【摘要】：【目的】本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同TNM分期結(jié)直腸癌患者血清循環(huán)腫瘤細(xì)胞,分析其與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、腫瘤分化程度等關(guān)系；利用ELISA法檢測不同TNM分期結(jié)直腸癌患者血清中白介素8的表達(dá)水平,分析不同TNM分期結(jié)直腸癌患者血清中CXCL8表達(dá)情況,以期探討檢測結(jié)直腸癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cells, CTCs)和白介素8的表達(dá)相互關(guān)系以及臨床價(jià)值,并探討其可能機(jī)理。[方法]1、采集2015年4月1日至2016年4月1日昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院結(jié)直腸外科71例結(jié)直腸癌患者外周血10ml,采集2015年6月1日至2015年7月1日共10例健康志愿者外周血10ml作為對照組。2、利用外周血淋巴細(xì)胞分離法制備外周血單個(gè)核細(xì)胞懸液,平分為試驗(yàn)管和對照管,試驗(yàn)管分別標(biāo)記CK19、CD45單克隆抗體。陰性對照管分別加入同型對照抗體。3、已標(biāo)記好的外周血單個(gè)核細(xì)胞通過流式細(xì)胞儀,檢測CK19+/CD45的細(xì)胞,作為結(jié)直腸癌患者CTCs的標(biāo)志。4、采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定血清CXCL8含量。5、所得結(jié)果用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理,實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用x2檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。[結(jié)果]1、71例結(jié)直腸癌患者中33例檢測出CTCs, CTCs的陽性率為46.48%,10例健康志愿者中未檢測出CTCs,兩組陽性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2、71例結(jié)直腸癌患者根據(jù)臨床TNM分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期)不同,CTCs陽性率分別為7.69%、36.84%、52.00%和71.43%,四組陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；根據(jù)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況(N0、N1、N2期)不同,CTCs陽性率分別為24.00%、48.14%、73.68%,三組陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);根據(jù)臨床腫瘤浸潤深度(T1、T2、T3、T4期)不同,患者CTCs陽性率分別為20.00%、25.92%、44.00%、78.57%,四組陽性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。根據(jù)腫瘤分化程度(高分化、中分化、低分化)不同,患者CTCs陽性率分別為18.75%、40.00%、65.00%,三組陽性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、結(jié)直腸癌患者血清CXCL8水平明顯增高,與正常對照組差異顯著。4、結(jié)直腸癌惡性程度越高、分化越差,血清CXCL8水平升高,中高分化組和低分化組差異顯著；結(jié)直腸癌有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組與無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組血清CXCL8水平差異顯著。[結(jié)論]1、應(yīng)用流式細(xì)胞檢測技術(shù),可以檢測到結(jié)直腸癌患者外周血CTCs。2、結(jié)直腸癌患者臨床分期越晚、腫瘤浸潤越深、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越多、腫瘤分化越差,其CTCs的檢出率越高；TNM分期與血清CXCL8含量呈正相關(guān),即隨著TNM分期改變,患者血清中CXCL8的表達(dá)逐漸增加,其高表達(dá)是患者預(yù)后不良的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素。3、結(jié)直腸癌患者血清CXCL8含量明顯高于健康人組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4、不同TNM分期結(jié)直腸癌患者血清中CXCL8含量和循環(huán)腫瘤細(xì)胞數(shù)目為正相關(guān)關(guān)系。
【圖文】：

結(jié)果逡逑在ＷＦＳＣ－Ｈ為橫坐標(biāo)、ＦＬ３－Ｈ為縱坐標(biāo)的散點(diǎn)圖中設(shè)口，圈出Ａｎｔｉ－ＣＤ４５－ＣＰ逡逑表達(dá)陰性的細(xì)胞；從該群細(xì)胞中確定表達(dá)ＣＫ１９－ＦＩＴＣ陽性的細(xì)胞（見圖１、圖２）。逡逑Ｉ＾ＦＵ邋ｌＯＯ／ＦＳＬｍ邐－ｎ逡逑，＿＿，邐＾逡逑客—逡逑ｉ邋＾邐＂邐－逡逑－邐Ｉ逡逑１６．５％逡逑。邐邐邋邐逡逑邐山邐山．Ｉ邋．邐１，０：邐邐邐７。！邐；１0．逡逑ＣＫ１９．ＦＩＴＣ邐ＣＫ１９－Ｆｒｒｃ逡逑圖１邐圖２逡逑１結(jié)直腸癌患者外周血中謝ｉｇ的表達(dá)逡逑７１例結(jié)直腸癌患者外周血中檢測出循環(huán)腫瘤細(xì)胞陽３３例，陽性率為逡逑４６．４８％（３３／７１），１０例健康志愿者外周血中均未檢測出循環(huán)腫瘤細(xì)胞陽性，兩組逡逑循環(huán)腫瘤細(xì)胞的陽性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Ｐ＜０．０５）。逡逑２邋ＣＴＣｓ檢出陽性與ＴＮＭ分期的相關(guān)性逡逑７１例結(jié)直腸癌患者根據(jù)第七版ＡＪＣＣ的結(jié)直損癌ＴＮＭ分期標(biāo)準(zhǔn)分為４組，逡逑其中Ｉ期患者１３例，１例檢測出循環(huán)腫瘤細(xì)跑陽性（７．６９％），，ＩＩ期患者１９例，逡逑７例檢測出循環(huán)腫瘤細(xì)胞（３６．８４％）

研究結(jié)果顯示：結(jié)直腸癌有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組與無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組血清ＣＸＣＬ８水平差異顯逡逑著。逡逑６血清中ＣＸＣＬ８和ＣＴＣｓ數(shù)目相關(guān)性分析（見圖１－４）逡逑研究結(jié)果顯示：經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，不同ＴＮＭ分期結(jié)直腸癌患者血清中ＣＸＣＬ８逡逑含量和循環(huán)腫瘤細(xì)胞數(shù)目為正相關(guān)關(guān)系。逡逑

本文編號：2571679