發(fā)布時間：2019-11-25 20:49

【摘要】：研究背景:AML(急性髓系白血病)是造血系統(tǒng)的一類惡性腫瘤,對其分子生物學特征和臨床治療方面,除了急性早幼粒細胞白血病(M3)有比較深入的了解,能夠針對靶基因采取誘導分化治療外,其他的髓系白血病仍以聯(lián)合化療為主,其次為自體造血干細胞移植及異基因造血干細胞移植。部分患者經(jīng)化療可獲得完全緩解,但多數(shù)腫瘤患者5年CCR(持續(xù)完全緩解)概率較低,治療失敗的主要原因是體內(nèi)殘留白血病復發(fā)。異基因造血干細胞移植后腫瘤復發(fā)率較低,但一般只適合50歲以下的患者,需要HLA(人類白細胞抗原)配型相合的供者,并發(fā)癥較多,費用高,能接受異基因造血干細胞移植治療的患者較少,而且仍有部分患者復發(fā)。因此,包括急性白血病在內(nèi)的多種血液系統(tǒng)惡性腫瘤的攻克需要發(fā)展新的治療方法。目的:TAA-CTL(腫瘤相關(guān)抗原特異性細胞毒性T淋巴細胞)由腫瘤抗原激活并賦予抗腫瘤的特異性。目前已經(jīng)可以采用多種手段在體外制備具有腫瘤相關(guān)抗原特異性的免疫活性CTL,并在臨床試驗中展示初步其有效的抗腫瘤作用。盡管如此,由于受不同個體和不同腫瘤抗原的多樣性、腫瘤抗原遞呈的有效性以及特異性腫瘤抗原鑒定和分離技術(shù)等條件的限制,目前TAA-CTL的制備技術(shù)尚需進一步完善,也限制了它的廣泛應(yīng)用。本研究旨在建立TAA-CTL治療技術(shù)體系,并對靶向多種腫瘤相關(guān)抗原(NY-ESO-1、MAGEA3、PRAME、Survivin 和 WT-1)的自體 TAA-CTL治療AML的安全性和有效性予以初步探討。方法:抽取AML患者外周血100ml,分離外周血單個核細胞,培養(yǎng)DC(樹突細胞)并附載多種白血病相關(guān)抗原混合多肽(NY-ESO-1、MAGEA3、PRAME、Survivin和WT-1),將DC與自體外周血單個核細胞共培養(yǎng),制備白血病抗原特異性T細胞,3周后回輸患者�；剌敽笸瑫r予以皮下注射IL-2 100-150萬IU/天× 14天。9例患者均為中高危AML(非M3)。回輸TAA-CTL前,骨髓復發(fā)者2例、MRD+(流式細胞術(shù))者3例、MRD-者4例;中位年齡51歲(30-68歲)。留取回輸前的TAA-CTL用于流式細胞術(shù)測定細胞表型特征。在TAA-CTL輸注患者體內(nèi)后分別于第一周,第二周,第三周,第四周抽取患者外周血,提取單個核細胞用于ELISpot檢測,根據(jù)其分泌γ-干擾素水平測定TAA-CTL的活性。結(jié)果:每個患者接受1-3次TAA-CTL細胞回輸,每次1.04-5.08×107個細胞/m2。全部9例患者輸注過程中和輸注后無明顯的不良反應(yīng),2例患者使用IL-2后出現(xiàn)發(fā)熱和注射部位腫脹,停用IL-2后癥狀消失。9例患者中用作輔助治療的4例MRD-患者,目前仍為MRD-(10-23個月,隨訪中,均未接受其它治療)。2例由MRD-轉(zhuǎn)為MRD+的患者,經(jīng)過1個療程TAA-CTL細胞治療后,MRD均轉(zhuǎn)為持續(xù)陰性(9個月和13個月,隨訪中,均未接受其它治療)。1例經(jīng)多個療程化療后MRD仍為陽性的患者,回輸TAA-CTL細胞前給予地西他濱(10mg/m2,d1-5)1個療程后,MRD轉(zhuǎn)為陰性,但5個月后患者復發(fā),再次行TAA-CTL聯(lián)合地西他濱+CAG方案后疾病仍未緩解,后接受誘導化療,但原發(fā)病始終未緩解,目前予以姑息治療中,病情穩(wěn)定。2例復發(fā)患者中,1例經(jīng)過1個療程TAA-CTL的后疾病穩(wěn)定,2個月后再次給予回輸TAA-CTL,同時給予地西他濱聯(lián)合CAG方案化療后達到CR,此后予以強化鞏固治療,但疾病于6個月后復發(fā),并于8個月后因感染及出血死亡;另1例經(jīng)過1個療程TAA-CTL+地西他濱聯(lián)合CAG方案化療后達到CR(9個月,隨訪中,未接受其他治療)。CTL細胞表型檢測部分:培養(yǎng)細胞以CD3+T為主(93.5%,56.5%-99%),少量的 NK 細胞(CD3-D56+,4.9%,0.3%-9.8%)和極少量的B細胞(CD19+,0.3%,0-0.6%)。CD3+T細胞中CD8+T細胞和CD4+T細胞分別占 43.2%(5.5%-64%),和 37.4%(3.2%-57.1%)。CD8+T 細胞中,效應(yīng)記憶 T細胞(CD45RO+CD62L-CCR7-)占 50.2%(3.9%-78%),中樞記憶 T 細胞(CD45RO+CD62L+CCR7+)占 13.50%(0.8%-21%),初始 T 細胞(CD45RA+CD62L+CCR7+)占 2.1%(0.5%-3.9%);CD4+T 細胞中,效應(yīng)記憶 T 細胞占 46.7%(5.6%-63.3%),中樞記憶 T 細胞占 5.7%,(0-12.3%),初始 T 細胞占 3.9%(0-8.9%)。ELISpot實驗顯示,對于接受過1次TAA-CTL治療患者中,動態(tài)檢測患者外周血SFC(斑點形成細胞)變化,提示隨著時間推移,SFC曲線逐漸升高,后逐漸回落,平均最高峰發(fā)生在輸注細胞后2.3周,部分接受2-3次細胞治療的患者,結(jié)合患者臨床表現(xiàn),持續(xù)緩解患者外周血檢測的SFC數(shù)量較多,最多可達253/2*105個細胞,而原發(fā)病數(shù)月內(nèi)復發(fā),持續(xù)不緩解患者SFC數(shù)量低,曲線低平。結(jié)論:靶向多種腫瘤相關(guān)抗原(NY-ESO-1、MAGEA3、PRAME、Survivin和WT-1)的自體TAA-CTL治療AML具有很好的安全性,并初步顯示其臨床療效。TAA-CTL制備過程中可產(chǎn)生一系列細胞,流式檢測結(jié)果以效應(yīng)記憶T細胞為優(yōu)勢亞群,ELISpot實驗結(jié)果提示斑點形成的數(shù)目多少與患者療效密切相關(guān)。但其長期療效、以及聯(lián)合地西他濱等化療是否有助于進一步增強自體TAA-CTL的療效等有待于進一步研究。
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R733.71

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9 謝曉恬;;兒童急性髓系白血病的診斷與治療[J];實用兒科臨床雜志;2011年15期

10 ;探尋白血病線索[J];世界科學;2013年08期

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10 金潔;;急性髓系白血病的治療進展[A];第七屆全國血液免疫學學術(shù)大會暨2008年浙江省血液病學術(shù)年會論文匯編[C];2008年

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本文編號：2565853