【摘要】：第一部分 EGCG通過(guò)活化p38αMAPK-Bax途徑誘導(dǎo)NB4細(xì)胞凋亡目的:本實(shí)驗(yàn)主要探討EGCG是否能夠誘導(dǎo)NB4細(xì)胞凋亡及其可能的分子機(jī)制。方法:分別用不同濃度的EGCG處理NB4細(xì)胞,或預(yù)先用p38αMAPK的抑制劑PD169316處理NB4細(xì)胞半小時(shí),再用相應(yīng)濃度的EGCG處理NB4細(xì)胞。用CCK-8方法測(cè)定NB4細(xì)胞增殖狀況,用FITC-Annexin V/PI雙染色法測(cè)定NB4細(xì)胞凋亡狀況,用Western-Blot檢測(cè)p38αMAPK、p-p38αMAPK、Bcl-2和Bax蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。結(jié)果:隨著EGCG濃度的增加,CCK-8結(jié)果顯示EGCG依賴濃度梯度抑制NB4細(xì)胞增殖;流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)EGCG能夠明顯促進(jìn)NB4細(xì)胞凋亡;同時(shí)Western-Blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)p-p38αMAPK和Bax蛋白質(zhì)表達(dá)水平升高,與EGCG濃度呈正相關(guān),然而Bcl-2蛋白質(zhì)表達(dá)水平隨EGCG濃度升高而降低。在用p38αMAPK抑制劑處理后,CCK-8結(jié)果表明EGCG抑制細(xì)胞增殖的能力明顯減弱,同時(shí)流式細(xì)胞術(shù)顯示EGCG促進(jìn)細(xì)胞凋亡的能力也減弱;Western-Blot結(jié)果顯示Bax蛋白質(zhì)表達(dá)程度降低,但Bcl-2蛋白質(zhì)表達(dá)程度無(wú)明顯變化。結(jié)論:EGCG可能通過(guò)活化p38αMAPK-Bax途徑誘導(dǎo)NB4細(xì)胞凋亡。第二部分 EGCG通過(guò)SHP-1調(diào)節(jié)的p38αMAPK-Bax途徑誘導(dǎo)NB4細(xì)胞凋亡目的:本實(shí)驗(yàn)主要觀察EGCG是否通過(guò)SHP-1調(diào)節(jié)的p38αMAPK-Bax途徑誘導(dǎo)NB4細(xì)胞凋亡。方法:分別用不同濃度的EGCG處理NB4細(xì)胞,或預(yù)先用SHP-1的抑制劑NSC87877處理NB4細(xì)胞半小時(shí),再用相應(yīng)濃度的EGCG處理NB4細(xì)胞。用CCK-8方法測(cè)定NB4細(xì)胞增殖狀況,用FITC-Annexin V/PI雙染色法檢測(cè)NB4細(xì)胞凋亡狀況,用Western-Blot檢測(cè)SHP-1、p38αMAPK、p-p38αMAPK和Bax蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。結(jié)果:Western-Blot檢測(cè)結(jié)果顯示EGCG能夠促進(jìn)SHP-1蛋白質(zhì)表達(dá)。預(yù)先用SHP-1抑制劑NSC87877處理后,SHP-1蛋白質(zhì)的表達(dá)水平明顯降低;同時(shí)CCK-8結(jié)果顯示EGCG抑制細(xì)胞增殖的能力減弱,流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明EGCG促進(jìn)細(xì)胞凋亡的能力也減弱,Western-Blot檢測(cè)結(jié)果顯示p-p38αMAPK和Bax蛋白質(zhì)表達(dá)水平隨之減少,但p38αMAPK蛋白質(zhì)表達(dá)水平無(wú)明顯變化。結(jié)論:EGCG通過(guò)SHP-1調(diào)節(jié)的p38αMAPK-Bax途徑誘導(dǎo)NB4細(xì)胞凋亡。
【圖文】：

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文，，NB4 細(xì)胞凋亡率與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異，但在濃度為 30μmol/L 時(shí)，細(xì)胞率為 51.21%±0.01，與對(duì)照組相比有極顯著差異 (p<0.01) (圖 1.2)，說(shuō)明 EG夠誘導(dǎo) NB4 細(xì)胞凋亡。3 EGCG 對(duì)相關(guān)凋亡蛋白質(zhì)表達(dá)的影響分別以0、10、20和30μmol/L的EGCG 處理NB4 細(xì)胞 24小時(shí)，用 Western 測(cè)相關(guān)凋亡蛋白情況。結(jié)果顯示，在 30μmol/L EGCG 終濃度時(shí)，Bax 蛋白質(zhì)水平明顯升高(p<0.05)，然而 Bcl-2 蛋白質(zhì)表達(dá)水平明顯減低(p<0.05) (圖 1.3

圖 1.2 EGCG 對(duì) NB4 細(xì)胞凋亡的影響Fig 1.2 Effect of EGCG on the apoptosis of NB4 cells
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R733.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 王衛(wèi)東;陳正堂;;Bcl-2/Bax比率與細(xì)胞“命運(yùn)”[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2007年04期

2 方建晨;蘇祖蘭;邱耕;何丹;馮智英;朱明芬;李莉;何向蕾;;淋巴瘤Daudi細(xì)胞SHP-1甲基化及5-雜氮脫氧胞苷抑制性效應(yīng)的研究[J];中華血液學(xué)雜志;2006年10期

本文編號(hào)：2572928