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NUP93促進宮頸癌惡性進展及其相關(guān)機制的研究

發(fā)布時間:2020-01-28 19:46
【摘要】:目的:檢測NUP93在宮頸癌組織及細(xì)胞中的表達,探討沉默NUP93后對宮頸癌細(xì)胞增殖,侵襲,轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為的影響及其相關(guān)機制的研究。方法:(1)采用免疫組織化學(xué)測定NUP93在宮頸癌旁正常組織和宮頸癌組織中的表達情況,并分析NUP93的表達與臨床病理特征之間的關(guān)系;采用Western blot和q PCR測定NUP93在宮頸癌細(xì)胞株中蛋白和mRNA水平的表達情況。(2)采用CCK-8細(xì)胞增殖實驗和克隆形成實驗測定宮頸癌細(xì)胞株(SiHa,C33a)沉默NUP93基因后的增殖情況。(3)采用劃痕實驗和Transwell實驗測定宮頸癌細(xì)胞株(SiHa,C33a)沉默NUP93基因后的轉(zhuǎn)移、侵襲能力的改變。(4)采用F-actin(鬼筆環(huán)肽)染色測定宮頸癌細(xì)胞株(SiHa,C33a)沉默NUP93基因后的細(xì)胞骨架的變化。(5)采用裸鼠皮下成瘤實驗測定宮頸癌細(xì)胞株(SiHa,C33a)沉默NUP93基因后裸鼠成瘤能力的改變。(6)采用Western blot測定IL-6/STAT3通路中相關(guān)蛋白在宮頸癌細(xì)胞株(SiHa,C33a)的表達情況;采用Western blot測定沉默NUP93基因后il-6/stat3通路中相關(guān)蛋白在宮頸癌細(xì)胞株(siha,c33a)的表達情況的改變。結(jié)果:(1)nup93在宮頸癌組織中的表達比宮頸癌旁正常組織明顯增高(p0.05)。nup93主要位于核膜。nup93在宮頸鱗癌中的表達與宮頸腺癌比較無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。nup93的表達與宮頸癌分期相關(guān),nup93在晚期宮頸癌(iii/iv期)中表達比早期宮頸癌(i/ii期)高(p0.05)。nup93的表達與宮頸癌分級有關(guān)系,分級越高,nup93的表達越高(2-3級和1級比較)(p0.05),但nup93的表達與宮頸癌年齡無關(guān)(p0.05)。(2)cck-8細(xì)胞增殖實驗和克隆形成實驗提示沉默nup93基因后,宮頸癌細(xì)胞(siha,c33a)的增殖能力增強(p0.05)。(3)劃痕實驗和transwell實驗提示沉默nup93基因后,宮頸癌細(xì)胞(siha,c33a)的遷移、侵襲能力增強(p0.05)。(4)沉默nup93基因后,宮頸癌細(xì)胞(siha,c33a)的細(xì)胞膜褶皺和扮裝偽足減少,細(xì)胞骨架發(fā)生變化。(5)宮頸癌細(xì)胞(siha,c33a)沉默nup93基因后,裸鼠皮下形成的移植瘤的體積和重量都減少(p0.05)。(6)宮頸癌細(xì)胞(siha,c33a)沉默nup93基因后,p-stat3的表達降低而il-6r的不受影響提示nup93不影響il-6r的表達,但可調(diào)節(jié)p-stat3的表達。宮頸癌細(xì)胞(siha,c33a)沉默nup93基因后,IL-6可恢復(fù)NUP93和P-STAT3的表達,表明IL-6可調(diào)節(jié)NUP93和P-STAT3,NUP93與IL-6/STAT3通路有關(guān)。結(jié)論:NUP93在宮頸癌中起促癌基因作用,NUP93可以通過IL-6/STAT3通路調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架,影響宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為。
【圖文】:

宮頸癌組織,正宮,宮頸組織,免疫組化


圖 1-1.Western blot 結(jié)果表示 NUP93 在宮頸癌組織中的表達明顯高于正 宮頸組織。*P<0.05。Figure 1-1. Nup93 expression was higher in cervical cancer tissues than that in normal cervicaltissues by Western blotting analysis. * P<0.05我們采用免疫組化實驗來檢測 NUP93 在組織芯片(含 55 例宮頸癌組織和 15

宮頸癌組織,正宮


cer tissues 55 16(29.09%) 39(70.91%)<0.001O stage30 22(73.33%) 8(26.67%)V 27 6(22.22%) 21(77.78%)<0.05de13 10(76.92%) 3(23.08%)24 11(45.83%) 13(54.17%)19 6(31.58%) 13(68.42%)<0.05or typeamous 49 25(51.02%) 24(48.98%)nosquamous 8 3 (37.50%) 5 (62.50%)>0.05
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R737.33

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本文編號:2574117


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