NK細(xì)胞的高效擴(kuò)增及其對體外腫瘤模型的殺傷效果研究
發(fā)布時(shí)間:2020-03-30 02:49
【摘要】:目的:高效擴(kuò)增NK細(xì)胞,并確定其對不同腫瘤的殺傷作用,為臨床應(yīng)用提供參考。方法:從成人外周血中分離PBMCs并利用表面表達(dá)4-1BBL、IL-15和IL-21的K562滋養(yǎng)細(xì)胞對其進(jìn)行共刺激培養(yǎng),15 d后計(jì)數(shù)并檢測CD3~-CD56~+細(xì)胞純度;利用間接免疫熒光及Real-time PCR方法檢測NK細(xì)胞Granzyme B及Perforin表達(dá)變化的同時(shí)檢測其對肺癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、胰腺癌、宮頸癌的殺傷作用,確定其對不同腫瘤的殺傷效果。結(jié)果:擴(kuò)增15 d后,細(xì)胞數(shù)量高于110億,CD3~-CD56~+比例達(dá)95%以上;培養(yǎng)后的NK細(xì)胞高表達(dá)Granzyme B、Perforin,且對A549的殺傷效果(E∶T=10∶1)約為90%,同時(shí)對其他腫瘤細(xì)胞(E∶T=10∶1)的殺傷效果由強(qiáng)到弱的順序?yàn)?胃癌、胰腺癌、宮頸癌、卵巢癌、腎癌、肝癌(P0.05);NK細(xì)胞對宮頸癌、肝癌、胰腺癌的殺傷效果呈現(xiàn)一定的時(shí)間依賴性。結(jié)論:此方法可以擴(kuò)增出高數(shù)量、高純度的NK細(xì)胞,同時(shí)該NK細(xì)胞具有高效殺傷多種腫瘤細(xì)胞的能力。
本文編號:2606912
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1 ;快速知道癌癥治療結(jié)果[J];醫(yī)療保健器具;2001年04期
,本文編號:2606912
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