【摘要】：背景與目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)具有抗腫瘤的作用。該研究在DADS上調人胃癌MGC803細胞RORα的基礎上,觀察DADS與RORα高表達對MGC803細胞上皮-間質轉化(epithelialmesenchymal transformation,EMT)的影響。方法:相差顯微鏡觀察MGC803細胞形態(tài)的影響。采用反轉錄聚合酶鏈反應(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白[質]印跡法(Western blot)、免疫熒光與免疫組織化學檢測EMT相關分子表達。裸鼠實驗檢測對移植瘤生長的影響。結果:相差顯微鏡顯示,DADS組與RORα高表達組細胞大小較MGC803細胞一致,呈圓形或橢圓形,梭形細胞少見,異型性降低。RORα高表達加DADS后,上述改變更為明顯。Western blot檢測結果顯示,DADS組與RORα高表達組Snail蛋白表達明顯下調,DADS+RORα高表達組更明顯(P0.05)。RT-PCR與Western blot檢測顯示,DADS與RORα高表達可明顯下調Vimentin和上調E-cadherin m RNA與蛋白表達,DADS+RORα高表達組更為顯著(P0.05)。免疫熒光顯示,DADS組與RORα高表達組細胞Snail與Vimentin表達較對照組明顯減弱和E-cadherin表達顯著增強,DADS+RORα高表達組更為顯著,與Western blot結果一致。裸鼠實驗顯示,DADS組、RORα高表達組與RORα高表達+DADS組移植瘤較對照組生長減慢(P0.05),并且,移植瘤體重較對照組明顯降低,抑瘤率分別為15.07%、26.55%與49.27%(P0.05)。免疫組織化學檢測結果顯示,DADS組、RORα高表達組與RORα高表達+DADS組較對照組的Ki-67、CD34與Vimentin表達均明顯降低,E-cadherin表達明顯增強。結論:RORα高表達可增強DADS體內外抑制人胃癌細胞EMT的作用。
【圖文】：

362降低。RORα高表達細胞大小較一致，呈圓形或橢圓形，細胞膜突起少見，核質比例減少，異型性顯著降低。RORα高表達加DADS后，上述改變更為明顯。表明DADS與RORα高表達可從形態(tài)上抑制MGC803細胞EMT，RORα高表達可增強DADS的抑制作用(圖1)。(Phase-contrastmicroscopy,×40)圖1RORα高表達對MGC803細胞形態(tài)的影響Fig.1ThemorphologicaleffectofoverexpressionofRORαinMGC803cellsA:MGC803;B:DADS;C:RORα/MGC803;D:RORα/MGC803+DADS圖2DADS與RORα高表達對Snail蛋白表達的影響Fig.2TheeffectofSnailexpressionbyDADSandoverexpressionofRORα1:MGC803;2:vector/MGC803;3:RORα/MGC803;4:MGC803+DADS;5:vector/MGC803+DADS;6:RORα/MGC803+DADS;*:P<0.05,comparedwithMGC803andvector/MGC803;#:P<0.05,comparedwithMGC803+DADS,vector/MGC803+DADSandRORα/MGC8032.2DADS與RORα高表達抑制MGC803細胞EMTWesternblot檢測結果顯示，DADS與RORα高表達可明顯下調MGC803細胞Snail蛋白表達(P<0.05)。并且，RT-PCR與Westernblot檢測結果顯示，DADS與RORα高表達可下調Vimentin和上調E-cadherinmRNA與蛋白表達(P<0.05)。上述改變RORα/MGC803+DADS作用更為明顯(P<0.05)。表明DADS與RORα高表達可通過下調Snail與Vimentin和上調E-cadherin抑制MGC803細胞EMT，RORα高表達可增強DADS的抑制作用(圖2~4)。2.3細胞免疫熒光檢測DADS與RORα高表達對EMT相關蛋白表達的影響免疫熒光檢測結果顯示，Snail蛋白定位細胞核，Vimentin與E-cadherin蛋白主要定位于細胞質。DADS與RORα高表達組細胞Snail與Vimentin陽性表達較對照組明顯減弱，而E-cadherin陽性表達顯著增強，與Westernblot檢測結果一致(圖5)。2.4DADS與RORα高表達

