點區(qū)域設定面積人工計數(shù)(Demarcating-square Manual Counting In Hot Spot,DMCHS)。2、對30例乳腺癌標本進行Ki67免疫組化染色和數(shù)字切片掃描。3、同一觀察者在10個不同的時間,采用上述判讀方法對30例數(shù)字切片進行Ki67指數(shù)判讀。4、同一觀察者在10個不同時間采用熱點區(qū)域顯微鏡下人工計數(shù)(Manual Counting Under Microscope InHotSpot,MCUMHS)對30例免疫組化染色切片進行判讀。5、對不同判讀方法獲得數(shù)據用R語言統(tǒng)計學分析其一致性以及離散程度,比較不同判讀方法的可重復性。[結果]一、本實驗30例乳腺癌Ki67免疫組化數(shù)字切片中,有熱點區(qū)切片25例,占比83%;25例有熱點區(qū)切片中19例為熱點區(qū)散在分布,6例為熱點區(qū)集中分布。熱點區(qū)分布于腫瘤組織浸潤性邊緣為11例,熱點區(qū)分布于腫瘤組織中為14例;熱點區(qū)的最大徑9980 μm,最小徑47 μm,4例病理切片熱點區(qū)直徑小于100μm,10例病理切片熱點區(qū)直徑在100-200 μm之間,11例病理切片熱點區(qū)直徑200 μm。二、100×100 μm2面積大小的一個判讀框覆蓋腫瘤細胞數(shù)為57個左右;200×200μm2面積大小的一個判讀框覆蓋腫瘤細胞數(shù)為180個左右;300×300μm2面積大小的一個判讀框覆蓋腫瘤細胞數(shù)為640個左右。三、同一觀察者采用熱點區(qū)域設定面積自動計數(shù)所得的Ki67評估值的標準差小于多區(qū)域設定面積自動計數(shù),說明熱點區(qū)域設定面積自動計數(shù)的離散程度小于多區(qū)域設定面積自動計數(shù)。四、熱點區(qū)域設定面積自動計數(shù):設定判讀框面積為200×200 μm2,300×300 μm2的熱點區(qū)域,ICC值分別是0.964和0.977;多區(qū)域設定面積自動計數(shù):設定判讀框面積為200×200 μm2，300×300 μ m2的多區(qū)域自動計數(shù),ICC值分別是0.853和0.880;熱點區(qū)域設定面積人工計數(shù):設定判讀框面積為200×200μ m2,300×300μm2熱點區(qū)域人工計數(shù),ICC值分別是0.926和0.973;熱點區(qū)域顯微鏡下人工計數(shù)的ICC值是0.832。五、由離散程度分布圖,可以得到熱點區(qū)域顯微鏡下人工計數(shù)離散程度大于熱點區(qū)域設定面積自動計數(shù)。六、由均數(shù)士標準差可知,離散程度由大到小的排序為:熱點區(qū)域顯微鏡下人工計數(shù)熱點區(qū)域200×200 μm2人工計數(shù)熱點區(qū)域200×200 μm2自動計數(shù)熱點區(qū)域300×300 μm2人工計數(shù)熱點區(qū)域300×300 μm2自動計數(shù)。[結論](1)建立的乳腺癌Ki67免疫組化檢測結果判讀方法的可重復性均符合要求,其中可重復性最好的是熱點區(qū)域設定面積為300X 300 μm2的自動計數(shù)。(2)熱點區(qū)域設定面積人工計數(shù)可以人為避免熱點區(qū)域設定面積自動計數(shù)中因計算機的識別錯誤而導致的錯誤計數(shù)。(3)傳統(tǒng)的熱點區(qū)域顯微鏡下人工計數(shù)由于標本量大,判讀者易視覺疲勞且容易漏掉計數(shù)以及重復計數(shù)腫瘤細胞,不建議臨床病理科醫(yī)生使用。
【圖文】：

２．邋４．邋２面積設定選擇逡逑每例數(shù)字切片分別下三個判讀框，熱點區(qū)域為Ｋｉ６７腫瘤陽性細胞最為集中逡逑的區(qū)域，可以位于同一個熱點區(qū)內，也可位于不同的熱點區(qū)內（圖２）。逡逑圖２：熱點區(qū)域選擇。Ａ：若切片中熱點區(qū)域足夠大（可放置３個判讀逡逑框）時，選擇一個腫瘤陽性細胞數(shù)最為集中的區(qū)域下３個判讀框逡逑？逡逑圖２：熱點區(qū)域選擇。Ｂ：若切片中熱點區(qū)域不夠大時，則再選擇第２逡逑或第３個陽性細胞集中的區(qū)域分別下框，共設３個判讀框逡逑１６逡逑

２．邋４．邋２面積設定選擇逡逑每例數(shù)字切片分別下三個判讀框，熱點區(qū)域為Ｋｉ６７腫瘤陽性細胞最為集中逡逑的區(qū)域，，可以位于同一個熱點區(qū)內，也可位于不同的熱點區(qū)內（圖２）。逡逑圖２：熱點區(qū)域選擇。Ａ：若切片中熱點區(qū)域足夠大（可放置３個判讀逡逑框）時，選擇一個腫瘤陽性細胞數(shù)最為集中的區(qū)域下３個判讀框逡逑？逡逑圖２：熱點區(qū)域選擇。Ｂ：若切片中熱點區(qū)域不夠大時，則再選擇第２逡逑或第３個陽性細胞集中的區(qū)域分別下框，共設３個判讀框逡逑１６逡逑
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R737.9

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本文編號：2622710