【摘要】：目的探討M3R在NSCLC細(xì)胞增殖、侵襲和遷移中的作用及信號(hào)機(jī)制。方法 CCK-8法、劃痕法和Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)M3R拮抗劑對(duì)NSCLC細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響;鈣成像觀察M3R拮抗劑對(duì)卡巴膽堿誘導(dǎo)的內(nèi)鈣增加的影響;Western blot驗(yàn)證M3R拮抗劑對(duì)細(xì)胞增殖、遷移和細(xì)胞周期相關(guān)信號(hào)分子蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果M3R拮抗劑1.25~80μmol·L~(-1)作用48 h后,能明顯抑制NSCLC細(xì)胞增殖,抑制效果為R2-8018達(dá)非那新(Darifenacin),H1299H460;p-Akt、p-GSK3β、cyclin D1蛋白表達(dá)水平均隨M3R拮抗劑作用時(shí)間延長明顯下降,p21蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào);R2-8018處理后,H1299細(xì)胞遷移和侵襲能力下降,MMP-2蛋白表達(dá)水平明顯下降。結(jié)論拮抗M3R抑制Akt/GSK3β信號(hào)通路,抑制cyclin D1活性并上調(diào)p21,阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程,進(jìn)而抑制細(xì)胞增殖;并通過下調(diào)MMP-2抑制H1299細(xì)胞的遷移和侵襲。

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