大蒜素制劑對人胰腺癌細胞Capan-1生長增殖作用的體外實驗研究
發(fā)布時間:2019-11-05 21:40
【摘要】:[目的]:觀察研究大蒜素制劑(Allicin)對體外培養(yǎng)的人胰腺癌細胞株Capan-1生長增殖的影響及其對Capan-1細胞周期的作用,以及細胞體外遷移能力的影響,為大蒜素制劑用于臨床胰腺癌的治療提供實驗依據(jù)。[方法]:1測定體外培養(yǎng)的人胰腺癌細胞株Capan-1的細胞活力、貼壁率,應用四唑鹽比色法(MTT)測定Capan-1細胞在不同時間、不同濃度的OD值,繪制生長曲線,確定最佳細胞接種濃度及藥物干預區(qū)間。2.四唑鹽比色法(MTT)測定不同濃度,不同作用時間的大蒜素制齊(Allicin)對人胰腺癌細胞株Capan-1的生長增殖抑制作用,測定其IC50,并于倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學變化。3.流式細胞術(shù)檢測大蒜素制劑(Allicin)對Capan-1細胞周期的影響并分析證實是否有誘導凋亡的作用;細胞劃痕實驗檢測大蒜素制劑(Allicin)對人胰腺癌細胞株Capan-1株遷移能力的影響。[結(jié)果]:1.人胰腺癌細胞株Capan-1常規(guī)培養(yǎng),存活率均95%符合本實驗要求,MTT測定的生長曲線提示按照6×103/孔的密度接種于96孔板內(nèi)可提供足夠的細胞生長空間及營養(yǎng)成分,使細胞于接種24小時后,適應新環(huán)境,逐漸進入快速繁殖期。2.選取6×103/孔濃度Capan-1細胞接種于96孔板后的24—72小時左右作為藥物干預實驗區(qū)間,該區(qū)間能夠保證細胞始終處于一個穩(wěn)定的對數(shù)生長期;在此條件下MTT法檢測不同濃度大蒜素制劑對Capan-1細胞生長抑制率具有時間和劑量依賴性。3.流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示大蒜素制劑可使Capan-1細胞周期阻滯于G2/M期,抑制細胞有絲分裂的進程,同時可見典型的亞二倍體峰即凋亡峰(AP)出現(xiàn);TUNEL凋亡實驗進一步證實大蒜素制劑能誘導Capan-1細胞凋亡的發(fā)生;細胞劃痕實驗結(jié)果顯示大蒜素制劑能夠明顯降低人胰腺癌Capan-1細胞的遷移能力。[結(jié)論l:本實驗結(jié)果示:1.不同濃度大蒜素制劑(Allicin)作用不同時間對人胰腺癌細胞Capan-1生長增殖具有明顯的抑制作用,呈時-效和量-效依賴關(guān)系,具有時間依賴性和劑量依賴性。2.大蒜素制劑(Allicin)能誘導人胰腺癌細胞Capan-1凋亡,并將細胞周期阻滯于G2/M期,從而抑制細胞的分裂增殖。3.大蒜素制劑能夠明顯降低人胰腺癌Capan-1細胞的遷移能力。4.大蒜素制劑(Allicin)可能是有前景的抑制胰腺癌細胞的藥物。
【圖文】:
由上圖細胞培養(yǎng)結(jié)果可W看出不同時間段的不同接種濃度的人膀腺癌逡逑Capan-1細胞生長狀況均屬良好,無細菌污染,雜質(zhì)聚集等現(xiàn)象。然而通過倒置逡逑顯微鏡視野下可看出細胞進入倍X検奔浼炊允て誄魷質(zhì)畢嗖煌又峙ǘ儒義舷赴榧溆脅鉅歟皇倍蝸赴芏扔脅鉅歟枰徊絞笛櫧攔雷羆呀又置芏。照辶x
本文編號:2556360
【圖文】:
由上圖細胞培養(yǎng)結(jié)果可W看出不同時間段的不同接種濃度的人膀腺癌逡逑Capan-1細胞生長狀況均屬良好,無細菌污染,雜質(zhì)聚集等現(xiàn)象。然而通過倒置逡逑顯微鏡視野下可看出細胞進入倍X検奔浼炊允て誄魷質(zhì)畢嗖煌又峙ǘ儒義舷赴榧溆脅鉅歟皇倍蝸赴芏扔脅鉅歟枰徊絞笛櫧攔雷羆呀又置芏。照辶x
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