【摘要】：化學(xué)療法廣泛應(yīng)用于多種癌癥的治療。然而,化療藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)殺傷正常細(xì)胞,導(dǎo)致副反應(yīng)的發(fā)生�；熕幬锏牡歪槍�(duì)性和破壞性是目前急需突破的問(wèn)題。近年來(lái),碳量子點(diǎn)因其良好的熒光性、生物相容性及低毒性,在癌癥治療領(lǐng)域引起了研究人員的廣泛關(guān)注。目前關(guān)于碳量子點(diǎn)作為生物醫(yī)學(xué)傳送系統(tǒng)負(fù)載藥物治療疾病的研究較為深入,但在口腔腫瘤疾病治療方面的應(yīng)用鮮有報(bào)道,而口腔腫瘤疾病對(duì)化療藥物并不敏感。目的:制備碳量子點(diǎn),將碳量子點(diǎn)與阿霉素結(jié)合,制備形成一種新型載藥復(fù)合體,探討他們的理化性能;比較載藥復(fù)合體與單純阿霉素的抗腫瘤效率,初探載藥復(fù)合體的作用機(jī)制。方法:第一部分:碳量子點(diǎn)、碳量子點(diǎn)負(fù)載阿霉素復(fù)合體的制備及理化性能檢測(cè)通過(guò)牛奶水熱法制備碳量子點(diǎn)。將碳量子點(diǎn)與鹽酸阿霉素在搖床中避光孵育24h得到載藥復(fù)合體。通過(guò)紫外光照射、熒光吸收輻射光譜、紫外吸收光譜、接觸角檢測(cè)、Zeta電位檢測(cè)、FT-IR、XPS、XRD等表征碳量子點(diǎn)及載藥復(fù)合體的理化性能;通過(guò)TEM、SEM、AFM展示碳量子點(diǎn)及載藥復(fù)合體形態(tài)。第二部分:載藥復(fù)合體的體外藥效實(shí)驗(yàn)通過(guò)DOX的熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算載藥復(fù)合體中DOX的負(fù)載率;將載藥復(fù)合體至于pH 7.4、pH 6.8、pH 5.0環(huán)境進(jìn)行藥物釋放實(shí)驗(yàn),繪制DOX的釋放曲線。使用L929細(xì)胞和ACC-2細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測(cè)、藥物定位、細(xì)胞對(duì)藥物的攝取以及藥效的檢測(cè)。CCK-8毒性檢測(cè),檢測(cè)碳量子點(diǎn)的毒性、兩種藥物分別對(duì)兩種細(xì)胞的藥效;共聚焦顯微鏡,觀察藥物在ACC-2細(xì)胞中的定位;流式細(xì)胞儀,檢測(cè)兩種藥物對(duì)細(xì)胞凋亡周期的影響。結(jié)果:第一部分:碳量子點(diǎn)、碳量子點(diǎn)負(fù)載阿霉素復(fù)合體的制備及理化性能檢測(cè)本實(shí)驗(yàn)制備的碳量子點(diǎn)為球狀結(jié)構(gòu),接觸角為10.4°,具有良好的親水性,Zate電位結(jié)果顯示碳量子點(diǎn)帶負(fù)電,形態(tài)學(xué)檢測(cè)及理化性能檢測(cè)結(jié)果證明碳量子點(diǎn)的成功制備。結(jié)合阿霉素后紫外光譜及吸收輻射光譜波峰發(fā)生藍(lán)移、FT-IR、XPS圖譜顯示有新的C-N化學(xué)鍵形成,證明載藥復(fù)合體的成功制備。第二部分:載藥復(fù)合體的體外藥效實(shí)驗(yàn)DOX的負(fù)載率約為87%。DOX在pH 5.0的環(huán)境中釋放率最高。在72h前釋放速度較為緩慢。CCK-8結(jié)果顯示碳量子點(diǎn)對(duì)L929細(xì)胞具備低毒性,在一定濃度范圍幾乎無(wú)毒性,可以應(yīng)用于實(shí)驗(yàn);載藥復(fù)合體對(duì)ACC-2的殺傷作用強(qiáng)于單純阿霉素的殺傷效率,對(duì)L929的殺傷效率低于單純阿霉素;共聚焦顯微鏡觀察顯示載藥復(fù)合體將阿霉素更多送入ACC-2細(xì)胞細(xì)胞核;流式細(xì)胞凋亡周期檢測(cè)同時(shí)發(fā)現(xiàn),相比單純阿霉素,載藥復(fù)合體作用于ACC-2細(xì)胞,處于凋亡晚期的細(xì)胞比例增高。使用GraphPad Prism 6.0軟件的t檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)。結(jié)論:1.相比傳統(tǒng)制備方法,碳量子點(diǎn)制備工藝綠色環(huán)保,具備良好的熒光性,低毒性,生物相容性好;2.碳量子點(diǎn)與載藥復(fù)合體表征結(jié)果的區(qū)別,證明載藥復(fù)合體的成功制備。載藥復(fù)合體的藥物釋放具備pH依賴性。3.載藥復(fù)合體對(duì)ACC-2腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出特異性和敏感性,對(duì)L929正常細(xì)胞表現(xiàn)出低毒性。4.載藥復(fù)合體主要通過(guò)細(xì)胞核靶向作用和凋亡途徑殺傷腫瘤細(xì)胞,提高抗腫瘤效率。
【圖文】：

