發(fā)布時間：2019-11-11 09:49

【摘要】：目的:胃癌(Gastric cancer,GC)是發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤,居世界惡性腫瘤發(fā)病率的第四位和死亡率的第二位[1,2]。2012中國腫瘤登記年報數(shù)據(jù),在中國腫瘤登記地區(qū),胃癌占惡性腫瘤發(fā)病率的第二位和死亡率的第三位,嚴(yán)重威脅著人們的健康和生命[3]。隨著醫(yī)療的進步,有關(guān)胃癌的診治研究不斷完善,但其病死率仍呈逐年上升趨勢,防治形勢嚴(yán)峻[4]。因此,探索胃癌發(fā)病機制,以期早期發(fā)現(xiàn)、診斷和治療胃癌仍然是當(dāng)前研究的重點。近年來,表觀遺傳學(xué)在惡性腫瘤中的研究愈來愈受到重視。研究表明,DNA甲基化作為一種重要的表觀遺傳機制,在胃癌的發(fā)病過程中起了重要作用[5,6]。在機體的抗過氧化物酶防御體系中,谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)是其中重要的組成部分,它對人體過氧化氫及脂質(zhì)過氧化物等活性氧成分的清除發(fā)揮了特有的功能。GPX3是GPX的一種重要細(xì)胞外亞型[7]。研究顯示,GPX3基因啟動子Cp G島的高甲基化可使GPX3的蛋白表達(dá)下調(diào),導(dǎo)致體內(nèi)過氧化物含量增多,參與惡性腫瘤的發(fā)病過程[8-10]。本組使用甲基化PCR(methylation specific PCR,MSP)檢測胃癌與慢性胃炎對照組的血標(biāo)本中GPX3基因啟動子區(qū)甲基化的狀態(tài),免疫組化法檢測胃癌與正常對照組的組織標(biāo)本中GPX3蛋白表達(dá)情況,探討GPX3基因啟動子Cp G島的甲基化在胃癌發(fā)病中的作用機制及與臨床病理特征間的聯(lián)系。方法:采用病例對照研究的方法,收集本院2012-2014年期間住院患者共70例,所有入選者均經(jīng)過詳細(xì)的問卷調(diào)查,詳細(xì)了解個人史及家族史,并排除其它腫瘤病史。所有入選病例均簽署知情同意書。分組:慢性胃炎組35例,胃癌組35例。胃炎組男性18例,女性17例,年齡35-75歲,平均年齡60.35±4.54歲。胃癌組男性21例,女性14例,年齡45-80歲,平均年齡65.65±4.34歲,兩組患者在年齡及性別上無統(tǒng)計學(xué)差異。各組病例分別抽取全血2ml,立即存放于液氮罐轉(zhuǎn)運,然后將標(biāo)本存放于-80℃冰箱待進一步檢測。每份血標(biāo)本分別提取基因組DNA,通過亞硫酸氫鹽處理后采用甲基化特異性PCR(MSP)方法來檢測胃炎組和胃癌組血標(biāo)本中GPX3基因啟動區(qū)Cp G島甲基化程度。胃炎組通過胃鏡檢查留取胃粘膜組織標(biāo)本。胃癌組患者均于我院普外科行胃切除手術(shù),分別取癌灶中央非壞死區(qū)域標(biāo)本及與之配對的距離癌組織5cm以上的癌旁組織標(biāo)本,均經(jīng)病理組織學(xué)專家診斷證實后入組。所有手術(shù)病例在治療前均未接受過放療和化療。所取組織標(biāo)本給予蠟塊包埋,采用免疫組化的方法來檢測胃炎組、胃癌組及癌旁組標(biāo)本中GPX3蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS 16.0軟件對所得結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析,計數(shù)資料以百分率表示,組間比較采用?2檢驗進行統(tǒng)計分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1檢測胃炎組(10/35,28.57%)及胃癌組(23/35,65.71%)血標(biāo)本GPX3啟動子Cp G島甲基化狀態(tài),結(jié)果顯示胃癌組的甲基化表達(dá)顯著高于胃炎組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2胃癌組GPX3啟動子Cp G島甲基化狀態(tài)與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與患者年齡、性別、腫瘤分化程度、浸潤情況、TNM分期無關(guān),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3檢測慢性胃炎組(26/35,74.29%)、胃癌組(13/35,37.15%)、癌旁組(23/35,65.71%)組織標(biāo)本中的GPX3蛋白表達(dá)情況,慢性胃炎組及癌旁組GPX3蛋白表達(dá)顯著高于胃癌組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4慢性胃炎組(26/35,74.29%)的GPX3蛋白表達(dá)與癌旁組(23/35,65.71%)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5胃癌組GPX3蛋白表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。與患者年齡、性別和腫瘤的分化程度、浸潤情況、TNM分期無關(guān),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1胃癌血標(biāo)本中GPX3啟動子區(qū)Cp G島甲基化程度高,而癌組織標(biāo)本GPX3蛋白表達(dá)明顯下調(diào),推測GPX3通過啟動子區(qū)Cp G島甲基化導(dǎo)GPX3蛋白下調(diào)參與胃癌的發(fā)生進程。2胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組GPX3啟動子Cp G島甲基化表達(dá)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,提示GPX3啟動子Cp G島甲基化與胃癌的進展,有潛力成為判斷胃癌進展和預(yù)后的預(yù)警分子指標(biāo)。3胃癌組血標(biāo)本中的GPX3啟動子區(qū)Cp G島甲基化程度與癌組織標(biāo)本中的GPX3蛋白表達(dá)均與患者年齡、性別和腫瘤的分化程度、浸潤情況、TNM分期無關(guān),而與淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān),進一步提示GPX3參與胃癌進展相關(guān)機制。4慢性胃炎組GPX3啟動子Cp G島甲基化程度低,而組織標(biāo)本中GPX3蛋白表達(dá)上調(diào),進一步表明GPX3發(fā)揮控制細(xì)胞惡變的抑癌基因作用。5癌旁組和慢性胃炎組中GPX3蛋白表達(dá)相一致,均顯著高于胃癌組,表明在控制細(xì)胞惡變轉(zhuǎn)化中GPX3發(fā)揮一定的作用。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 沈磊;賀遠(yuǎn)龍;張巍巍;耿長新;;GPX3表達(dá)與消化系腫瘤關(guān)系的研究進展[J];臨床與實驗病理學(xué)雜志;2014年06期

2 強少盈;劉文超;;甲基化和去甲基化在腫瘤發(fā)生與治療中的作用[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2011年11期

3 Pooja Malhotra;Rakesh Kochhar;Kim Vaiphei;Jai Dev Wig;Safrun Mahmood;;Aberrant promoter methylation of p16 in colorectal adenocarcinoma in North Indian patients[J];World Journal of Gastrointestinal Oncology;2010年07期

4 邢傳平,劉斌,董亮;免疫組織化學(xué)標(biāo)記結(jié)果的判斷方法[J];中華病理學(xué)雜志;2001年04期

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本文編號：2559200