【摘要】：甘草,是一種傳統(tǒng)的藥食同源的植物,幾個世紀以來一直被用于多種疾病的治療,包括肝癌。然而,甘草的不同生物學功能的化學基礎和生物學機制尚未完全闡明。甘草香豆素是從甘草中提取的具有生物活性的主要香豆素類化學物。本課題以甘草香豆素為研究對象,深入研究了其抗肝癌的功效及其機制。原發(fā)性肝癌(肝細胞癌和肝內膽管癌)是世界上最常見的腫瘤之一,死亡率在腫瘤誘發(fā)的相關死亡率中列第二位。且肝癌是惡性較強的癌癥,缺乏特異的靶向治療手段,且愈后較差,對大多抗腫瘤藥物具有很強的耐藥性。肝癌發(fā)病因素廣泛,其中酒精性肝損傷為肝癌發(fā)病的主要誘因之一�？刂聘伟┌l(fā)病危險因素,尋找肝癌的天然化學預防、治療藥物及有效地靶點藥物成為當前預防和治療肝癌的研究熱點。本文首先采用酒精性肝損傷細胞及動物模型,闡明甘草香豆素可抑制酒精暴露引起的肝臟脂肪變性,緩解急性或慢性酒精性肝損傷。機制上,通過體外細胞實驗和體內小鼠急性及慢性酒精性肝損傷模型表明甘草香豆素可通過激活Nrf2信號通路從而保護酒精性肝損傷。甘草香豆素的這一作用降低了酒精性脂肪肝向肝癌的轉化風險。此外,本文通過肝癌體外細胞及肝癌細胞皮下異位成瘤模型的建立,進一步證明甘草香豆素能通過引起肝細胞周期阻滯及細胞凋亡,抑制肝癌細胞的生長。機制上,甘草香豆素的這一作用依賴于與TOPK的直接結合,使TOPK激酶活性降低,進而激活抑癌基因p53,起到預防和治療肝細胞癌的作用。本文在進行甘草香豆素抗肝細胞癌的機制研究中發(fā)現(xiàn),甘草香豆素可以顯著抑制肝細胞癌的mTOR活性及造成細胞周期阻滯,并且在肝內膽管癌細胞中同樣具有此特性。因此,文中將mTOR抑制劑和細胞周期抑制劑(CDK4/6抑制劑)聯(lián)合使用,發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥具有抑制體外ICC細胞生長的作用且具有協(xié)同性。此外,相較于mTOR抑制劑或CDK4/6抑制劑單獨用藥,聯(lián)合治療組在小鼠ICC模型中顯示出更加顯著的療效。機制上,本文證明聯(lián)合使用mTOR和CDK4/6抑制劑能在體外和體內顯著抑制ICC細胞的細胞增殖。同時,CDK4/6抑制劑能增強mTOR抑制劑的活性;而mTOR抑制劑阻止CDK4/6抑制劑誘導的細胞周期蛋白D1的上調,增加癌細胞對CDK4/6抑制劑的敏感性,從而進一步誘導細胞周期阻滯。本文圍繞原發(fā)性肝癌的預防和治療,分別闡明甘草香豆素防治酒精性肝損傷,抑制肝細胞癌和肝內膽管癌的作用,同時分別就甘草香豆素對肝癌細胞的周期阻滯作用及對mTOR信號通路的抑制作用進行進一步研究,深入論證了相應靶點的抗癌作用。綜上,本文對肝癌的防治提供了新的治療方法及理論基礎。
【圖文】：

露逡逑的主要代謝器官，酒精通過一系列的氧化過程完成解化過程可有效避免酒精大量在體內細胞或器官內沉量酒精之后，肝臟不能及時代謝，從而酒精積累，導取代，即產生肝硬化［１５］。肝硬化之后無法行使解毒功染，增加罹患肝癌的風險。有研究指出，與非飲酒者風險增加約９０％，邋ＩＣＣ風險增加約６８％％１，表明酒之一。逡逑長期飲酒會加重肝臟負擔，，從而誘發(fā)酒精性脂肪肝等甚至肝癌。其中酒精性脂肪肝是酒精引起的最早、最攝入，酒精性肝病可導致肝臟炎癥反應，即脂肪性肝終導致癌癥的發(fā)生，如圖１－１所示。隨著人們生活水的消耗量也呈逐年遞增的趨勢。因此，肝癌的這一風

由此猜想，ＧＣＭ對于酒精性肝損傷的保護作用可能通過Ｎｒｆ２信號通路完成。逡逑為進一步驗證此假設是否正確，文中使用蛋白免疫印跡法對Ｎｒｆ２蛋白及其相關轉錄逡逑靶點Ｈ０－１及ＧＣＬＣ蛋白的表達進行分析。如圖２－４邋Ａ所示，慢性酒精性肝損傷模型逡逑中，ＧＣＭ對照組中，ＧＣＭ處理可以顯著升高Ｎｒｆ２，邋Ｈ０－１及ＧＣＬＣ蛋白含量。且與逡逑對照組相比，酒精暴露能下調Ｎｒｆ２，邋ＩＩＯ－１及ＧＣＬＣ蛋白的表達（圖２－４Ｂ）。經(jīng)ＧＣＭ逡逑２６逡逑
【學位授予單位】：中國農業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

相關期刊論文 前6條

1 Xiao Chen;Hai-Peng Liu;Mei Li;Liang Qiao;;Advances in non-surgical management of primary liver cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2014年44期

2 Alba Rocco;Debora Compare;Debora Angrisani;Marco Sanduzzi Zamparelli;Gerardo Nardone;;Alcoholic disease: Liver and beyond[J];World Journal of Gastroenterology;2014年40期

3 Ali Raza;Gagan K Sood;;Hepatocellular carcinoma review:Current treatment,and evidence-based medicine[J];World Journal of Gastroenterology;2014年15期

4 ;Detection of apoptosis induced by new type gosling viral enteritis virus in vitro through fluorescein annexin V-FITC/PI double labeling[J];World Journal of Gastroenterology;2008年14期

5 KJ Schmitz;H Lang;J Wohlschlaeger;GC Sotiropoulos;H Reis;KW Schmid;HA Baba;;AKT and ERK1/2 signaling in intrahepatic cholangiocarcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2007年48期

6 楊秀偉;徐波;冉福香;王瑞卿;吳軍;崔景榮;;11種香豆素類化合物對人膀胱癌細胞系E-J細胞株生長抑制活性的篩選[J];中西醫(yī)結合學報;2007年01期

本文編號：2595196