逡逑接觸角實(shí)驗(yàn)測(cè)得，碳量子點(diǎn)接觸角度約為１０．４°邋（圖２）。逡逑Ｉ逡逑邐ｕ邋邐？逡逑圖２碳量子點(diǎn)溶液的接觸角逡逑碳量子點(diǎn)溶液分別與ＰＢＳ、ＲＰＭＩ邋１６４０培養(yǎng)基、含１０％邋ＦＢＳ的ＲＰＭＩ邋１６４０培逡逑養(yǎng)基混合，觀察３天后、７天后溶液的混合情況，發(fā)現(xiàn)四組溶液均混合良好、無(wú)沉逡逑淀、分層現(xiàn)象。（見(jiàn)圖３）逡逑ｆＹｊＯｖｌ）逡逑３天逡逑７天逡逑圖３碳量子點(diǎn)在ＰＢＳ、ＲＰＭＩ培養(yǎng)基、含胎牛血清的ＲＰＭＩ培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性逡逑１６逡逑

碳量子點(diǎn)溶液分別與ＰＢＳ、ＲＰＭＩ邋１６４０培養(yǎng)基、含１０％邋ＦＢＳ的ＲＰＭＩ邋１６４０培逡逑養(yǎng)基混合，觀察３天后、７天后溶液的混合情況，發(fā)現(xiàn)四組溶液均混合良好、無(wú)沉逡逑淀、分層現(xiàn)象。（見(jiàn)圖３）逡逑ｆＹｊＯｖｌ）逡逑３天逡逑７天逡逑圖３碳量子點(diǎn)在ＰＢＳ、ＲＰＭＩ培養(yǎng)基、含胎牛血清的ＲＰＭＩ培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性逡逑１６逡逑
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R730.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 Tao Gong;Jing Xie;Jinfeng Liao;Tao Zhang;Shiyu Lin;Yunfeng Lin;;Nanomaterials and bone regeneration[J];Bone Research;2015年03期

2 劉娜;張博;李芳菲;鄧蔓菁;;大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞膜片的生物學(xué)特點(diǎn)研究[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2013年02期

3 張雅麗;張少鋒;楊彥偉;梅鳳喜;;納米二氧化硅對(duì)氟硅云母玻璃陶瓷強(qiáng)度的影響[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年04期

4 趙明哲;汲平;;納米技術(shù)在口腔修復(fù)領(lǐng)域的應(yīng)用前景及進(jìn)展[J];口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志;2008年01期

，

本文編號(hào)：2613614