362降低。RORα高表達細胞大小較一致，呈圓形或橢圓形，細胞膜突起少見，核質比例減少，，異型性顯著降低。RORα高表達加DADS后，上述改變更為明顯。表明DADS與RORα高表達可從形態(tài)上抑制MGC803細胞EMT，RORα高表達可增強DADS的抑制作用(圖1)。(Phase-contrastmicroscopy,×40)圖1RORα高表達對MGC803細胞形態(tài)的影響Fig.1ThemorphologicaleffectofoverexpressionofRORαinMGC803cellsA:MGC803;B:DADS;C:RORα/MGC803;D:RORα/MGC803+DADS圖2DADS與RORα高表達對Snail蛋白表達的影響Fig.2TheeffectofSnailexpressionbyDADSandoverexpressionofRORα1:MGC803;2:vector/MGC803;3:RORα/MGC803;4:MGC803+DADS;5:vector/MGC803+DADS;6:RORα/MGC803+DADS;*:P<0.05,comparedwithMGC803andvector/MGC803;#:P<0.05,comparedwithMGC803+DADS,vector/MGC803+DADSandRORα/MGC8032.2DADS與RORα高表達抑制MGC803細胞EMTWesternblot檢測結果顯示，DADS與RORα高表達可明顯下調MGC803細胞Snail蛋白表達(P<0.05)。并且，RT-PCR與Westernblot檢測結果顯示，DADS與RORα高表達可下調Vimentin和上調E-cadherinmRNA與蛋白表達(P<0.05)。上述改變RORα/MGC803+DADS作用更為明顯(P<0.05)。表明DADS與RORα高表達可通過下調Snail與Vimentin和上調E-cadherin抑制MGC803細胞EMT，RORα高表達可增強DADS的抑制作用(圖2~4)。2.3細胞免疫熒光檢測DADS與RORα高表達對EMT相關蛋白表達的影響免疫熒光檢測結果顯示，Snail蛋白定位細胞核，Vimentin與E-cadherin蛋白主要定位于細胞質。DADS與RORα高表達組細胞Snail與Vimentin陽性表達較對照組明顯減弱，而E-cadherin陽性表達顯著增強，與Westernblot檢測結果一致(圖5)。2.4DADS與RORα高表達

【參考文獻】

相關期刊論文 前5條

1 趙曉紅;劉芳;向姝霖;夏紅;曾希;蘇波;凌暉;蘇琦;;RORα高表達對人胃癌MGC803細胞增殖與遷移侵襲的影響[J];腫瘤防治研究;2016年11期

2 蘇堅;趙曉紅;劉芳;夏紅;蘇波;曾希;凌暉;蘇琦;;RORα高表達抑制人胃癌MGC803細胞Wnt/β-catenin信號通路靶基因表達[J];中國細胞生物學學報;2016年11期

3 Michele Orditura;Gennaro Galizia;Vincenzo Sforza;Valentina Gambardella;Alessio Fabozzi;Maria Maddalena Laterza;Francesca Andreozzi;Jole Ventriglia;Beatrice Savastano;Andrea Mabilia;Eva Lieto;Fortunato Ciardiello;Ferdinando De Vita;;Treatment of gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2014年07期

4 石鶯;黃建軍;蘇堅;唐海林;廖前進;曾希;凌暉;蘇琦;;胃癌中RORα蛋白的表達及臨床病理意義[J];臨床與實驗病理學雜志;2012年03期

5 趙曉紅;蘇琦;;維甲酸相關孤核受體α與Wnt信號途徑及腫瘤的關系[J];國際病理科學與臨床雜志;2011年03期

【共引文獻】

相關期刊論文 前2條

1 羅國培;金凱舟;程合;劉辰;倪泉興;虞先o

本文編號：2591991